真核细胞翻译起始因子4E2生物学功能及其在肿瘤中作用

真核细胞翻译起始因子4E2(eIF4E2)是真核细胞翻译起始因子(eIF4E)的同源物,是真核细胞特别是肿瘤细胞缺氧状态下,蛋白翻译的关键因子。eIF4E2对缺氧条件下,肿瘤细胞非典型的帽式翻译的调控,肿瘤细胞应对生存压力和微环境改变均具有重要的作用,eIF4E2在多种肿瘤细胞中异常表达,特别在肿瘤晚期的作用使eIF4E2成为研究热点。该文介绍了eIF4E2的结构、生理功能及缺氧期对肿瘤细胞蛋白翻译的调控,浅析了eIF4E2在肿瘤细胞进展中的潜在作用,为评估肿瘤转归,探寻肿瘤细胞与肿瘤微环境间的相互作用,发掘潜在的临床肿瘤治疗靶点提供理论依据。

真核细胞翻译起始因子4E在肾癌细胞中的表达及意义

目的:探讨真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiation factor 4E,eIF4E)在人肾癌细胞中的表达及意义。方法:采用Western blot法检测不同人肾癌细胞系中eIF4E和phospho-eIF4E蛋白的表达水平。siRNA转染肾癌细胞敲除eIF4E,检测肾癌细胞生长。Western blot法检测雷帕霉素处理过的肾癌细胞中phospho-e4E和Akt的表达。结果:在肾癌细胞系中786-0、769-P和OS-RC-2中,eIF4E和phospho-eIF4E基因及蛋白表达明显高于人肾细胞系组(P<0.05)。敲除肾癌细胞eIF4E基因可抑制肾癌细胞的生长。雷帕霉素处理过的肾癌细胞phospho-eIF4E和Akt的表达明显升高。结论:eIF4E和phospho-eIF4E在肾癌细胞中高表达,可促进肾癌细胞生长,与肾癌的进展密切相关。

长链非编码RNA LINC00641通过微小RNA-181d-5p靶向真核细胞翻译起始因子4A2抑制宫颈癌细胞增殖的研究

目的观察长链非编码RNA(LncRNA)LINC00641(LINC00641)在宫颈癌细胞中的表达特征,探讨LINC00641通过微小RNA-181 d-5p(miR-181 d-5p)/真核细胞翻译起始因子4A2(EIF4A2)对宫颈癌细胞增殖的调节作用。方法选择宫颈癌Hela细胞株,建立空白对照组,构建转染pc-DNA3.1的无关序列组､转染pc-DNA3.1-LINC00641的pc-DNA-LINC00641组､转染pc-DNA3.1-LINC00641-siRNA的si-LINC00641组,转染miR-181 d-5p inhibitor的miR-181 d-5p inhibitor组､转染miR-181 d-5p mimic的miR-181 d-5p mimic组､转染siRNA-EIF4A2的si-EIF4A2组。采用CCK-8实验检测细胞增殖活性,采用双荧光素酶报告基因实验观察LINC00641和miR-181 d-5p､miR-181 d-5p､EIF4A2的靶向关系。选取2019年12月至2021年1月陕西中医药大学第二附属医院诊治的45例宫颈鳞癌且未行术前新辅助放､化疗的女性患者作为研究对象,留取其术后肿瘤组织(宫颈鳞癌组织)。另选取45例因子宫肌瘤行子宫全切术,且经病理确诊为慢性宫颈炎的患者,留取其宫颈组织(慢性宫颈炎组织)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测LINC00641和miR-181 d-5p的表达,采用免疫组化SP法检测EIF4A2和Ki67的表达,采用Pearson检验分析其相关性。结果生物信息分析显示,LINC00641与miR-181 d-5p､miR-181 d-5p､EIF4A2具有可能的结合位点。与空白对照组和无关序列组比较,pc-DNA-LINC00641组､miR-181 d-5p mimic组､si-EIF4A2组细胞增殖活性下降,si-LINC00641组､miR-181 d-5p inhibitor组细胞增殖活性升高。双荧光素酶报告基因实验显示,LINC00641与miR-181 d-5p､miR-181 d-5p､EIF4A2具有靶向关系。挽救实验显示,沉默EIF4A2可部分逆转沉默LINC00641和沉默miR-181 d-5p对细胞增殖的促进作用。与慢性宫颈炎组织比较,宫颈鳞癌组织中LINC00641､miR-181 d-5p低表达,EIF4A2高表达(P<0.05)。Pearson相关分析显示,LINC00641与miR-181 d-5p､EIF4A2､Ki67呈正相关性,miR-181 d-5p与EIF4A2呈负相关性。结论LINC00641通过miR-181 d-5p/EIF4A2抑制宫颈癌细胞的增殖,调控肿瘤的形成和进展。

