当归微波提取物相对分子质量的分布特征研究

目的应用提取物相对分子质量的分布特征研究微波强化植物材料溶剂提取机制。方法采用超滤膜和原子力显微镜对比分析传统回流和微波辅助提取对当归浸出物相对分子质量分布和形貌的影响。结果浸出物总量基本相同，对于相对分子质量小于3．0×10^4段内浸出物质量占总浸出物质量的比率，微波辅助提取比传统回流提取约增加24％；对于浸出物颗粒形态特征，二者均呈不规则岛屿状聚集体，传统回流为微波辅助提取所得颗粒高度的2倍。结论微波对高分子化合物起到分散作用，可以改变浸出物相对分子质量分布特征，在促进有效成分的快速浸出方面显著优于传统回流工艺。

牛初乳低相对分子质量提取物对小鼠免疫功能的影响

通过用分子截留量为10 ku的中空纤维超滤柱对牛初乳乳清进行超滤,所得滤液即为牛初乳低提取物,并用滤液对小鼠注射,进行免疫功能的研究.结果表明:牛初乳低相对分子质量提取物中含有多肽和18种氨基酸,乳糖含量为4.3%.牛初乳低相对分子质量提取物可显著提高小鼠外周血液淋巴细胞的比值.25 g/kg体重和50 g/kg体重剂量时可以显著提高小鼠巨噬细胞的吞噬功能(P<0.01);可恢复因环磷酰胺而受到抑制的小鼠血清溶血素抗体水平(P<0.01),且与剂量无关.在10 g/kg体重剂量时可以显著增强环磷酰胺模型小鼠二硝基氯苯所致的迟发型免疫反应(P<0.01),在25 g/kg体重和50 g/kg体重剂量时影响不显著.牛初乳低相对分子质量提取物可显著提高小鼠的免疫功能.

牛脾提取物相对分子质量分布及反相色谱图的研究与比较

目的：利用凝胶排阻色谱法对小牛脾提取物溶液及成年牛脾提取物(注射用转移因子)的相对分子质量分布进行分析及用RP-HPLC法对其反相色谱图进行比较。方法：凝胶排阻色谱法，采用TSK—GEL G2000SWXL色谱柱(30cm×7．81mm，5μm)，室温，流动相为三氟醋酸-乙腈-水(0．05：20：80)，流速0．5mL·min^-1，进样量20μL，检测波长214nm；高效液相色谱法，采用HAISIL300C18柱(4．6mm×250mm，5μm)，流动相A为0．1％三氟醋酸水溶液，B为0．1％三氟醋酸乙腈溶液，梯度洗脱，流速为1mL·min^-1，在220nm波长处检测，进样量为20μL。结果：应用这2种色谱系统对2种脾提取物的高分子物质、相对分子质量分布及反相色谱图进行了比较，表明小牛脾的提取物溶液与注射用转移因子无论从相对分子质量分布还是反相色谱图都有不同。结论：方法简便，结果重现性好。

黄芩半仿生提取法工艺条件的优选

目的以黄芩为模型中药,采用均匀设计优选黄芩的半仿生提取工艺条件。方法采用U9(91×33)均匀设计表,在饮片规格、煎提温度、煎提用水量、滤过、浓缩等条件相同的情况下,以3煎用水的pH值及总煎提时间为考察因素,以分子量≤1 000 Da提取物、黄芩苷、黄芩素、总黄酮、HPLC峰总面积为指标,将各指标测得值进行标准化处理,并经加权求和后得到综合评判指标Y值,并用JYSYSJ数据分析模块处理,优选黄芩半仿生提取法的工艺条件。结果按照实验设计得出,黄芩半仿生提取法工艺的最佳条件为:3煎用水的pH值依次为5.136 8、6.974 1、8.941 3;3煎总煎提时间为3.931 7 h。结论结合生产实际,确定3煎用水的pH值依次为5.0、7.0、9.0;提取时间依次为2h、1 h、1 h。验证性试验提取液的综合评价Y'值略高于预测值,表明黄芩用均匀设计优选出的SBE工艺参数可供在生产中试行。

二黄汤方药半仿生提取法工艺条件的优选

目的用均匀设计优选二黄汤方药半仿生提取的工艺条件。方法采用均匀设计U9(91×33)表,在方药规格、煎提温度、煎提用水量、滤过、浓缩等条件相同的情况下,以3煎用水的pH值及总煎煮时间为考察因素,分子量≤1 000 Da提取物、黄芩苷、盐酸小檗碱、甘草次酸、总生物碱为指标,将各指标测得值进行标准化处理,并经加权求和后得到综合评判指标Y值,用JYSYSJ软件处理,优化该方药半仿生提取的工艺条件。结果经综合分析评判,优选出二黄汤方药SBE法较佳的工艺条件为:3煎用水的pH值依次为A=3.603 2、B=6.503 9、C=8.765 6,3煎总提取时间为D=4.947 3。结论结合生产实际,确定3煎用水的pH值依次为3.5、6.5、8.8,提取时间依次为2.0 h、1.5 h、1.5 h。验证性试验提取液的综合评价Y′值接近预测值,表明该方药用均匀设计优选出的SBE工艺参数可供在生产中试行。

二黄汤半仿生提取药材组合方式的优选

目的优选半仿生法提取二黄汤方药组合方式。方法将方中三味中药(A黄芩、B黄连、C甘草)排列组合成5组,用优选的半仿生法工艺条件(煎煮3次,pH值依次为3.5、6.5、8.8,提取时间依次为2 h、1.5 h、1.5 h)提取,制得≤1 000 Da提取物,对其作黄芩苷、盐酸小檗碱、甘草次酸、总生物碱、≤1 000 Da提取物干浸膏的测定,将各指标测得值进行标准化处理,加权求和后得到综合评判Y值,Y值大者为优。结果 5个指标综合评判Y值:3组(AC+B)的Y值是6.160 7,最大;2组(AB+C)的Y值是-6.753 4,最小。结论用半仿生法提取二黄汤,方药组合方式以黄芩与甘草合提、黄连单提,再将2种提取液合并为佳。

