ITS鉴定真菌病原:一例司法鉴定研究实例

本研究选择一例疑似空气污染物伤害松树的司法鉴定案作为研究实例,在现场勘察和初步形态鉴定的基础上,应用ITS序列分析鉴定了对疑似空气污染物伤害松树的病原做了分子鉴定。我们对委托鉴定的疑似空气污染物伤害松树的地及周边地区进行了勘查,现场勘查结果并不支持空气污染物伤害松树的看法。为明确松树枯死的原因,对取样病枝上的疑似病原物进行了显微镜观察和培养性状观察,根据显微镜下孢子的形态和病原菌的培养性状,初步判断导致马尾松枯死的病原可能为拟盘多毛孢属(Pestalotipsis)真菌。为进一步确定病原种类,我们应用分子生物学技术对危害马尾松的病原物进行了ITS分子鉴定。测定了疑似真菌的ITS序列,并进行了比对和系统发育分析。研究结果表明,导致松树枯死的病原菌系韦司梅拟盘多毛孢(Pestalotipsis vismiae)。在本研究案例中,利用真菌ITS序列的系统发育分析,快速、准确地鉴定了真正导致松树枯死的病原,为今后类似司法鉴定案件审理提供了证据鉴定的新手段。

酸碱微环境对三种黄瓜主要真菌病原菌的影响

以引起黄瓜灰霉病(Botrytis cinerea)、黑星病(Cladosporium cucumerium)、霜霉病(Pseudoperonospora cubensis)的3种真菌病害病原菌为代表,通过对病菌栖息微环境酸碱度的调节,达到控制病害的目的。研究看出,黄瓜的3种主要病害病原菌在p H=3.4～10 .4间孢子萌发和致病力表现基本一致:偏酸性环境(p H=4 .2～6 .2 )促进孢子萌发率和致病力增强而偏碱性环境(p H=7.5～10 .4 )则对其明显抑制;降低叶面微环境的酸度,大大减轻了病害的发生、扩展。

河南省小麦叶枯病真菌病原研究

1987～1990年在河南省洛宁等13个县、市调查40余个品种(系)小麦的病害情况表明,除锈病和白粉病引起小麦叶片枯黄外,尚有12种由真菌病原引起的叶枯病.其中黄斑叶枯病、雪腐叶枯病、根腐叶枯病和针孢叶枯病等为害较重,平均发病率在40%以上;交孢叶枯病和芽孢叶枯病发生最为普遍;球孢叶枯病、球黑孢叶枯病和匐柄孢叶枯病出现较少.在这12种真菌病原中,黄斑叶枯菌等10种为河南省新纪录.

红果西番莲砧木对某些根系真菌病原菌抗性的实验室和田间评价

红果西番莲砧木对某些根系真菌病原菌抗性的实验室和田间评价Ｎ．Ｍ．Ｇｒｅｃｈ等紫果西番莲是广泛栽培的品种，因为它的果实品质好，但它对镰刀菌和疫霉菌的感染高度敏感．Ｂｒｏｄｒｉｃｋ等（１９７６）指出，黄果西番莲对茎腐和根腐病的抗性比紫果西番莲强，他们推荐...

美国农业部研究人员认为真菌病原体基因组序列对小麦和白杨树带来威胁

由美国农业部科学家牵头与一个国际研究小组研究人员一起对2个真菌病原体的基因组序列——一个威胁着全球小麦的供给，另一个威胁着今后作为很宝贵的生物燃料作物来源的一种限额生产的木料作物进行了研究。

工程化抗真菌病原体植株

当植物遭受病原真菌的侵袭时常常提高其几丁质酶的生产.此酶可降解存在于许多植物病原真菌而非植物中的几丁质和聚合物.因此通过响应真菌侵袭的植物诱导提高几丁质酶合成认为是植物防御反应的一部分.由此表明,通过引入外源几丁质酶基因可使植物提高对真菌侵袭的抗性.然而,常常很难检测到提高的几丁质酶活性超过植物基础酶活性.