糖尿病肾病患者血清真核细胞翻译启始子2α、活化转录因子4水平与肾组织损伤、肾功能的相关性分析

目的 探讨糖尿病肾病(DN)患者血清真核细胞翻译启始子2α(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)水平与肾组织损伤程度和肾功能的相关性。方法 选择102例DN患者(DN组)和102例单纯糖尿病患者(对照组)为研究对象,根据肾组织损伤严重程度将DN患者分为微量白蛋白尿期组(MG组,35例)、显性蛋白尿期组(PG组,41例)和肾功能不全期组(RIG组,26例)。检测血清eIF2α、ATF4、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、胱抑素C(CysC)、估算的肾小球滤过率(eGFR)水平。采用Pearson相关性分析探讨eIF2α、ATF4与BUN、Scr、CysC、eGFR的相关性,采用多因素Logistic回归分析探讨DN发病的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析eIF2α和ATF4诊断DN的价值。结果 DN组血清eIF2α、ATF4、BUN、Scr、CysC水平高于对照组,eGFR低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。RIG组血清eIF2α和ATF4水平高于PG组和MG组,差异有统计学意义(P<0.05)。DN患者血清eIF2α、ATF4水平与BUN、Scr、CysC呈正相关,与eGFR呈负相关(P<0.05)。较长糖尿病病程、较高体质量指数、高水平eIF2α、高水平ATF4是DN的危险因素(P<0.05)。eIF2α、ATF4诊断DN的曲线下面积分别为0.770、0.799,联合诊断曲线下面积为0.879,大于单独诊断(P<0.05)。结论 DN患者血清eIF2α、ATF4水平增高,且与DN肾损伤程度加重以及肾功能减退有关,eIF2α联合ATF4在DN诊断中有较高价值。

宫颈癌组织中真核细胞翻译起始因子4E和血管内皮生长因子的表达及意义

目的探讨宫颈癌组织中真核细胞翻译起始因子4E(e IF4E)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义。方法随机选取50例宫颈癌患者作为研究对象(观察组),并随机采集20例患者的癌旁正常组织作为对照组。分别测定e IF4E和VEGF在50例宫颈癌和20例癌旁正常组织标本中的表达,分析其与有关参数的相关性。结果癌旁正常组织中e IF4E和VEGF阳性率均为15.00%,显著低于宫颈癌组织中e IF4E(50.00%)和VEGF(60.00%)的阳性率,e IF4E和VEGF的表达均与宫颈癌组织的分化程度、浸润程度、淋巴转移和静脉转移密切相关(P<0.05),而与年龄、肿瘤大小关系不大(P>0.05)。结论 e IF4E和VEGF参与宫颈癌组织细胞的分化、浸润和转移,促进肿瘤恶化和癌症发展。

真核细胞翻译起始因子4E相关通路小分子抑制剂的研究进展

真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)在蛋白翻译起始过程中发挥重要作用,与肿瘤细胞的生长、增殖和分化等密切相关。随着对eIF4E功能及相关信号通路研究的不断深入,以eIF4E及相关信号通路为靶点的药物在肿瘤治疗中的作用日益引起重视。目前已有部分相关抗肿瘤药物上市或进入临床试验。本文综述了作用于eIF4E及相关通路的小分子抑制剂的研究进展。

