茶树菇Agrocybe aegerita新泛素偶联酶蛋白表达及抗肿瘤活性研究

大型真菌茶树菇活性蛋白组分Yt在动物模型中被发现具有抗肿瘤及免疫调节活性。为研究其蛋白组分,构建新鲜蘑菇子实体c DNA文库,对c DNA序列进行测序筛选,获得新型真菌泛素偶联酶(Ub-conjugating enzyme,UBC)的c DNA序列(Gen Bank登录代码:JQ362395),分析其含有UBC家族的保守残基。使用原核表达p ET系统表达和纯化重组UBC蛋白,得率是10 mg/L大肠杆菌培养液。在细胞培养中加入重组UBC蛋白将显著改变细胞形态,通过流式细胞仪发现UBC(1.8、3.6、7.2μM)均能诱导He La细胞凋亡,AnnexinⅤ+/PI-百分比由对照组的1.4%上调至10.7%、15.8%和20.3%,呈浓度依赖性。本文是首次报道真菌UBC具有抗肿瘤活性。该结果暗示,真菌泛素系统成员可能通过改变细胞基本生理功能,成为潜在的候选药物,值得探讨。