兔角膜上皮细胞短期暴露实验替代兔眼刺激实验的可行性研究

目的:探讨用兔角膜上皮细胞(SIRC)模型对眼用制剂包装材料的浸提液进行短时暴露(STE)实验,以替代动物眼刺激实验的可行性。方法:在眼用制剂包装材料的浸提液中加入不同浓度的阳性物质,同时进行STE实验和兔眼刺激实验,比较两种实验分级的一致程度。结果:两种方法对不同浓度的阳性浸提液进行实验分级的一致程度为78.6%,统计学分析证明两种方法具有相当的一致性。以动物实验的分级为标准,STE实验的灵敏度和特异性分别为100%和80%,假阳性率为20%,假阴性率为0%。结论:SIRC的STE眼刺激实验有潜力作为眼用制剂包装材料眼刺激性实验的替代方法。

不同红细胞溶血实验替代兔眼刺激性实验比较研究

目的:探讨不同种属红细胞在溶血实验中替代动物实验方面的差异性。方法:选用20批次洗发剂进行家兔眼刺激实验,使用同批次样品进行两种不同哺乳动物红细胞溶血实验,根据各自不同的分级标准,将红细胞溶血试验与动物实验进行相关性分析。结果:按照相应的分级标准,绵羊红细胞溶血实验对比分析结果:Kappa=0. 426, Spearman相关系数为0. 598,猪红细胞溶血实验对比分析结果:Kappa=0. 531, Spearman相关系数为0. 464。两种动物红细胞溶血试验结果对比分析结果,Kappa=0. 358, Spearman相关系数为0. 413。结论:实验结果说明两种实验方法有一定的相关性,红细胞溶血实验能在一定范围内取代兔眼刺激实验,且红细胞种属不影响实验结果。

眼用制剂刺激性体内评价方法研究进展

眼用新剂型在提高眼部生物利用度同时,也引入了大量以表面活性剂、高分子聚合物、阳离子材料等具有刺激性的物质。因此,在保证眼部制剂有效性的同时,其安全性也越来越受到关注。由于体外实验缺乏相关的酶系和组织结构的整体反应,其结果外推至动物实验的合理性和关联性也有待于进一步研究证明。本文综述了常用的体内(眨眼、组织病理切片、Draize评分、共聚焦显微镜法等)眼部刺激性实验方法,并对这些方法进行了评估和分析。

红细胞溶血实验替代兔眼刺激性实验检测农药眼刺激性初步研究

目的探讨红细胞溶血实验(Red blood cell test,RBC)检测农药眼刺激性的适用分级标准和作为兔眼刺激性实验(Draize test)替代方法的适用性。方法选取29种市售农药进行RBC实验,并同步进行Draize实验。根据2种分级标准,将RBC实验结果与Draize实验进行相关性和一致性分析。结果按化妆品原料分级标准,区分无/轻刺激性和中度及以上眼刺激性农药的结果为:M cNemar-Bowker W=9.35(P=0.22);Kappa=0.55(P=0.002);Spearman R=0.58(P=0.001);按化妆品产品分级标准,区分无/微刺激性和轻度及以上眼刺激性农药的结果为:M cNemar-Bowker W=10.40(P=0.02);Kappa=0.54(P=0.001);Spearman R=0.61(P<0.001)。结论 RBC实验可参照化妆品原料分级标准检测农药眼刺激性;尚不能完全替代Draize实验,但可作为筛检农药眼刺激性的替代方法纳入到农药眼刺激性检测策略中。

离体兔眼实验的建立及其初步评价

目的 建立离体兔眼实验方法,评价此实验的预测力和可靠性.方法 参照欧洲替代方法验证中心推荐的离体兔眼实验方法并结合具体条件,建立适合本实验室的离体兔眼实验方法.同步采用离体兔眼实验和兔眼刺激实验对26种受试物的眼刺激性进行检测,对2种实验分级结果的一致性和可靠性进行统计分析.结果 离体兔眼实验对26种受试物的眼刺激性分级结果与兔眼刺激实验分级结果具有较高的等级相关性（Spearman R=0.943,P=0.000;Gamma=1.000,P=0.000）及分级一致性（Kappa=0.799,P=0.000）,2种实验方法分级结果的差异无统计学意义（McNemar Bowker W=5.00,P＝0.172）;3次离体兔眼实验结果重复性良好（F=0.439,P=0.646）.结论 本实验室成功建立了离体兔眼实验的实验方法,可以作为兔眼实验的一种替代方法.