真核细胞翻译起始因子4E与头颈鳞癌关系的研究进展

真核细胞翻译起始因子4E在细胞质和细胞核中均起着重要作用,它在头颈鳞癌中表现为强特异性过度表达,并与头颈鳞癌的发生发展及预后密切相关,可作为检测头颈鳞癌的可靠指标,判断其恶性度及预测复发有高敏感性,并可作为基因治疗的新靶点。

真核细胞翻译起始因子4E在皮肤基底细胞癌中的表达

目的:检测皮肤基底细胞癌中真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)的表达。方法:采用免疫组化PV-9000法和Real-time PCR法分别检测20例皮肤基底细胞癌及20名健康皮肤组织中eIF4E蛋白及mRNA的表达。结果:基底细胞癌和健康皮肤组织中eIF4E蛋白MOD值分别为(0.198±0.031)和(0.096±0.015),mRNA相对表达量分别为(2.32±1.00)和(1.24±0.17),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:eIF4E可能参与皮肤肿瘤的发病过程。

雷公藤红素诱导未折叠蛋白反应信号通路中真核细胞翻译起始因子2α活化抑制多发性骨髓瘤细胞生长

目的研究雷公藤红素抑制多发性骨髓瘤细胞增殖与未折叠蛋白反应(UPR)的关系和分子机制,为多发性骨髓瘤的治疗提供新的药物靶点。方法 4种多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226、U266、SKO、KMS-11,经不同浓度雷公藤红素(增殖实验0.0~10.0μmol/L、凋亡实验0.0~4.0μmol/L、周期阻滞实验0.0~1.5μmol/L)处理不同时间(增殖实验1~3 d、凋亡实验1 d、周期阻滞实验1 d)后,检测细胞增殖、凋亡、周期阻滞情况;用蛋白质印迹法检测肌醇需求酶1(IRE1)、蛋白激酶样内质网激酶(PERK)和活化转录因子6(ATF6)3条UPR信号通路中主要分子的表达,包括葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、ATF6、PERK、真核细胞翻译起始因子2α(eIF2α)、磷酸化eIF2α(p-eIF2α)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、IRE1、磷酸化IRE1(p-IRE1)。用慢病毒包被的含短发夹RNA(shRNA)载体对eIF2α表达进行干扰,观察雷公藤红素对干扰eIF2α表达后的RPMI 8226细胞UPR信号分子表达、凋亡和细胞周期的影响。结果雷公藤红素以剂量和时间依赖方式抑制4种多发性骨髓瘤细胞增殖、诱导凋亡、使细胞周期阻滞在G0/G1期,其中RPMI8226细胞对雷公藤红素最敏感。在RPMI8226细胞,雷公藤红素处理浓度在0.5~2.0μmol/L作用30 min^24 h时均能使UPR的PERK通路中p-eIF2α表达水平升高(P<0.05或P<0.01),其下游CHOP表达也相应增加(P<0.05或P<0.01),而对其他2条通路ATF6和IRE1影响不明显。用慢病毒干扰eIF2α表达后,雷公藤红素上调CHOP表达、诱导凋亡和周期阻滞的作用均减弱或消失。结论雷公藤红素能抑制多种多发性骨髓瘤细胞增殖,活化UPR的PERK信号通路中eIF2α分子可能是其作用机制之一。

