吗啡的控温相分离胶体金标记免疫分析

首次将胶体金作为标记物引入相变免疫分析中 ,建立了吗啡免疫分析的新方法。该分析方法是将吗啡抗体与温度敏感型水凝胶偶联 ,胶体金标记吗啡全抗原 ,再进行相变分离 ,最后用可见吸收光谱仪进行检测。本方法的两个重要特点是 :( 1)利用温敏水凝胶的相变特性进行均相反应和异相分离 ,缩短了免疫反应时间 ,简化了步骤 ;( 2 )利用胶体金快速稳定吸附蛋白质的特性进行标记 ,利用胶体金本身的颜色 ,可进行定性检测 ,或者用常规的可见吸收光谱仪进行定量检测 ,对仪器要求简单 ,适用于临床检测的要求。

甲基睾酮的控温相分离荧光免疫分析

本文报道一种新的甲基睾酮 ( MT)测定的免疫分析法。通过将 MT与牛血清白蛋白 ( BSA)偶联制得了 MT全抗原 MT-3 -BSA( Ag MT)。将 Ag MT经兔子免疫获得了针对MT的多克隆抗体 ( Ab MT)。与温度敏感性水凝胶偶联的抗原 ( PNIP-Ag M T)和游离半抗原 MT竞争性地与有限量的异硫氰基荧光素标记抗体 ( Ab MT-FITC)反应。根据临界析相温度以上免疫复合物沉淀的特性进行分离 ,降低背景干扰。该法对 MT测定的线性范围在 2 7.5ng/m L～ 1 .1μg/m L ,检出限为 2 7.5ng/m L。MT在人血清中的回收率比较满意。

以萘酰亚胺衍生物基荧光高分子为载体和指示剂的相分离免疫分析方法

以4-甲氧基-N-(2-N',N'-二甲基氨基乙基-N'-烯丙基)萘二甲酰亚胺氯化铵(DMNAA)为荧光单体,合成了一种pH敏感荧光高分子聚N-异丙基丙烯酰胺-4-甲氧基-N-(2-N',N'-二甲基氨基乙基-N'-烯丙基)萘二甲酰亚胺氯化铵-N,N-二甲基氨丙基甲基丙烯酰胺[P(NIP-DMAPM-DMNAA)].采用共聚法将日本血吸虫抗原(SjAg)固定在P(NIP-DMAPM-DMNAA)上,制备P(NIP-DMAPM-DMNAA)-SjAg连接物,与日本血吸虫抗体(待测,SjAb)发生免疫反应后,调节pH值,使荧光高分子相变分离高分子-免疫组分连接物,最后,利用蛋白A对抗体的亲和性捕获P(NIP-DMAPM-DMNAA)-SjAg-SjAb,通过测定高分子自身的荧光信号来定量SjAb.该新型高分子具有良好的荧光特性,对pH响应快速,37℃下相转变pH值为7.2,分离免疫复合物时造成的损害低.与传统相分离免疫分析比较,新方法通过高分子相变分离和蛋白A捕获双重分离作用,消除了非特异性组分和未反应的特异性免疫成分等的干扰;利用高分子自身的荧光信号检测,无须另外的标记物,大大提高了免疫分析的简便性.以日本血吸虫抗体为分析对象,测得线性范围为1～1500ng/mL,抗体检出限为1.3ng/mL,相对标准偏差为3.6%(n=10),结果令人满意.

半自动生化仪在磁分离均相酶联免疫分析技术中的应用

本文对近年来兴起的磁分离均相酶联免疫分析技术(MAIA)中使用的Serono测定仪与半自动生化仪在测定性能上做了系统比较，尝试了用半自动生化仪开展MAIA技术的可能性。结果显示：如果对半自动生化分析仪比色方式做合理调整，完全可以替代Seronp专用测定仪开展MAIA技术，并且，在准确性上，很可能优于Serono仪，这对无Serono仪而需开展此项技术的实验室具有指导意义。