碘伏溶液开瓶后在37℃恒温箱保存的可行性研究

目的探讨碘伏溶液开瓶后在37℃恒温箱保存的可行性。方法将碘伏溶液分为37℃恒温箱保存组和室温保存组,每日取25 mL碘伏溶液测量其有效碘含量,对比第7天毒性试验,第14天染菌量测定及现场消毒效果鉴定试验。结果 37℃恒温箱保存组碘伏溶液有效碘含量稳定,现场皮肤消毒试验细菌杀灭对数值高于技术规范要求,与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),碘伏溶液染菌量检测无细菌及霉菌生长,一次完整皮肤刺激实验及急性眼刺激试验结果均为无刺激性。结论碘伏溶液开启后保存于37℃恒温箱14 d内安全有效,毒性无增加。

藏药吉堪明目液毒理研究

目的:通过藏药吉堪明目液的急性毒性、长期毒性与眼部刺激性实验,观察其毒性反应。方法:观察吉堪明目液对小鼠灌胃,测定最大耐受量的毒性反应;对家兔短期多次滴眼(15min/次,2h)与常规治疗7d滴眼(3次/d,7d)对兔眼的刺激情况;以1.1g/kg、0.56g/kg、0.28g/kg剂量组连续滴眼(4次/d)30天后,观察家兔每周体重、重要脏器系数、血象、血生化指标变化及眼球、重要脏器的病理检测。结果:吉堪明目液对小鼠最大耐受量(MTD)为生药39g.kg-1,无任何不良反应;短期多次给药眼刺激和常规治疗7天给药刺激性试验对兔眼角膜、虹膜、结膜综合评分为0,均无刺激作用,眼球病理检测无异常;连续滴眼30天后外观行为、每周体质量、血液学和血液生化学、脏器系数、与空白组比较无明显差异;眼球和脏器病理检测未发现与药物相关的明显病变,停药后也未见药物延迟毒性反应。结论:本藏药制剂未发现毒性反应,其临床应用是安全和无刺激的。

百香果水提物皮肤应用安全性评价

以紫香1号百香果为研究对象,通过分析百香果水提物皮肤应用的安全性,为百香果的开发利用提供毒理学依据。分别对大鼠和家兔进行急性经皮毒性实验、单次皮肤刺激性实验、多次皮肤刺激性实验及急性眼刺激性实验。结果表明,经急性经皮毒性实验后所有大鼠均未出现死亡及明显的中毒症状;经单次皮肤刺激性实验后,家兔和大鼠皮肤未形成明显红斑和水肿,皮肤刺激强度为无刺激;经多次皮肤刺激性实验后大鼠给药皮肤出现少量局部红斑,但5 d后恢复正常,综合评分皮肤刺激强度为无刺激;经眼刺激实验后,家兔角膜、虹膜均未出现明显异常,眼刺激强度为无刺激。因此,百香果水提物对大鼠和家兔皮肤和眼均无毒性和明显刺激性。

一种植物源性化妆品原料局部毒性试验研究

随着人们对化妆品的健康性和安全性要求越来越高,绿色天然的消费理念日益深入人心。以植物提取物、从植物中提取的活性成分等植物资源为原料开发的化妆品越来越受到消费者追捧。但“天然”不等于安全,植物提取物中的成分众多且提取物成分复杂,可能存在安全性风险成分,因此在使用植物提取物用于化妆品时需进行毒理学评价[1]。近年来,基于动物福利及科学技术的进步,多种替代动物试验的体外方法得到开发和应用[2]。