乳腺癌细胞着丝粒蛋白W表达水平对抗肿瘤药物TEOA敏感性的影响

目的探讨乳腺癌细胞着丝粒蛋白W(CENPW)表达水平对化疗药物2α,3α,24-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(TEOA)敏感性的影响。方法人乳腺癌细胞株MDA-MB-231用si-NC、si1-CENPW和si2-CENPW转染,分为相应3组;经si-NC、si1-CENPW转染的MDA-MB-231细胞分别用抗肿瘤药物TEOA处理,分为相应4组。采用Western blot法检测3组转染细胞中CENPW蛋白和紧密连接蛋白1(CLDN1)的相对表达水平;采用细胞划痕实验检测3组转染细胞的迁移能力。采用细胞增殖和毒性检测(CCK-8)法检测两组TEOA处理的转染细胞存活率;采用碘化丙啶染色法检测两组细胞死亡率。采用Western blot法检测4组细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD-1)、转录抑制因子2(Slug)、去乙酰化酶3(SIRT3)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的相对表达水平。结果相比si-NC组,si1-CENPW组和si2-CENPW组细胞CENPW和CLDN1蛋白相对表达水平显著降低,细胞迁移能力显著下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。相比si1-CENPW组,si1-CENPW+TEOA组细胞存活率显著降低,细胞死亡率显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。相比si-NC+TEOA组,si1-CENPW+TEOA组细胞CyclinD-1、Slug、SIRT3蛋白相对表达水平显著降低;相比si1-CENPW组,si1-CENPW+TEOA组细胞CyclinD-1、Slug、SIRT3、Bcl-2蛋白相对表达水平显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论干扰CENPW表达在体外可协同调节CLDN1表达,与TEOA联合治疗可作为乳腺癌的一项新治疗策略。

着丝粒蛋白W调控脑胶质瘤侵袭性的作用

目的:探讨着丝粒蛋白W(CENP-W)在人脑胶质瘤组织中表达的意义及其对人脑胶质瘤侵袭性的影响。方法:免疫组织化学法、实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测不同级别人脑胶质瘤中CENP-W的mRNA与蛋白表达水平变化。运用Transwell实验检测特异性siRNA敲低CENP-W表达后U251细胞侵袭能力的变化,同时检测大鼠肉瘤癌基因(RAS)蛋白及mRNA水平。结果:CENP-W在人脑胶质瘤组织中呈高表达。CENP-W可增强U251细胞侵袭能力,表达受抑制时可下调U251细胞中RAS基因的水平。结论:CENP-W在人脑胶质瘤中起着致癌基因的作用,可能通过调节RAS信号通路提高胶质瘤的侵袭性。

着丝粒蛋白W在脑胶质瘤中的表达及其对侵袭的作用

目的探讨着丝粒蛋白W(centromere protein W,CENP-W)在人脑胶质瘤中的表达水平及与预后的相关性,并探讨其对脑胶质瘤细胞侵袭作用的影响。方法在高级别胶质瘤组织、低级别胶质瘤及瘤旁正常脑组织中,采用蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR法检测CENP-W的表达水平,并统计分析表达水平与胶质瘤临床病理特征及预后的相关性,应用特异性siRNA干扰U251细胞中CENP-W表达使其下调后,通过Transwell侵袭实验观察转染CENPW siRNA对U251细胞侵袭能力的影响。结果胶质瘤组织CENP-W表达水平明显高于正常脑组织,并且与胶质瘤的病理级别呈正相关性;转染成功后,与空白对照组及阴性对照组比较,转染CENP-W-siRNA组的细胞侵袭及迁移能力均下降,Kaplan-Meier生存分析及Log-rank检验显示低表达CENP-W患者的PFS明显长于高表达组。结论CENP-W表达与胶质瘤的病理级别呈正相关,CENP-W可以促进脑胶质瘤的侵袭,预示CENP-W可作为胶质瘤治疗新靶点。

缺氧诱导因子-1α与着丝粒蛋白W在人胶质瘤组织及细胞中表达的相关性

目的 :探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)与着丝粒蛋白W(centromere protein W,CENP-W)在人胶质瘤中表达的相关性。方法 :采用免疫组织化学法分别检测高级别胶质瘤、低级别胶质瘤及瘤旁正常脑组织中HIF-1α和CENP-W的表达水平,并统计学分析蛋白表达水平与胶质瘤临床病理特征的关系,以及两蛋白表达之间的相关性。用氯化钴抑制胶质瘤U251细胞中HIF-1α的分解,然后分别采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测CENP-W蛋白及m RNA表达的变化。应用特异性小干扰RNA(small interference RNA,si RNA)技术下调U251细胞的HIF-1α表达后,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测CENP-W蛋白及m RNA表达的变化。应用特异性si RNA下调U251细胞中CENP-W表达后,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测HIF-1α蛋白及m RNA表达的变化。结果:胶质瘤组织中HIF-1α和CENP-W的表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.05),并且与胶质瘤的病理级别明显相关(P<0.05);两蛋白表达水平之间也呈正相关性(r=0.709,P<0.05)。氯化钴作用U251细胞后,HIF-1a和CENP-W蛋白及m RNA的表达水平均明显升高(P<0.01)。si RNA干扰HIF-1α表达后,CENP-W蛋白及m RNA表达水平均明显降低(P<0.01);而si RNA干扰CENP-W表达后,HIF-1α蛋白及m RNA表达水平无明显变化(P>0.05)。结论:HIF-1α和CENP-W表达均与胶质瘤的病理级别呈正相关性。HIF-1α可以调节CENP-W的表达。