从柑桔果中分离出的枯草杆菌系对采后真菌病原体抑制作用

从柑桔果中分离出的枯草杆菌系对采后真菌病原体抑制作用从在６℃下贮藏１５周的未处理健康葡萄袖、柠檬、柑、桔、橙果实中分离出抗寒细菌，调查它们对柑桔类果实采后致腐真菌生长的抑制能力。从果实中分离出的９８种枯草杆菌系中有２０种具明显的抑制作用（６０－－９２...

一株侵染日本松干蚧的病原真菌的分离及鉴定

从采集自然感染的日本松干蚧二龄若虫,分离纯化到一株定名为MM-2022的病原真菌。通过回接实验、形态特征观察、分子测序等方法,确定该菌株为Penicillium cairnsense。分离获得的自然感染致死日本松干蚧的原生病原真菌—P.cairnsense,其在PDA和SDAY培养基上的菌落颜色、质地和扫描电镜结果均存在差异。该菌株培养在PDA的菌落正面呈暗灰绿色,背面呈浅黄绿色,质地粉末状或颗粒状,分生孢子梗饱满,帚状枝显著双轮生,瓶状瓶梗每轮7~9个,分生孢子呈球形或近球形,数量多;然而,在SDAY的菌落正面呈鲜黄色,背面呈黄褐色或暗黄褐色,质地绒状,分生孢子梗不饱满、分生孢子和瓶梗数量相对较少。该菌株rDNA序列与GenBank中P.cairnsense序列相似性达99%,系统发育树上分在同一分支。

花魔芋软腐病原真菌分离鉴定

魔芋软腐病是魔芋生产过程中的重要病害,也是限制魔芋产业发展的主要因素。目前,已有报道魔芋软腐病主要由细菌引起,鲜有真菌引起魔芋球茎软腐发病的报道。为明确云南曲靖市花魔芋(Amorphophallus konjac)软腐病的病原种类和侵染特征,该研究通过组织分离法,对采集自云南曲靖市的花魔芋病样进行了真菌的分离,通过形态学结合基于ITS与LSU序列分析的分子鉴定方法对分离真菌进行鉴定,并根据柯赫氏法则进行致病性测定,并对鉴定出的病原真菌同魔芋软腐病原细菌进行了双回接试验分析。结果表明:(1)从形态学和分子水平鉴定了轮纹镰刀菌(Fusarium concentricum)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)和F.ambrosium 3种镰刀菌,1种毛霉属真菌(Mucor sp.),1种根霉属真菌(Rhizopus sp.),1种青霉属真菌(Penicillium sp.)和1种粉红螺旋聚孢霉属真菌(Clonostachys sp.)。(2)统计分析发现,轮纹镰刀菌的相对丰度最高,为45.45%。(3)柯赫氏法则检测发现轮纹镰刀菌具有致病性。(4)轮纹镰刀菌和病原细菌胡萝卜果胶杆菌(Pectobacterium aroidearum)双接种魔芋球茎发现软腐病发病更快,病变组织重量显著高于单接种轮纹镰刀菌或果胶杆菌处理。综上表明,魔芋软腐病可能是由真菌和细菌复合侵染引发。该研究结果为魔芋软腐病的防治提供了理论依据。

水蜜桃主要病原真菌分离鉴定及肉桂精油对其抑制作用

本文分别在2020年、2021年连续两年采集浙江省水蜜桃产区内的腐烂水蜜桃,从果实病灶组织中分离、纯化病原真菌,通过形态特征、分子生物学(rDNA-ITS序列分析)鉴定法以及致病性检测确定病原真菌的种类,并采用体外和体内试验探究肉桂精油对病原真菌的抑制效果。结果表明,从两年采集的腐烂桃果实中分离纯化出两株具有较强致病性的真菌,经鉴定为美澳型核果类链核盘菌(Monilinia fructicola)和匍枝根霉(Rhizopus stolonifer),分别导致桃果实的褐腐病和软腐病。肉桂精油对M. fructicola和R. stolonifer的生长均有一定的抑制作用,最小抑菌浓度分别为0.4和0.8 mL/L,M. fructicola对肉桂精油更加敏感;肉桂精油熏蒸处理水蜜桃可以降低这两种病原菌造成的病害发生率和病斑直径,表明肉桂精油能有效地控制这两种病原真菌导致的水蜜桃果实病害。

