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nHA/PCL复合材料组分配比对成骨细胞骨相关基因表达的影响研究 被引量:1
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作者 唐俊龙 王朝元 刘介 《绿色科技》 2012年第5期277-279,共3页
通过半定量反转录RT-PCR的方法,研究了不同配比的复合材料纳米羟基磷灰石/聚已内酯/(nHA/PCL)(nHA∶PCL1=40∶60和nHA∶PCL2=60∶40)对成骨细胞骨相关基因(成骨细胞碱性磷酸酶、骨钙素蛋白、骨粘连蛋白和骨桥蛋白等)表达的影响.结果表明... 通过半定量反转录RT-PCR的方法,研究了不同配比的复合材料纳米羟基磷灰石/聚已内酯/(nHA/PCL)(nHA∶PCL1=40∶60和nHA∶PCL2=60∶40)对成骨细胞骨相关基因(成骨细胞碱性磷酸酶、骨钙素蛋白、骨粘连蛋白和骨桥蛋白等)表达的影响.结果表明:在nHA/PCL复合材料上生长的成骨细胞的骨钙蛋白、骨粘连蛋白和骨桥蛋白mRNA表达量上调;在PCL材料上生长的成骨细胞的骨钙蛋白、骨粘连蛋白和骨桥蛋白mRNA的表达量下调;而nHA/PCL和PCL均使碱性磷酸酶基因的表达下调。 展开更多
关键词 纳米羟基磷灰石/聚已内酯 细胞 相关基因表达
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全反式维A酸与骨形态发生蛋白联合应用对不同鼠源细胞骨钙素及成骨相关基因表达的影响 被引量:7
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作者 沈晨曦 李米 +1 位作者 李金源 毕文娟 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期287-296,共10页
目的探讨全反式维A酸(AT R A)与骨形态发生蛋白(B M Ps)单独或联合应用对小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)和大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的骨钙素(OCN)以及成骨相关基因ALP、OCN、Runx2表达的影响。方法传代培养MC3T3-E1细胞及BMSCs,分别经... 目的探讨全反式维A酸(AT R A)与骨形态发生蛋白(B M Ps)单独或联合应用对小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)和大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的骨钙素(OCN)以及成骨相关基因ALP、OCN、Runx2表达的影响。方法传代培养MC3T3-E1细胞及BMSCs,分别经不同浓度细胞因子刺激培养后分为10个组:空白对照组、ATRA组、5ng/ml BMP2/7组、50ng/ml BMP2/7组、5ng/ml BMP2组、50ng/ml BMP2组、ATRA+5ng/ml BMP2/7组、ATRA+50ng/ml BMP2/7组、ATRA+5ng/mlBMP2组、ATRA+50ng/mlBMP2组,采用免疫荧光染色观察细胞形态,免疫酶联吸附实验(ELISA)检测两种细胞OCN的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测ALP、OCN、Runx2基因的表达。结果免疫荧光染色观察结果显示,MC3T3-E1及BMSCs细胞生长状态良好,结构完整。单独应用ATRA可明显抑制两种细胞(MC3T3-E1及BMSCs)的OCN表达,第7天尤为明显:MC3T3-E1细胞ATRA单独组[(20.97±0.31)ng/ml]明显低于空白对照组[(33.45±0.55)ng/ml],BMSCs细胞ATRA单独组[(9.90±0.16)ng/ml]也明显低于空白对照组[(14.30±0.53)ng/ml],差异均有统计学意义(P<0.05)。单独应用BMPs可浓度依赖性地促进细胞OCN表达,且BMP2/7促进作用更强,50ng/ml BMP2/7作用后MC3T3-E1细胞的OCN浓度为(47.13±0.59)ng/ml,BMSCs的OCN浓度为(49.92±0.53)ng/ml,50ng/ml BMP2/7能够完全拮抗ATRA对细胞OCN表达的抑制作用(P<0.05)。RT-qPCR检测结果显示,单独应用ATRA可明显抑制MC3T3-E1细胞ALP、OCN基因的表达,但可促进Runx2基因的表达(P<0.05),单独应用BMPs呈浓度依赖性地促进MC3T3-E1细胞成骨相关基因的表达(P<0.05),ATRA可显著抑制BMPs对OCN基因表达的促进作用,但ATRA与50ng/ml BMP2/7可协同促进ALP基因的表达(P<0.05);单独应用ATRA第7天可显著促进BMSCsRunx2基因的表达,但可抑制ALP、OCN基因的表达(P<0.05),50ng/mlBMPs可显著促进BMSCsALP、Runx2基因的表达(P<0.05),50ng/mlBMP2/7可拮抗ATRA对ALP基因表达的抑制作用并促进其表达(P<0.05)。结论单独应用ATRA可抑制细胞OCN蛋白的表达,抑制细胞ALP、OCN基因的表达;BMP2/7可显著促进细胞OCN蛋白的表达,BMPs可促进成骨相关基因的表达;50ng/ml BMP2/7可完全拮抗ATRA对细胞的成骨抑制作用。 展开更多
关键词 全反式维A酸 形态发生蛋白 钙素 相关基因表达
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26-失碳-8-氧代-α-芒柄花萜醇对体外培养成骨细胞活性的影响 被引量:2
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作者 王朝元 宋超 +3 位作者 唐俊龙 魏甜甜 易继凌 杨光忠 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第2期33-37,共5页