真核细胞起始因子4E与C-myc在甲状腺乳头状癌中的表达

目的观察真核细胞起始因子4E(eukaryotic initiation factor4E,eIF4E)及C-myc在甲状腺乳头状癌中的表达,并探讨两者间的相关性及它们与甲状腺乳头状癌的侵袭、转移等临床病理特征间的关系。方法采用免疫组化EnVin-sion法检测66例甲状腺乳头状癌、20例结节性甲状腺肿伴乳头状增生及上述病例的病变周围正常甲状腺组织中eIF4E和C-myc的表达情况。结果在正常甲状腺、结节性甲状腺肿伴乳头状增生及甲状腺乳头状癌中,eIF4E的阳性率分别为11.6%(10/86)、50.0%(10/20)和84.8%(56/66)(P<0.01),C-myc的阳性率分别为21.0%(18/86)、50%(10/20)和78.8%(52/66)(P<0.01)。eIF4E仅与乳头状癌的腺外侵袭和淋巴结转移有关(均P<0.05),C-myc仅与乳头状癌的淋巴结转移有关(P<0.01)。eIF4E及C-myc在乳头状癌中的表达呈正相关(rs=0.327,P<0.05)。结论与癌旁正常组织和良性病变相比,eIF4E和C-myc在甲状腺乳头状癌中存在过表达。eIF4E的过表达与甲状腺乳头状癌的腺外侵袭和淋巴结转移有关,C-myc的过表达与甲状腺乳头状癌的淋巴结转移有关,提示二者在甲状腺乳头状癌的进展中可能发挥重要的作用。

真核细胞起始因子4E和p53在舌癌中的表达及其意义——附84例检测报告

目的:探讨真核细胞起始因子4E(eIF4E)和p53在舌癌中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学染色法分别检测84份舌鳞癌组织(舌癌组)、26份以舌白斑为代表的癌前病变组织(癌前病变组)、20份正常舌黏膜组织(正常对照组)的eIF4E、p53表达情况,并对eIF4E、p53表达变化趋势进行一致性分析及比较。结果:eIF4E在舌癌组、癌前病变组及正常对照组中的阳性表达率分别为92%、73%、0,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。p53在舌癌组、癌前病变组及正常对照组中的阳性表达率分别为69%、23%、0,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。eIF4E与p53表达变化趋势一致(r=0.491,P<0.05)。eIF4E在舌癌组和癌前病变组中的阳性表达率均高于p53(P<0.01)。结论:舌癌组织和癌前病变组织的eIF4E和p53阳性表达率较高,两者可能与舌癌的发生有关,可能适用于舌鳞癌检测。

特异性脱氧核酶对喉癌真核细胞起始因子4E基因mRNA的体外切割作用

目的研究特异性脱氧核酶(10-23DNAzyme)对喉癌真核细胞起始因子4E(eukaryotici nitiation factor-4E,eIF4E)基因mRNA的体外切割作用。方法设计合成针对原癌基因eIF4EmRNA编码区的1102、1289、1226位点的3个10-23DNAzyme-eIF4E,用内切酶XhoI将含有eIF4E基因mRNA的pGEM-7zf+eIF4E质粒消化成线性。以此为模板体外转录出用[α-32P]UTP标记的靶eIF4E基因编码区mRNA。在37℃,pH7.5,Mg2+离子50mmol/L条件下,分别与3个10-23DNAzyme-eIF4E(1μmol/L)混合进行切割反应,并比较不同Mg2+离子浓度下酶对靶mRNA的切割活性。反应产物在8%变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离并行放射自显影,应用凝胶成像分析仪评价酶的切割效率。结果在设定条件下,3个10-23DNAzyme-eIF4E对eIF4E基因mRNA均有切割活性,且随着Mg2+浓度越高,酶的切割活性增强。结论3个10-23DNAzyme-eIF4E能有效切割eIF4E基因编码区mRNA,且切割效率与Mg2+浓度有关。