二黄汤方药3种方法提取液的成分对比研究

目的:对二黄汤方药3种方法(半仿生法、半仿生-酶法、水提法)分子量≤1000 Da提取物作多指标成分比较,优选较佳的提取方法。方法:分别用半仿生-酶法(SBEE法)、半仿生提取法(SBE法)和水提法(WE法)制备该方药分子量≤1000 Da的3种提取物,对其作黄芩苷、盐酸小檗碱、甘草次酸、总生物碱、≤1000 Da提取物干浸膏得率的测定,将各指标测得值进行标准化处理,经加权求和后得综合评判指标Y值,Y值大者为优。结果:3种方法提取液的Y值大小顺序为:YSBEE>YSBE>YWE。结论:二黄汤方药的3种提取工艺中,以半仿生-酶法为佳。

牛膝中三萜皂苷类化合物的电喷雾电离串级质谱研究

采用大孔树脂柱层析分离方法分离提取牛膝 (Achyranthesbientata BI)中的三帖皂苷类化合物。通过相对分子质量及电喷雾电离多级串连质谱 (ESI-MSn)技术分别对牛膝提取物中的有效成分牛膝皂苷 (相对分子质量 95 6)、牛膝皂苷 (相对分子质量 794)进行定性分析 ,并提出了其电喷雾质谱碎裂机理。该方法样品处理简单 ,分析速度快且灵敏度高 ,适用作为牛膝有效成分三萜皂苷类物质鉴定的依据。

人肝癌组织α-L-岩藻糖苷酶的提取和鉴定

目的:提取人肝癌组织的α-L-岩藻糖苷酶(α-L-fucosidase,AFU)经纯化和鉴定后,为制备特异性多克隆抗体提供纯化的抗原.方法:运用超滤和离子交换层析等方法提取、纯化人肝癌组织的AFU,并经SDS-PAGE检测蛋白纯度及相对分子质量.根据荧光底物4-甲基微型酮-α-L-岩藻糖苷(4-methvlumbelliferyl-α-L-fucopyranoside,4-MU-fucoside)和纯化的蛋白在特定条件下反应生成产物4-甲基微型酮(4-methylum]belliferone,4-MU)的量来检测酶活性.检测蛋白浓度用Bradford方法.结果:提纯并纯化的AFU经SDS-PAGE鉴定有一个亚单位Mr55000.经过一系列纯化步骤后,肝癌组织的AFU可得到74倍纯化,15%收率.结论:肝癌组织的AFU可通过离子交换层析法提取和纯化并可用于制备抗体.

半夏白术天麻汤方药用半仿生提取法工艺条件优选

目的:用均匀设计优选半夏白术天麻汤的半仿生提取工艺。方法:采用UL(91×33)均匀试验设计表,以天麻素、甘草次酸、HPLC总面积、总黄酮、相对分子质量≤1 000的提取物为指标综合评判,优选半夏白术天麻汤半仿生提取的工艺条件。结果:3煎用水的pH依次为2.00,6.56,8.73;3煎总计时间为4.92 h。结论:结合生产实际,确定3煎用水的pH依次为2.0,6.5,8.5;提取时间依次为2.0,1.5,1.5 h。

栀子柏皮汤半仿生提取药材组合方式的优选

目的:优选栀子柏皮汤半仿生提取药材组合方式,为栀子柏皮汤提取工艺提供依据。方法:将方中方药按"君(A),臣(B),佐(C),使(D)"进行组合排列,共5种,用半仿生提取方法进行提取;以相对分子质量≤1 000 Da提取物、栀子苷、盐酸小檗碱、甘草次酸、总生物碱为指标,将各指标测得值标准化处理,经加权求和后得到综合评判值进行比较,大者为优。结果:5个指标综合评判值排序依次为B+AC>A+B+C>C+AB>ABC>A+BC,以B+AC(关黄柏单煎,栀子、甘草合煎)最大。结论:栀子柏皮汤半仿生提取方法以关黄柏单煎,栀子、甘草合煎,最后合并提取液为最佳。

肿瘤相关抗原肽与低剂量全身照射的协同抑瘤作用

目的观察低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽(TAP)提取物的抑瘤作用及免疫学功能的影响,为低剂量辐射(LDR)与肿瘤疫苗联合治疗肿瘤提供实验依据。方法采用微酸洗脱法制备相对分子质量≤3×106的细胞膜TAP提取物,先给予小鼠75mGyX射线全身照射,12h后以TAP提取物皮下免疫小鼠,检测脾细胞CD3、CD69和TCRαβ表面标记、脾T细胞亚组百分数的变化、脾细胞ConA反应性、IL-2和IFN-γ活性、CTL杀伤活性的变化及抑瘤效应。结果小鼠经TAP提取物免疫后,移植肿瘤的发生率降低,肿瘤平均出现时间延迟,生长速度减慢;脾细胞CD3分子和CD69分子的表达显著升高,脾细胞ConA反应性、IFNγ分泌活性和CTL杀伤活性显著增强,IL-2分泌增多。而同时给予LDR的小鼠不仅上述功能不同程度增强,脾CD8+细胞百分数显著增高。结论LDR与细胞膜TAP具有协同抑瘤作用,细胞免疫力的明显增强可能为其机制之一。