人脑胶质瘤中CENP-W/B23调控Ras信号通路的相关性

【目的】探讨人不同病理级别脑胶质瘤组织中着丝粒蛋白W(CENP-W)、核仁磷酸蛋白(B23)、大鼠肉瘤癌基因(RAS)的表达及其相关性。【方法】在高级别胶质瘤组织、低级别胶质瘤及瘤旁正常脑组织中,采用免疫组织化学法分别检测CENP-W的表达水平,并统计学分析蛋白表达水平与胶质瘤临床病理特征的关系,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测CENP-W、B23、RAS的表达水平,分析与胶质瘤分级的关系以及表达的相关性。应用特异性si RNA干扰U251细胞中CENP-W表达使其下调后,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测RAS蛋白及m RNA表达的变化。【结果】胶质瘤组织CENP-W、B23、RAS的表达水平明显高于正常脑组织,并且与胶质瘤的病理级别呈正相关性;CENP-W、B23、RAS的m RNA表达水平之间成正相关性。CENP-W可以上调RAS的表达。【结论】CENP-W、B23、RAS表达均与胶质瘤的病理级别呈正相关。CENP-W可以调节RAS的表达,预示CENP-W可作为胶质瘤治疗新靶点。

下调CENP-W对人脑胶质瘤U87细胞的影响

目的:研究下调着丝粒蛋白W(centromere protein W,CENP-W)的表达水平对人脑胶质瘤U87细胞的影响。方法:采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制人脑胶质瘤U87细胞CENP-W的表达,采用RT-qPCR和Western blot法评价siRNA的干扰效果,采用MTT法、BrdU实验和平板集落形成实验测定细胞的增殖,Transwell小室检测细胞侵袭力的变化,划痕实验检测细胞迁移能力的变化,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡的改变。结果:MTT实验、平板集落形成实验和BrdU实验显示转染siRNA的实验组U87细胞的增殖能力、集落形成能力较空白对照组及阴性对照组明显降低;Transwell实验和划痕实验显示实验组细胞的迁移、侵袭能力较空白对照组及阴性对照组明显减弱;流式细胞术分析表明实验组细胞的细胞周期被阻滞在G_0/G_1期;实验组细胞凋亡比例较对照组增多(P<0.05)。结论:下调CENP-W的表达可抑制人脑胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进细胞的凋亡,提示CENP-W有望成为人脑胶质瘤基因治疗的候选靶点。

CENPW基因在肾透明细胞癌中的表达特征及预后评估价值

目的分析着丝粒蛋白W(CENPW)基因在肾透明细胞癌(KIRC)中的表达特征及预后评估价值。方法从TCGA数据库获取KIRC患者的CENPW基因表达转录本测序数据和临床资料;使用Wilcoxon rank sum检验和Wilcoxon signed rank检验分析CENPW基因在KIRC正常组织和肿瘤组织中的表达;运用Kaplan-Meier方法分析CENPW基因的表达与KIRC患者总体生存率关系;通过Kruskal-Wallis检验和Wilcoxon rank sum检验分析CENPW基因表达与KIRC患者临床病理参数的关系;采用COX回归分析CENPW基因表达水平在KIRC预后中的价值;RT-qPCR检测CENPW基因mRNA在KIRC细胞系和正常肾上皮细胞系表达差异。结果与正常肾组织相比,CENPW基因在KIRC组织中高表达(P<0.001);在KIRC组织中CENPW基因高表达组的总体生存率明显低于低表达组(P<0.001),且其表达水平与肿瘤分级、临床分期、病理T分期、病理N分期、病理M分期均显著相关(P<0.001);COX回归分析提示CENPW基因是KIRC预后的独立危险因素;RT-qPCR结果显示CENPW基因在KIRC细胞系中高表达(P<0.05)。结论CENPW基因在KIRC组织中高表达,与肿瘤进展相关,可能是预测KIRC的分子标记物。

致癌基因CUG2的研究进展

CUG2蛋白,又称着丝粒蛋白W,是一种近期发现的核蛋白,研究发现CUG2为细胞分裂、细胞凋亡等过程所必需,在许多癌组织中都存在高表达,如结肠直肠癌及胃癌,被预测是一种致癌基因。它位于核仁上或者着丝粒上,能和着丝粒蛋白T相互结合,共同参与着丝粒染色质结构的形成。现概要介绍CUG2基因的发现、结构特点、生物学功能及其与肿瘤之间关系的最新进展。