真核细胞翻译起始因子eIF4E与头颈部鳞状细胞癌

真核细胞翻译起始因子 e IF4 E对 m RNAs的翻译起重要作用 ,其过度表达可影响细胞的生长和分化 。

真核细胞起始因子4E与胃癌中医证型关系的研究

目的通过检测真核细胞起始因子4E(eIF4E)在胃癌中的表达,探讨其表达与胃癌临床病理及中医证型的关系。方法术前确定胃癌患者的中医证型,术后胃癌组织标本石蜡块常规保存,采用免疫组化Envision法检测eIF4E的表达,分析其表达与胃癌临床病理特征及中医证型的关系。结果1)胃癌组织eIF4E蛋白阳性表达率为85.3%(29/34),显著高于癌旁组织58.8%(20/34)(P<0.05)。2)eIF4E的表达与肿瘤发生部位、肿瘤大小、癌组织浸润深度、组织分化程度及Lauren分型均无明显关系(P>0.05),而与胃癌患者的淋巴结转移状态及病理分期呈正相关(P<0.05)。3)eIF4E蛋白在胃癌不同中医证型中存在着差异表达,痰瘀毒结>肝胃不和>脾胃虚寒,其中痰瘀毒结与脾胃虚寒两组间表达差异有统计意义(P<0.05)。结论eIF4E可作为胃癌进展和预后较差的指标;eIF4E的表达差异可能为胃癌不同中医证型的物质基础。

真核细胞起始因子4E在喉鳞癌中的表达

目的通过检测真核细胞起始因子4E(eIF4E)在喉鳞癌中的表达,探讨其与喉鳞癌的关系。方法采用免疫组织化学法检测52例喉鳞癌组织、20例喉黏膜不典型增生组织、30例喉良性增生组织及10例正常喉黏膜组织中eIF4E基因蛋白的表达情况;用Western-blot法检测20例新鲜喉鳞癌标本的癌中心区(TC)、过渡区(TR)及病理证实的无癌区(TF)中eIF4E的表达情况。结果eIF4E在喉鳞癌中表达的阳性率为100%,显著高于对照组。eIF4E在喉鳞癌的无癌区、过渡区及中心区的表达水平呈进行性增高。结论过度表达的eIF4E是喉鳞癌恶性改变及判断其恶性程度的一个分子标志。

真核翻译起始因子4E对宫颈癌细胞增殖迁移的作用研究

目的:探讨eIF4E对宫颈癌细胞增殖迁移的调控作用。方法:eIF4E表达质粒转染C33a细胞。Real-time PCR检测eIF4E mRNA表达,CCK-8法、Transwell实验分别检测细胞增殖以及迁移。结果:eIF4E质粒转染C33a细胞后,eIF4E的mRNA表达水平升高约52%(P<0.01),细胞增殖中与NC组相比,eIF4E组细胞增殖在24h、48h、72h分别增加了20.2%、67.7%、54.3%(P<0.05)。而细胞侵袭数目在24h、48h、72h分别增加了23.7%、35.7%、42.7%(P<0.05)。结论:eIF4E能够促进宫颈癌C33a的增殖侵袭能力,是宫颈癌防治的潜在靶点。

真核翻译起始因子4γ2调控N-乙酰氨基半乳糖转移酶1 mRNA对胃癌细胞恶性表型的影响

目的探讨真核翻译起始因子4γ2(EIF4G2)通过调控N-乙酰氨基半乳糖转移酶1(GALNT1)mRNA对胃癌进展的影响。方法通过生物信息数据库分析GALNT1、EIF4G2在胃癌细胞和胃癌组织中的表达及与胃癌患者预后的关系,并分析胃癌组织中EIF4G2、GALNT1表达的相关性。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测GALNT1 mRNA、EIF4G2 mRNA在人胃黏膜上皮细胞GES-1和人胃癌细胞(AGS细胞等)中的表达水平,并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测GALNT1、EIF4G2蛋白表达水平。建立干扰GALNT1和过表达EIF4G2的AGS细胞株,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力,采用TUNEL实验检测细胞凋亡能力,采用划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力,采用Western blot检测凋亡和转移相关蛋白表达水平,采用RIP实验和RNA下拉实验检测GALNT1 mRNA与EIF4G2的结合关系。结果胃癌组织和胃癌细胞中的GALNT1、EIF4G2水平分别高于正常组织和人胃黏膜上皮细胞,差异有统计学意义(P<0.001),且与胃癌患者预后差相关;胃癌组织中,EIF4G2表达与GALNT1表达呈正相关。敲低GALNT1后,AGS细胞活力降低,克隆形成数、迁移和侵袭细胞数减少,凋亡细胞数增加,Bcl-2、MMP2、MMP9蛋白表达降低,Bax、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达增加,差异有统计学意义(P<0.001)。EIF4G2可与GALNT1 mRNA结合,促进GALNT1 mRNA、GALNT1蛋白表达及GALNT1 mRNA稳定性,差异有统计学意义(P<0.001)。共转染sh-GALNT1-1与oe-EIF4G2可逆转sh-GALNT1-1对AGS细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。结论EIF4G2可通过稳定GALNT1 mRNA促进胃癌细胞增殖、迁移、侵袭并抑制细胞凋亡,其或可成为胃癌临床诊疗的新靶点。

