六君子汤相态拆分及表征研究

目的对六君子汤进行了真溶液相态、纳米相态和沉淀相态拆分,对样品透析-离心次数、稀释倍数以及样品放置时间进行了考察,并对其中纳米相态进行了表征研究。方法为研究六君子汤中分散体系的组成,本试验利用丁达尔现象初步判断六君子汤中是否存在纳米相态,采用透析与超速离心相结合的方法,并采用透射电子显微镜(TEM)、粒径分析等方法。结果六君子汤中存在纳米相态,在透析-离心4次,样品稀释5倍,室温放置0 h下,观察的透射电子显微镜图像最清晰。此外,对最优方案的六君子汤中的纳米相态进行了粒径以及电位测定,试验结果表明,六君子汤纳米相态的粒径主要集中在100 nm,此外,还存在少量粒径大于100 nm的粒子,电位为-2.22~-1.97 mV。结论结果表明六君子汤中存在纳米相态,从六君子汤配伍增效角度来看,难溶性成分(人参中的人参皂苷、茯苓中的茯苓酸、陈皮中的黄酮)的溶出度增大,此外发现还存在少量粒径大于100 nm的粒子,说明体系不稳定,这可能是由于体系中出现不同程度的团聚造成的。

芍药甘草汤相态拆分及镇痛抗炎活性评价

目的对芍药甘草汤进行相态拆分,并对其进行成分分布及镇痛抗炎药效学评价。方法采用离心及膜抽滤的方法进行芍药甘草汤不同相态的拆分;通过粒径分析和形态观察对拆分后的纳米相态进行确认;HPLC法测定芍药甘草汤5个指标性成分在不同相态中的分布;以醋酸致小鼠扭体和二甲苯致小鼠耳肿胀为研究模型,观察芍药甘草汤不同相态以及活性成分含量与镇痛抗炎效果的相关性。结果芍药甘草汤纳米相态的粒径约为250 nm,呈球形;芍药苷、芍药内酯苷在真溶液相态的分布>纳米相态>沉淀相态,而甘草酸、甘草苷、芹糖甘草苷在纳米相态的分布>真溶液相态>沉淀相态;芍药甘草汤纳米相态的抗二甲苯致小鼠耳肿胀和抑制醋酸致小鼠扭体的作用显著优于沉淀相态和真溶液相态(P<0.05),与全方的药效相当(P>0.05)。结论芍药甘草汤不同相态的活性成分存在空间分布差异,其镇痛抗炎作用与芍药甘草汤活性成分含量及其物理结构形式密切相关。芍药甘草汤纳米相态的镇痛抗炎效果显著优于其他相态,是其发挥镇痛抗炎作用的关键。

微乳对泽泻汤提取液不同相态中指标成分含量的影响

目的:基于高效液相色谱法(HPLC)及相态拆分工艺探讨微乳对泽泻汤提取液不同相态中指标成分分布的影响。方法:采用粒径仪和透射电镜对空白微乳、泽泻汤水提液和泽泻汤微乳提取液中胶体粒子进行表征;采用高速离心法及透析法建立相态拆分工艺,并依据该工艺,将泽泻汤水提液和泽泻汤微乳提取液分别拆分为真溶液相态,胶体相态和沉淀相态;采用HPLC测定不同相态中白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、23-乙酰泽泻醇C、泽泻醇A、泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B共6种指标成分的含量,流动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~5 min,40%~43%B;5~20 min,43%~45%B;20~45 min,45%~60%B;45~75 min,60%~80%B);采用饱和溶解度方法测定泽泻汤指标成分在水和微乳溶剂中的溶解度。结果:泽泻汤水提液、微乳提取液和空白微乳中的胶体粒子形态均呈圆球形,胶体粒子的粒径、多分散指数(PDI)和Zeta电位大小排序均为水提液>微乳提取液>空白微乳。相态拆分结果显示,透析2.5 h即可将胶体相态和真溶液相态拆分完全,经检验该工艺稳定可行。与泽泻汤水提液比较,以微乳作为提取溶剂可以提高白术内酯Ⅲ、23-乙酰泽泻醇C、白术内酯Ⅱ、泽泻醇A、泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B在胶体相态内的含量约3.75、6.82、35.47、10.66、35.41、27.75倍,并可提高后5种成分的提取效率2.03、1.15、1.70、6.43、5.53倍。溶解度试验显示,微乳能提高白术内酯Ⅱ、泽泻醇A、泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B的溶解度,但对白术内酯Ⅲ和23-乙酰泽泻醇C的溶解度影响较小。结论:微乳可不同程度提高泽泻汤指标成分的提取效率并增加指标成分在胶体相态中的分布,为微乳作为中药提取溶剂的可行性提供参考。

基于“汤剂相态-纳米组装”的气血双补方抗慢性心衰炮制增效机理研究

目的:从“汤剂相态-纳米组装”角度阐释气血双补方抗慢性心衰炮制增效机理。方法:通过离心和透析相结合的方法,将气血双补方炮制前后的煎煮液进行汤剂相态分离;采用激光笔、纳米粒径仪和透射电镜对汤剂分离的不同相态进行表征。结果:气血双补方炮制前后的煎煮全溶液被分离成真溶液、纳米胶体溶液及混悬溶液3个相态。与生品组相比较,炮制品组丁达尔效应更强,分离得到的纳米胶体溶液粒径分布更均匀,多分散指数更小,表面电位更大,电导率越低,体系更稳定。同时透射电镜观察到纳米球形聚集体,进一步推测中药炮制可能通过改变汤剂体系,促进有效成分发生纳米组装,并在体内产生一定的“归经作用”,对病灶部位实现靶向递送,发挥抗慢性心衰增效作用。结论:该研究首次从“汤剂相态-纳米组装”角度剖析气血双补方抗慢性心衰炮制增效机理,为中药炮制机理的创新研究提供新策略。