胚泡着床窗口的分子调控

着床窗口是指当胚胎发育到胚泡阶段时 ,子宫也增殖和分化到可接受状态 ,二者相互作用使胚泡着床的短暂时间 .雌激素和孕酮是该过程的综合调控分子 ,它们通过多种局部信号分子的介导 ,使子宫中的各种细胞类型增殖、分化 ,为着床窗口的开放做出相互协调的反应 .子宫与胚胎在着床窗口通过前列腺素、组织胺、降钙素、多种细胞因子和生长因子的旁分泌作用进行分子对话 ,使胚泡滋养层与子宫内膜上皮发生附着反应 .着床窗口一旦开放 ,即自动向非接受态转化 .

胚泡和内膜发育状态对子宫内膜“着床窗口”形成的影响

本文应用胚泡移植和改进的内膜上皮细胞与胚泡共培养方法研究了胚胎和子宫内膜不同发育状态对子宫内膜对胚泡接受性的影响.实验证明正常胚泡移植到子宫内膜的“着床窗口”出现时间以妊娠d4天上午9时到下午18时.如果被移植的胚泡是取自延缓着床胚泡,则它们的“着床窗口”出现时间有明显缩短,只能到下午14时为止.另外也证明.子宫内膜本身发育状态对内膜的接受性也有影响.以妊娠d5天内膜的胚泡附着数最多.所以.可以认为胚胎和内膜的发育状态都是可以影响内膜“着床窗口”的出现与消失的.

胶原酶I消化联合筛网过滤法用于人与小鼠着床窗口期子宫内膜原代培养的效果比较

目的观察胶原酶I消化联合筛网过滤法用于人和小鼠着床窗口期子宫内膜原代培养的可行性及效果。方法分别以人排卵后5～7 d及妊娠第4天为人和小鼠子宫内膜着床窗口期,无菌操作取子宫内膜组织,用胶原酶I消化、筛网过滤后行原代细胞培养并鉴定,观察培养细胞的形态及纯度。结果人和小鼠原代培养成功率分别为80%、83%(P>0.05),失败原因包括标本污染及细胞数少;人和小鼠原代培养上皮细胞纯度比较无显著差异,但前者分离的细胞包括上皮细胞和基质细胞两种。结论胶原酶I消化联合筛网过滤法可为人和小鼠胚胎植入及子宫内膜容受性等进一步研究提供体外培养模型,但取材方法及培养细胞种类有异。

子宫内膜异位症不孕患者着床窗口期内膜组织中MDM4、miR-144-3p表达及其意义

目的:探究子宫内膜异位症(EMS)不孕患者着床窗口期子宫内膜组织中鼠双微体4(MDM4)、微小RNA-144-3p(miR-144-3p)的表达及其临床意义.方法:收集本院2019年10月—2021年8月资料保存齐全的EMS不孕患者62例为EMS组,输卵管因素不孕患者59例为对照组.采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测两组子宫内膜组织MDM4mRNA、miR-144-3p表达水平,免疫组织化学法检测子宫内膜组织MDM4蛋白表达水平;采用Pearson法及Spearman法分析EMS不孕患者着床窗口期、卵泡期子宫内膜组织中MDM4mRNA、蛋白与miR-144-3p水平的相关性.结果:EMS组着床窗口期子宫内膜组织中MDM4mRNA水平及蛋白阳性率高于对照组,miR-144-3p水平低于对照组(P<0.05);卵泡期子宫内膜组织中miR-144-3p、MDM4mRNA水平及蛋白阳性率两组无差异(P>0.05).Pearson法分析,EMS组着床窗口期、卵泡期子宫内膜组织中MDM4 mRNA与miR-144-3p水平呈负相关(r=-0.679、-0.359,P<0.05);Spearman法分析,EMS组着床窗口期、卵泡期子宫内膜组织中MDM4蛋白与miR-144-3p水平呈负相关(r=-0.502、-0.432,P<0.05).结论:EMS不孕患者着床窗口期子宫内膜组织中miR-144-3p低表达、MDM4高表达,且二者呈负相关,miR-144-3p、MDM4可能共同参与了EMS不孕的发生.

