着丝粒关联蛋白1在乳腺癌中的过度表达及其对人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞增殖克隆和凋亡的影响

目的 研究着丝粒关联蛋白1(KNTC1)在乳腺癌组织和细胞中的表达、功能及其发挥功能的潜在机制。方法 下载癌症基因组图谱乳腺癌中的RNA-seq数据,一般线性模型估算KNTC1在不同组间的差异。qRT-PCR检测人乳腺癌细胞MDA-MB-231、T-47D、MCF-7中KNTC1的mRNA表达水平。使用含有目的基因RNA干扰序列的慢病毒技术敲减MDA-MB-231细胞中KNTC1表达,用qRT-PCR和Western blot检测细胞中KNTC1 mRNA和蛋白质表达水平。Celigo细胞计数和克隆形成试验检测细胞生长和增殖状况;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 KNTC1在乳腺癌组织中高度表达。KNTC1在MDA-MB-231、T-47D和MCF-7细胞中的表达丰度均为高,在MDA-MB-231细胞表达最高。与对照组比较,实验组MDA-MB-231细胞中KNTC1表达后,细胞生长与增殖能力显著下降(7.82±0.73、0.89±0.04;t=17.259,P=0.003),细胞的克隆形成能力显著降低(75±2、5±2;t=121.244,P<0.001),细胞凋亡明显增加[(4.73±0.19)%、(8.86±0.12)%;t=31.506,P=0.001]。结论 KNTC1在乳腺癌组织和细胞中高度表达,干扰KNTC1表达可抑制乳腺癌细胞的增殖克隆并促进其凋亡。