葛根素微透析线性探针相对回收率影响因素的研究

目的考察影响葛根素微透析相对回收率相关影响因素,探索提高微透探针相对回收率的方法。方法采用高效液相色谱法考察不同pH值(5.1、6.0、7.4、8.1),不同浓度丙二醇(1%、5%、10%、20%、30%),不同浓度羟丙基-β-环糊精(1%、5%、10%、20%)的灌注液对葛根素微透析线性探针相对回收率的影响。结果微透析灌注液pH值5.1,羟丙基-β-环糊精含量5%时,葛根素相对回收率提高至(90.07±1.24)%。灌流液中丙二醇会对微透析线性探针的传递率产生负影响,降低相对回收率,在以葛根素为模型药物的微透析实验灌流液中不建议添加。结论本实验方法灌流液中添加增溶剂羟丙基-β-环糊精,可使葛根素经过半透膜时流失量减少,显著提高葛根素微透析线性探针相对回收率。

二甲基亚砜充当保护剂灌注兔离段肢体局部药物浓度的相对回收率

背景:二甲基亚砜冷冻保护剂的效果在低温医学应用中得到了大量验证,目前尚无利用微透析技术对二甲基亚砜进行检测的文献报道。目的:考察不同浓度断肢再植冷冻保护剂二甲基亚砜微透析的相对回收率。方法:应用增量法及减量法检测体外不同浓度(2%、5%、8%)二甲基亚砜微透析线性探针的相对回收率,并进行体内校正实验,以减量法估算二甲基亚砜在兔离断肢体的相对回收率。结果与结论:增量法检测2%、5%、8%浓度二甲基亚砜的相对回收率分别为(49.49±3.56)%,(46.30±1.48)%,(52.66±2.54)%,平均回收率为(49.48±3.18)%;减量法检测2%、5%、8%浓度二甲基亚砜的相对回收率分别为(50.99±6.89)%,(43.86±1.35)%,(50.67±0.75)%,平均回收率为(48.51±4.03)%,两种方法检测的二甲基亚砜微透析探针相对回收率基本相同。体内校正实验显示回收率随二甲基亚砜浓度的变化较小,平均回收率为(15.45±4.80)%。结果表明不同浓度二甲基亚砜的微透析探针相对回收率无明显差异。

青藤碱微透析体外回收率的测定及影响因素的研究

目的:1·考察浓度、流速对相对回收率(Relative Recovery,RR)的影响;2·考察探针之间的RR有无差异性;3·考察探针相对回收率RR与相对损失率(Relative Loss,RL)之间的关系。方法:利用高效液相色谱仪(HPLC)进行RR及RL的测定。结果:1·在相同流速下,RR与青藤碱溶液浓度无关;2·在相同浓度下RR随流速增加成指数下降;3·探针之间的RR及RL有显著性差异;在相同条件下RR与RL近似相等。结论:流速相同时,浓度不影响RR,浓度相同时,流速对RR有显著影响;不同探针的RR不同,因此对每根探针都必须测定RR;可用RL代替RR进行药物动力学研究。

粉防己碱微透析探针体外回收率影响因素研究

目的考察浓度、温度、时间对粉防己碱微透析探针相对回收率(RR)的影响。方法利用增量法、减量法进行粉防己碱微透析探针体外回收率的比较研究,采用HPLC测定粉防己碱微透析取样后的样品浓度,利用探针回收率公式计算探针的RR。结果在相同浓度下,两种方法测定RR均随流速增加而减小;减量法与增量法测定的RR相近;在相同流速下,浓度对RR的影响不大;RR在8 h内保持稳定;RR随温度的上升明显增加。结论利用减量法测定的探针回收率与增量法接近;采用2μL.min-1流速灌流,每隔15 min取样的参数设定适于粉防己碱微透析研究;RR随温度的上升明显增加,提示在粉防己碱的药代动力学/药效学等体内研究中要保持动物体温恒定,从而减少温度对回收率的影响。

高效液相色谱法测定左氧氟沙星微透析探针的回收率

目的研究左氧氟沙星微透析探针的体内外相对回收率。方法建立高效液相色谱法(HPLC)检测左氧氟沙星的浓度,采用Kromasil-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-10 mmol/L磷酸二氢钾溶液(15∶85),柱温30 ℃,紫外检测波长为294 nm,进样量10 μL。利用透析法、反透析法测定血管同心圆微透析探针的体外相对回收率,分析药物浓度、流速对相对回收率的影响。利用反透析法测定比格犬颈静脉、前列腺中探针的体内相对回收率,考察体内12 h的回收率稳定性。结果在0.1~50.0 μg/mL浓度范围内左氧氟沙星的HPLC分析方法线性关系良好(r=0.998 7),且专属性良好,高浓度质控样品、中浓度质控样品、低浓度质控样品、定量下限样品的精密度和准确度等均符合分析要求。体外实验中,血管同心圆微透析探针的正向回收率和反向回收率差异无统计学意义(P>0.05),药物浓度不影响体外回收率,但回收率随灌流液流速的增大而减小。体内实验中,颈静脉中探针的相对回收率为(48.46±1.94)%,前列腺中探针的相对回收率为(13.23±1.44)%,且相对回收率在12 h内稳定。结论建立的HPLC可用于左氧氟沙星微透析探针的测定,反透析法可用于测定左氧氟沙星微透析探针的体内相对回收率。

苹果浓缩汁中酚类物质提取方法

建立儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、香豆酸、阿魏酸、芦丁、根皮苷8种物质的高效色谱测定体系,并对不同pH处理下和不同溶剂提取出的8种小分子酚类物质的相对回收率进行比较,结果表明:在所测定的苹果浓缩汁中的8种酚类物质中,有5种在pH=2.0提取、50%甲醇溶解时有较高的相对回收率。

