小白菜植株原位真空渗入遗传转化适宜苗态建成方法的研究

低温处理小白菜 ( Brassica Campestrisssp.Chinensis var.communis Tsen et Lee)种子和春秋 6个播期实验 ,研究了小白菜春化和植株原位真空渗入遗传转化适宜苗态的建成方法。结果表明 ,小白菜种子经5 0℃温烫 1 0 min,2 3℃浸种 4 h,催芽 1 2 h后 ,在 0～ 4℃低温下 ,上海青处理 1 7d,黄心乌处理 2 5 d,四月慢处理 2 9d,7～ 9℃黄心乌处理 2 5 d,播种于大田 ,在长日照下均可完成春化 ,形成适宜植株原位真空渗入遗传转化的苗态。上海青、黄心乌和四月慢 9月 7日露地播种均可完成春化 ,形成适宜植株原位真空渗入遗传转化的最佳苗态 ,上海青和黄心乌 2月 1 7日播种也可完成春化 ,形成适宜植株原位真空渗入遗传转化的苗态。

蛋白酶抑制剂基因真空渗入法转化不结球白菜获得抗虫性材料

菜青虫及小菜蛾是危害白菜生产的主要害虫,为了获得新的抗虫白菜种质,以生长45天、花苔抽出时的“49菜心”Brassicarapassp.chinensisvar.utilisTsenetLee为材料,通过根癌农杆菌介导的真空渗入法,将马铃薯蛋白酶抑制剂基因(pinII)导入该植物基因组中。在142株处理株的后代种子中,采用除草剂Basta筛选,获得41株生长良好的抗性植株。经氯酚红试验、PCR以及植物基因组Southern杂交鉴定,证实目的基因已经整合入植物基因组中。对小菜蛾PlutellaxylostellaL.进行了转基因材料离体叶片的连续饲喂,调查了自1龄幼虫至化蛹、羽化的动态变化。结果表明,受试的转基因植株对小菜蛾的生长发育有明显的抑制作用。