免疫酶双重染色法显示再生神经中的神经生长因子与睫状节神经营养因子

本研究以成人正中神经切割伤后２～３个月的神经干为材料，冰冻切片，用免疫双重染色技术显示了神经生长因子与睫状节神经营养（诱向）因子在再生的周围神经组织中的表达与分布。神经生长因子选用ＡＰＡＡＰ法．其阳性产物呈红色；睫状节神经营养（诱向）因子选用ＡＢＣ系统，４氯－１－萘酚显色，阳性产物为褐色。光镜下观察：神经生长因子的阳性反应产物出现在正中神经切割伤后再生的神经纤维中，高倍镜下可见其阳性产物分布在轴索，而在雪旺氏细胞中没能见到呈红色的阳性反应产物；睫状节神经营养（诱向）因子分布在一些细胞体积大、核大呈增生活跃状态的雪旺氏细胞中。红与褐双色反应产物色调清晰，效果较好。研究结果提示：睫状节神经营养（诱向）因子与神经生长因子在人周围神经再生过程中起着十分重要的作用。

人骨髓间充质干细胞的体外培养及睫状神经节神经营养因子诱导其向神经元样细胞分化的研究

目的探讨人骨髓间充质干细胞(h-MSCs)体外培养条件及睫状神经节神经营养因子(CNTF)对h-MSCs向神经元样细胞分化的影响。方法采用梯度离心法和全骨髓法相结合,利用含血清的DMEM/F12培养基培养h-MSCs,以碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预诱导24h后再以不同浓度CNTF诱导,传至第3代时h-MSCs开始向神经元样细胞方向分化。应用免疫细胞化学技术对培养细胞及其分化细胞进行鉴定。结果h-MSCs在体外培养条件下能保持旺盛的增殖能力,CNTF诱导后细胞形态发生明显改变,伸出突起,类似神经元;免疫细胞化学法检测显示CD44、CD54以及诱导后神经元特异性蛋白(NSE)和巢蛋白(nestin)均呈阳性表达。10ng/mL实验组NSE阳性细胞占细胞总数的(42.42±1.39)%,nestin阳性细胞占细胞总数的(45.36±1.60)%。结论h-MSCs可在体外扩增、培养。h-MSCs经bFGF预诱导后再经CNTF诱导可向神经元样细胞方向分化。10ng/mL为CNTF的最适诱导浓度。

连续性神经瘤型损伤模型兔的CNTF和CGRP表达变化的研究

目的通过造成兔腓神经部分损伤,形成连续性神经瘤损伤的哺乳类动物模型,为进一步研究提供基础。方法随机选取12只雄性新西兰兔一侧腓神经的部分束被切除,6周后损伤段神经组织切片经苏木精伊红染色、Luxol fast blue组化染色证实形成典型神经瘤病理改变；以建立损伤模型的6只兔子健侧作为对照,用实时荧光定量PCR法测定损伤神经远端以及L_7、S_1背根神经节睫状节神经营养因子(CNTF)、降钙素基因相关肽(CGRP)的mRNA表达量变化,以Western-blot法测定CNTF、CGRP的蛋白表达水平。结果腓神经形成连续性神经瘤后神经瘤侧CNTF、CGRP的mRNA和蛋白表达与健侧对照比较,其变化为CNTF的mRNA和蛋白表达量下降(P＜0．05),而CGRP的mRNA和蛋白表达量上调(P＜0．05)。结论腓神经的部分损伤方法可有效地建立连续性神经瘤型损伤的模型,并引起CNTF、CGRP的表达变化。

以更高的成就为国争光——记国家杰出青年基金获得者顾晓松副教授的三次出国经历

今年5月,南通医学院副院长顾晓松副教授获得了国家首批杰出青年基金60万元的科研资助。作为国际脑研究组织的成员,在脑神经研究方面卓有成就的青年学者,顾晓松以他出色的科研成果和居世界前列的科研课题得到有关方面的资助,这已经不是第一次。而顾晓松,一心想的则是既有祖国的大力支持,就一定要以自己的刻苦努力,不断取得更高的成就,为国争光。 顾晓松1980年毕业于南通医学院,1983年考取该院武义鸣教授的硕士研究生。顾晓松读研究生的时期,正逢出国潮起,许多在校的和已毕业的大学生以多种途径踏出国门。对此,顾晓松也想过,也有条件去争取,但他想得更多的是国家。他发誓说:我一定要在国内干出成绩,以中国科学家的身份,让外国人请我去讲学。