离子交换过程中锂同位素分馏对锂同位素测试准确度的影响

锂同位素被广泛应用于地球与行星科学各个领域,准确测定锂同位素比值是示踪各种自然过程的前提,但目前国际实验室报道的锂同位素标准物质测定值存在较大偏差,例如已报道的海水δ7Li测试值相差5‰。针对这一现状,本文基于离子交换理论基础,使用正态分布函数拟合淋出曲线,通过理论计算得到离子交换纯化过程造成的锂同位素分馏的理论值,该数值与MC-ICP-MS检测无关,但对锂同位素测试准确度有直接的影响。在此基础上,定义相对回收率(Rc)用于监测锂同位素分馏。基于本实验室分离纯化流程,通过理论计算得出,当Rc> 99. 8%时,可认为离子交换纯化过程中没有引起可观察到的锂同位素分馏,进而不影响MC-ICP-MS检测准确度。目前世界上各实验室主要通过绝对回收率或Rc来判断分离过程中是否发生同位素分馏。由于测试的空间电荷效应,绝对回收率易被高估,而> 99%的Rc并未全部达到理论计算得到的Rc,表明各实验室对同种标准物质测试结果的偏差极可能是由于离子交换纯化过程中锂同位素分馏导致的。本文提出,对于每一样品,只需要分别测量离子交换过程中接收区间及其前后一定区间溶液中锂含量,将得到的Rc值与其理论值比较,即可判断分离纯化过程中是否引起可观察到的锂同位素分馏。

液液萃取-GC-MS法测定水中硝基苯质量控制指标研究

采用液液萃取–气相色谱–质谱法测定水中硝基苯,通过统计全国多家实验室的测定数据,对平行样测定结果相对偏差、空白加标回收率、样品加标回收率、空白加标回收率相对偏差及样品加标回收率相对偏差5个质控指标进行分析,得出质控指标评价标准。在概率P,γ均为0.90时,平行样测定结果允许最大相对偏差应控制在11.0%;当空白加标浓度为0.2～30μg/L时,回收率控制范围为59%～113%;当样品未检出、加标浓度在0.25～50μg/L时,样品加标回收率控制范围为56%～110%;空白加标、样品加标回收率最大相对偏差应分别控制在10.0%和11.1%。在概率P和γ均为0.95时,平行样测定结果允许最大相对偏差应控制在13.5%;当空白加标浓度为0.2～30μg/L时,回收率的控制范围为50%～122%;当样品未检出、加标浓度在0.25～50μg/L时,样品加标回收率控制范围为49%～117%;空白加标、样品加标回收率最大相对偏差应分别控制在12.6%和14.6%。

固相萃取-高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素质量控制指标研究

采用固相萃取-液相色谱法,通过统计全国多家实验室的测定数据,对水中微囊藻毒素测试的平行样测定相对偏差、空白加标回收率、实际样品加标回收率、空白加标回收率平行样相对偏差以及样品加标回收率平行样相对偏差5个质控指标进行了研究,并给出了质控指标评价标准,提出在概率P和γ均为0.90时,其平行样测定允许最大相对偏差应控制在7.3%;空白加标质量浓度为0.005～20μg/L时,回收率的控制范围为61%～125%;样品测定浓度为未检出、加标质量浓度在0.2～3.6μg/L时,实际样品加标回收率控制范围为66%～108%;空白加标、样品加标回收率平行样最大相对偏差应分别控制在3.9%和8.9%。在概率P和γ均为0.95时,其平行样测定允许最大相对偏差应控制在8.3%;空白加标质量浓度为0.005～20μg/L时,回收率的控制范围为49%～137%;样品测定浓度为未检出、加标质量浓度在0.2～3.6μg/L时,实际样品加标回收率控制范围为60%～114%;空白加标、样品加标回收率平行样最大相对偏差应分别控制在5.2%和14.8%。

对原生质体纯化技术的评估

苏格兰作物研究所及Polytechnic的S.Millam等比较了纯化芸苔原生质体的3种技术的效果:(1)在13％甘露醇中低速(150g)离心沉淀;(2)用蔗糖溶液浮集;(3)在覆以等体积Percoll的甘露醇中的低速离心沉淀。 Millam等未发现3种方法中总原生质俸回收率有显著差异。方法(1)、(3)的同收率为35.6～37.6％,而方法(2)的回收率为26.6％。但是,液泡化与叶绿体型原生质体亚类间的相对回收率有显著差异。方法(3)

Optimization of Sample Pretreatment for Determination of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Estuarine Sediments by Gas Chromatography

This study examined levels of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in estuarine sediments in Licun (Qingdao, China) by gas chromatography under optimized conditions for sample pretreatment via ultrasonic extraction, column chromatography, and thin layer chromatography. Methanol and dichloromethane (DCM)/methanol (2:1, v/v) were used in ultrasonic extraction, and DCM was used as eluate for column chromatography. The developing system consisted of n-hexane and DCM at a ratio of 9:1 (v/v), with DCM as the extraction solvent for PAHs-containing silica gel scraped off the plate. When the spiking level is 100 ng, total recoveries of spiked matrices for four target PAHs (phenanthrene, anthracene, pyrene and chrysene) were 83.7%, 76.4%, 85.8%, and 88.7%, respectively, with relative standard deviation (RSD) between 5.0% and 6.5% (n = 4). When the spiking level is 1000 ng, associated total recoveries were 78.6%, 72.7%, 82.7% and 85.3%, respectively, with RSD between 4.4% and 5.3% (n = 4). The opti-mized method was advantageous for determination of PAHs in complex matrix due to its effective sample purification.