内膜搔刮对RIF患者子宫内膜着床窗口期LPAR3和HOXA11表达的影响及临床意义

目的探讨对反复移植失败（RIF）患者进行内膜搔刮后，比较溶血磷脂酸受体3（LPAR3）和同源框基因11（HOXA11）在搔刮组与对照组子宫内膜着床窗口期蛋白的表达差异及临床结局。方法前瞻性纳入61例因输卵管因素不孕行IVF—ET助孕治疗的RIF患者作为研究对象，搔刮组31例患者于冻胚复苏移植的前1个月经周期月经来潮6h内进行内膜搔刮，对照组30例患者在冻胚复苏移植前未行内膜搔刮。采用免疫组化和WesternBlot的实验方法，检测LPAR3和HOXAll在以上两组RIF患者排卵后5～7天子宫内膜窗口期蛋白表达量的差异和临床结局。结果两组患者在年龄、不孕年限、体重指数（BMI）、促性腺激素（Gn）天数、Gn总量、获卵数、胚胎移植数、移植日内膜厚度、基础血清卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）及孕酮（P）及着床窗口期血清雌二醇（E2）、P水平相比较，差异无统计学意义（P〉0．05），搔刮组生化妊娠率、胚胎着床率、临床妊娠率及持续妊娠率均高于对照组，有统计学差异（P〈0．05）。免疫组化结果显示搔刮组腺上皮LPAR3及间质HOXAll在子宫内膜着床窗口期的表达量明显高于对照组，而搔刮组腺上皮HOXAll在子宫内膜着床窗口期的表达量明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．001）。WesternBlot结果显示搔刮组LPAR3和HOXAll蛋白在着床窗口期的表达量明显高于对照组，有统计学差异（P〈0．001）。结论子宫内膜搔刮术可以提高LPAR3和HOXAll的表达量，从而改善子宫内膜容受性，提高RIF患者的临床妊娠率。

多囊卵巢综合征患者着床窗口期子宫内膜VEGF、MIF的表达及意义

目的:探讨PCOS妇女促排卵治疗后着床窗口期子宫内膜MIF和VEGF的表达。方法:10例PCOS患者内分泌紊乱纠正、自然排卵或促排卵治疗后(PCOS组)和11例其他原因不孕妇女自然周期(对照组)着床窗口期取子宫内膜进行MIF和VEGF免疫组化染色,并进行统计学分析。结果:PCOS组着床窗口期子宫内膜MIF和VEGF较对照组低表达,MIF与VEGF的表达呈显著正相关。结论:PCOS患者着床窗口期子宫内膜中MIF、VEGF的低表达可能影响着床过程的多个环节,是造成PCOS患者内分泌紊乱纠正后仍出现妊娠率低、流产率高的原因之一。

IL-22在复发性流产和不孕妇女子宫内膜着床窗口期的表达和意义

目的 探究IL-22在复发性流产和不孕妇女子宫内膜着床窗口期的表达和意义,为阐明妇女不育不孕相关机制提供科学依据。方法 本研究于2019—2021年在丽水市人民医院纳入不孕妇女(47例)、复发性流产(45例)和健康对照妇女(50例)作为研究对象。在月经周期的着床窗口期进行子宫内膜取样,采用qRT-PCR和免疫组化方法对IL-22的表达情况进行分析。结果 qRT-PCR结果显示,三组子宫内膜IL-22水平比较差异显著,具有统计学意义,(F=23.93,P<0.001)。两两比较结果显示,复发性流产组[(3.41±0.73)μg/L]显著高于不孕组[(2.83±0.68)μg/L]和对照组[(2.46±0.60)μg/L],P均小于0.001,而不孕组显著高于对照组(P=0.006)。免疫组化结果显示,三组子宫内膜腺体和子宫内膜基质IL-22表达差异显著(F=965.38,P<0.001),两两比较结果均显示,复发性流产组>不孕组>对照组(P<0.05)。结论 子宫内膜着床窗口期IL-22表达显著增加,提示其导致妊娠和着床过程中的缺陷,可能与复发性流产相关。复发性流产妇女与不孕妇女IL-22表达差异提示其在这两组妇女中的不同作用。