脾相关酪氨酸激酶、蛋白激酶B、真核翻译起始因子4E、细胞周期蛋白依赖性激酶4在胃癌及癌前病变中的表达及相关性

目的探讨脾相关酪氨酸激酶(SYK)、蛋白激酶B(AKT)、真核翻译起始因子4E(EIF4E)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)在胃癌及癌前病变中的表达及相关性。方法收集90例患者的胃黏膜组织进行蛋白质印迹实验,其中癌旁正常组织30例,萎缩性胃炎组织30例,胃癌组织30例。另收集胃癌组织、萎缩性胃炎组织、癌旁正常组织存档蜡块各30例进行免疫组化实验。分别采用蛋白质印迹法和免疫组化法检测各组织中SYK、AKT、EIF4E、CDK4表达情况。分析萎缩性胃炎组织与胃癌组织中SYK、AKT、EIF4E、CDK4的相关性。结果癌旁正常组织中SYK蛋白表达水平及阳性表达率均高于萎缩性胃炎组织,萎缩性胃炎组织中SYK蛋白表达水平及阳性表达率均高于胃癌组织;癌旁正常组织中AKT、EIF4E、CDK4蛋白表达水平及阳性表达率均低于萎缩性胃炎组织,萎缩性胃炎组织中AKT、EIF4E、CDK4蛋白表达水平及阳性表达率均低于胃癌组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,胃癌组织和萎缩性胃炎组织中SYK与AKT、EIF4E、CDK4表达均呈负相关(P<0.05),AKT、EIF4E、CDK4三者表达均呈正相关(P<0.01)。结论SYK、AKT、EIF4E、CDK4可能通过相互作用共同参与了胃癌的发生,其可能的机制与磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/AKT信号通路有关。SYK、AKT、EIF4E、CDK4有希望成为胃癌诊断和防治的靶标,检测SYK、AKT、EIF4E、CDK4对胃癌诊断、早期治疗及预防具有重要价值。

大肠癌组织中真核细胞起始因子4E的表达及其意义

目的探讨真核细胞起始因子4E(eIF4E)在大肠癌组织中的表达,eIF4E与大肠癌发生、发展、临床病理特征及预后间的关系。方法采用免疫组化法检测60例大肠癌组织中eIF4E的表达情况,以癌旁正常组织和大肠腺瘤各20例作对照。结果大肠癌组织、癌旁正常组织和大肠腺瘤组织中eIF4E阳性表达率分别为91.7%、10%和90%,eIF4E阳性表达在不同性别、年龄、腺瘤史及肿瘤家族史患者间未见统计学意义,不同肿瘤部位、大小及分化程度、临床分期及有无淋巴结转移的eIF4E阳性表达差异也未见统计学意义(P>0.05),但肿瘤浸润深度不同eIF4E阳性表达不同(P<0.05)。结论大肠癌组织中存在着eIF4E蛋白高表达现象,eIF4E阳性表达与患者性别、年龄、腺瘤史、肿瘤家族史、病变部位、肿瘤大小、病理分化程度、临床分期及淋巴结转移无关,与浸润深度有关(P<0.05)。