板栗花抑制植物病原真菌成分提取及活性研究

为促进板栗花资源的充分利用,本研究优化了板栗花中有效成分的提取条件,并评价了其对植物病原真菌的抑制活性。采用菌丝生长速率法比较板栗花提取物对3种不同植物病原体的作用,包括小麦赤霉病菌(FG)、油菜菌核病菌(SS)和黄瓜枯萎病菌(FO),结合单因素试验和响应面曲线法优化板栗花抑菌活性成分的提取工艺,并通过萃取分相探究不同相的抑菌活性成分含量及抑菌活性。结果表明,板栗花抑菌活性成分对3种植物病原真菌均有明显的抑制作用,其中对FG的抑制作用最为明显。经过严格的试验和优化,确定最佳提取条件为乙醇体积分数55.00%(V/V)、提取时间50.00 min、提取温度65.00℃、液料比15.00∶1 mL·g^(-1),该优化条件下提取物中的活性成分抑菌率达到了45.27%。乙酸乙酯相总酚、总黄酮含量最高,其抑制中浓度值(EC50)为2.51 mg·mL^(-1)。本研究结果可为开发新型植物源抗菌剂提供理论依据。

豆天蛾养殖过程中病原真菌的分离与鉴定

【目的】豆天蛾在养殖过程中极易遭受病原真菌的侵染,采集饲养过程中的僵虫,研究其病原真菌种类,为该虫养殖过程中病菌的防治提供参考。【方法】从僵虫上分离、纯化真菌菌株,通过形态观察和rDNA-ITS序列分析对菌株进行鉴定,并采用浸渍法验证菌株对豆天蛾4龄幼虫的致病性。【结果】共分离、鉴定出6株真菌菌株,分属于5个属,包括球孢白僵菌(Beauveria bassiana)1株(BbDd01)、罗伯茨绿僵菌(Metarhizium robertsii)1株(MrDd02)、淡紫紫孢菌(Purpureocillium lilacinum)1株(PlDd04A)、环链虫草(Cordyceps cateniannulata)1株(CcDd04B),以及黄曲霉(Aspergillus flavus)1株(AfDd03)和杂色曲霉(A.versicolor)1株(AvDd05)。致病性测定结果表明,球孢白僵菌、罗伯茨绿僵菌、淡紫紫孢菌和环链虫草对豆天蛾幼虫的致病力强,而黄曲霉和杂色曲霉的致病力较弱。【结论】球孢白僵菌、罗伯茨绿僵菌、淡紫紫孢菌和环链虫草是豆天蛾的致病真菌,而黄曲霉和杂色曲霉是豆天蛾的机会性致病菌。

杨桃病原真菌分离鉴定及代谢产物研究

为了解杨桃病原真菌的种类、生物学特性和代谢产物类型,本研究通过组织分离法对杨桃果实发病部位进行病原真菌分离,通过形态学结合基于ITS序列分析的分子鉴定方法对真菌进行鉴定,并对其生物学特性进行探究,使用液相色谱分离纯化菌株代谢产物,利用核磁共振谱确定代谢产物结构。结果表明:4株病原真菌分别是木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)、新拟盘多毛孢属(Neopestalotiopsis sp.)、裂褶菌(Schizophyllum commune)和枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)。这4株菌均可导致杨桃果实发病。进一步从木贼镰刀菌Fusarium equiseti发酵产物中分离得到4种化合物,分别为交链孢酚、1,4,7-三羟基-3,9-二甲氧基-6H-苯并[c]色烯-6-酮、红粉苔酸和7-羟基-4-甲基-1(3H)-异苯并呋喃酮。生物学特性的研究结果表明,4株病原真菌的最适生长温度在25~28℃,在pH4~10的范围内均能生长。

植物病原真菌肌球蛋白及其抑制剂研究进展

肌球蛋白是一类在真核生物中广泛存在的功能性蛋白,在生物体细胞内的各项生命活动过程中扮演着重要的角色。此外,来源于植物病原真菌的肌球蛋白对真菌的生长发育和致病性也有着重要影响。基于这些特性,越来越多研究者把目光投入到了以肌球蛋白为靶标的农药创制研究当中。基于植物病原真菌来源的肌球蛋白进行抑制剂设计,从而开发具有新型作用机制的杀菌剂,将是防控植物病害、保障粮食安全的重要手段。本文重点介绍了植物病原真菌来源肌球蛋白及其抑制剂的研究进展,主要综述了植物病原真菌肌球蛋白的结构特征和生化功能,以及近年来已报道的肌球蛋白抑制剂类杀菌剂,可为植物病原真菌肌球蛋白靶标导向先导化合物的发现和新农药活性分子的合理设计提供参考。