内皮型一氧化氮合酶表达及微血管密度评估体外受精患者子宫内膜容受性的价值

目的:探讨着床窗口期子宫内膜内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达及微血管密度(MVD)评估体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕患者子宫内膜容受性的价值。方法:纳入IVF-ET助孕患者60例,于移植前一周期着床窗口期行子宫内膜取样,采用免疫组织化学SP法检测eNOS蛋白的表达及MVD,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测eNOS mRNA的表达。根据临床妊娠结局分为妊娠组(30例)和未妊娠组(30例),比较两组eNOS mRNA、蛋白表达及MVD的差异。结果:妊娠组eNOS mRNA(0.72±0.21)明显高于未妊娠组(0.29±0.12),差异有统计学意义(P<0.05);妊娠组子宫内膜eNOS蛋白阳性表达率(80.0%)明显高于未妊娠组(13.3%),差异有统计学意义(P<0.05);妊娠组MVD(14.53±3.28)明显高于未妊娠组(12.20±3.83),差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜eNOS蛋白表达水平与MVD呈正相关(r=0.814,P<0.01)。结论:着床窗口期子宫内膜eNOS mRNA及蛋白的高表达和MVD增加均能够改善子宫内膜容受性,有利于IVF妊娠结局。

胚胎植入—子宫内膜容受性是关键

目前,胚胎反复植入失败是辅助生殖技术面临的一个严峻挑战,它主要是由胚胎染色体异常和子宫内膜容受性遭到破坏所致。然而,在子宫内膜健全的情况下,异常胚胎亦能成功植入,因此子宫内膜容受性在胚胎植入过程中起到关键作用。但是,子宫内膜容受性建立的机制极其复杂,不仅受到卵巢性激素的影响,而且需要子宫内膜和胚胎分泌的细胞因子、粘附分子等对其进行调节。本文介绍了胚胎植入的具体过程,并依次从调节机制、临床评估、改善方法以及与子宫内膜容受性有关的新进展等方面对子宫内膜容受性相关内容进行综述,以明晰子宫内膜容受性在反复植入失败中的重要性。

促排卵周期PCOS妇女子宫内膜纤维粘连蛋白及层粘连蛋白的表达

目的:了解促排卵药物氯米酚(CC)、hMG及GnRH-a对黄体中期子宫内膜内膜纤维粘连 蛋白(FN)及层粘连蛋白(LN)表达的影响。方法:应用单克隆抗体,采用免疫组织化学技术检测50 例正常妇女自然周期以及50例正常妇女,45例多囊卵巢综合征妇女应用CC／hCG,CC／hMG／hCG 及GnRH-a／hMG／hCG方案促排卵治疗后黄体中期子宫内膜FN和LN的表达。结果:子宫内膜FN 和LN表达在正常妇女自然周期着床窗口时呈现强阳性;而CC、hMG抑制FN和LN的表达,使 其阳性强度减弱,有显著性统计学差异P<0．01;GnRH-a对FN和LN抑制不明显。同时妊娠者较 未妊娠者FN和LN表达强度高。结论:CC／hCG及CC／hMG／hCG方案促排卵后黄体中期子宫内膜 中FN和LN表达下降或缺失,内膜容受性下降,妊娠率降低。

巨噬细胞移动抑制因子与子宫内膜容受性

胚胎植入需要囊胚与子宫内膜同步发育,着床窗口期子宫内膜容受性在植入过程中起关键作用。近年研究发现,许多细胞因子、酶类等与子宫内膜容受性密切相关。巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是目前公认的一种调节免疫反应的多功能细胞因子。研究发现,MIF可影响整合素和血管内皮生长因子的表达。研究胚胎植入过程中MIF的表达及与相关细胞因子之间的作用,综述MIF与子宫内膜容受性的关系。

胰岛素样生长因子-Ⅱ在不明原因不孕患者子宫内膜中的表达

目的探讨IGF-Ⅱ在不明原因不孕患者胚胎着床窗口期子宫内膜中的表达及其与不孕的关系。方法通过单克隆抗体SP免疫组化法检测不明原因不孕患者胚胎着床窗口期子宫内膜IGF-Ⅱ的表达。结果子宫内膜IGF-Ⅱ表达定位于胞浆,腺体强于间质。不明原因不孕患者组子宫内膜腺体H-score值142.73±24.85,间质106.03±25.30:对照组腺体H-score值165.70±19.42,间质126.10±21.22。两组间差异显著(p<0.05)。结论胚胎着床窗口期子宫内膜局部IGF-Ⅱ表达下降,可能是引起不明原因不孕的病因之一。