为研究玉柏石松提取物26-失碳-8-氧代-α-芒柄花萜醇(26-NO-Ono)对成骨细胞活性的影响,采用MTT检测不同浓度26-NO-Ono(3.33,6.66,13.32,26.64μmol/L)对成骨细胞增殖率,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测成骨细胞内ALP活性,荧光定量PCR检测成... 为研究玉柏石松提取物26-失碳-8-氧代-α-芒柄花萜醇(26-NO-Ono)对成骨细胞活性的影响,采用MTT检测不同浓度26-NO-Ono(3.33,6.66,13.32,26.64μmol/L)对成骨细胞增殖率,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测成骨细胞内ALP活性,荧光定量PCR检测成骨细胞骨相关基因表达.结果表明:26-NO-Ono给药1d可促进成骨细胞增殖,给药3d可促进成骨细胞ALP活性.26-NO-Ono处理3d和9d会抑制骨涎蛋白(BSP)、I型胶原蛋白(Col-I)以及骨钙素蛋白(OCN)的基因表达;处理6d会促进上述基因的表达.26-NO-Ono长期处理(6d和9d)可以抑制骨桥蛋白(OPN)的基因表达,说明26-NO-Ono对成骨细胞的成骨活性的影响呈时间依赖性,剂量依赖性和细胞分化状态依赖性. 展开更多
关键词 26-失碳-8-氧代-α-芒柄花萜醇 细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶活性 相关基因mRNA的表达
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玉柏石松中甾体化合物对体外培养成骨细胞活性的影响 被引量:3
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作者 王朝元 胡蝶 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2014年第2期22-27,共6页
为研究玉柏石松中甾体化合物豆甾烷-3-酮-21-羧酸(SA)对体外培养小鼠成骨细胞系MC3T3-E1活性的影响,用Alamar Blue法检测了成骨细胞增殖率,碱性磷酸酶试剂盒检测了细胞中碱性磷酸酶活性,茜素红染色检测了成骨细胞矿化水平,荧光定量PCR... 为研究玉柏石松中甾体化合物豆甾烷-3-酮-21-羧酸(SA)对体外培养小鼠成骨细胞系MC3T3-E1活性的影响,用Alamar Blue法检测了成骨细胞增殖率,碱性磷酸酶试剂盒检测了细胞中碱性磷酸酶活性,茜素红染色检测了成骨细胞矿化水平,荧光定量PCR检测了成骨细胞骨分化相关基因的表达.结果显示:8μmol/L和16μmol/L的SA处理细胞8 d能抑制成骨细胞碱性磷酸活性;处理细胞16 d能提高骨细胞矿化水平.SA抑制成骨早期分化相关基因(Runx-2和Osterix)的表达,促进骨基质蛋白OPN和骨重建相关转录因子(Jun-D,Fra-1和Fra-2)的表达.故SA具有促进骨折愈合的成骨活性,可能通过促进相关转录因子表达,骨折断面旧骨的吸收和骨基质钙化等方式完成. 展开更多
关键词 豆甾烷-3-酮-21-羧酸(SA) 活性 分化相关基因表达 矿化
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Maturation of Osteoblast-Like Saos-2 on Hydroxyapatite Ceramics
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作者 王朝元 Duan Yourong +4 位作者 Boban Markovic James Barbara C.Rolfe Howlett Zhang Xingdong Hala Zreiqat 《High Technology Letters》 EI CAS 2004年第2期46-50,共5页
Hydroxyapatite ceramics (HA) has been proved to be excellent in biocompatibility and bioactivity. However, limited information is available concerning how HA ceramics affects the maturation of osteoblasts in molecular... Hydroxyapatite ceramics (HA) has been proved to be excellent in biocompatibility and bioactivity. However, limited information is available concerning how HA ceramics affects the maturation of osteoblasts in molecular biological level in vitro. This study examines the mRNA expression and protein production of bone-related genes in osteoblast-like cell line (Saos-2) cultured on HA disks. Saos-2 cells are seeded onto the substrates and cultured for 18 days. Harvested cells are tested for the cell growth rate, expression of mRNAs for osteocalcin and alkaline phosphatase, and protein production of bone sialoprotein and osteocalcin. MTS assay shows that cell proliferates well on HA ceramic substrate. After 9d, bone sialoprotein and osteocalcin protein production in SaPS-2 increases more on HA surfaces than on control material. As bone sialoprotein and osteocalcin are the genes to be highly expressed at the late stage of osteoblast differentiation, this study reveals that after long time culture in HA, HA can induce Saos-2 maturation. The behavior of Saos-2 on HA surfaces revealed in this study provides valuable information for the understanding of the biocompatibility and bioactivity of HA ceramics. 展开更多
关键词 羟磷灰石制陶业 细胞增殖 相关骨基因表达 熟化 SAOS-2 分子生物学
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