表观遗传调控在植物病原真菌发育和致病过程中的作用与分子机制

经过长期进化,植物病原真菌发展出多种复杂而精妙的侵染宿主策略。在植物与病原菌互作过程中,病原菌致病基因的精准表达与调控起至关重要的作用。表观遗传调控是指通过化学修饰改变染色体上的DNA和蛋白质,从而调控基因表达的过程,包括DNA甲基化、组蛋白甲基化、组蛋白乙酰化以及染色质重塑等。越来越多的证据表明,表观遗传调控在植物病原真菌基因的转录重编程中发挥重要作用,进而影响其发育、环境应激反应、次生代谢物的生物合成和致病性等方面。本文综述了近年来表观遗传调控因子方面的研究进展,包括组蛋白修饰、染色质重塑等在植物病原真菌发育和致病性中的作用,并对当前的研究进行了展望,以期为未来的病害防治研究奠定坚实的理论基础。

Autof ms 1000与MALDI Biotyper对临床常见丝状病原真菌鉴定的比较分析

目的:研究比较两种基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(Autof ms 1000与MALDI Biotyper)对临床常见丝状病原真菌鉴定的准确性和效率。方法:共纳入32株丝状病原真菌标准菌株和120株临床分离菌株,按照标准操作方法分别用Autof ms 1000与MALDI Biotyper对相关菌株进行鉴定,对相关结果及测序分子鉴定结果进行对比分析。结果:在种水平上,Autof ms 1000质谱仪共检出140株丝状病原真菌,检出正确率为92.1%(140/152),其中126株分值在9.0以上,2株出现错误鉴定,误鉴定比例为1.3%(2/152);MALDI Biotyper质谱仪共正确检出98株,检出正确率为64.4%,2.0分以上的菌株47株,仅3株鉴定分值大于2.3分,7株出现误鉴定。结论:Autof ms 1000与MALDI Biotyper这两种质谱鉴定系统均能用于临床常见丝状病原真菌的快速鉴定,而Autof ms 1000质谱仪更具优势。

十堰市白菜黑斑病病原真菌的分离与鉴定

对湖北省十堰市当地白菜(Brassica pekinensis)品种的黑斑病进行病原真菌鉴定和病害分析,并提出相应的预防措施。采用组织分离法从病叶中分离得到病原真菌,并利用rDNA ITS和Alt-α1基因序列比对进行分析鉴定。结果表明,发现1个新的链格孢属(Alternaria sp.)真菌,推测其是导致十堰市当地白菜黑斑病的致病真菌。此外,确认ITS序列和Alt-α1基因序列的联合分析,能够区分3种常见的链格孢属真菌Alternaria brassicicola、Alternaria japonica、Alternaria brassicae。

植物与病原真菌分子互作机制

真菌引发的植物病害是全球粮食安全的主要威胁之一,了解真菌与植物的相互作用对防治植物病害具有重要意义。病原真菌分子与植物的相互作用是一个复杂的过程。该文从病原真菌在侵染植物的过程中参与致病性的调控和植物受到侵染后的免疫信号转导途径等方面阐述了病原真菌分子与植物互作的机制。

昆虫病原真菌在螨类防治中的应用研究进展

昆虫病原真菌是一类重要的微生物杀虫剂,广泛应用于各类农业和森林害虫的生物防治.植食性螨类在农林业生产及农产品储藏过程中的危害日益加重,由于其抗药性日益增强,已被认为是最难防治的害虫之一.捕食螨是植食性害螨的有效天敌,昆虫病原真菌和捕食螨联合防治害螨,既可提高对害螨的防治效率又有益于环境保护.本文介绍了昆虫病原真菌几种代表种及昆虫病原真菌致病机理,总结了昆虫病原真菌在螨类防治中的研究进展,并展望了昆虫病原真菌作为极具潜力的生物农药与捕食螨联合防治害螨的未来发展方向.