乳腺癌患者丝氨酸-苏氨酸激酶受体、癌胚抗原、糖类抗原125、恶性肿瘤特异性生长因子水平及临床意义

目的探讨乳腺癌患者丝氨酸-苏氨酸激酶受体(STRAP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、恶性肿瘤特异性生长因子(TSGF)水平及意义。方法选取2018-01—2020-02在河北中石油中心医院治疗的乳腺癌患者100例,同时选取乳腺良性病变患者60例作为对照,采用Western blot检测病灶STRAP蛋白相对表达量,全自动电化学发光免疫检测血清CEA、CA125和TSGF。结果乳腺癌患者病灶STRAP蛋白相对表达量明显高于乳腺良性病变患者(P<0.05);乳腺癌患者血清CEA、CA125和TSGF明显高于乳腺良性病变患者(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移患者病灶STRAP蛋白相对表达量、血清CEA、CA125和TSGF高于Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(P<0.05);病灶STRAP蛋白相对表达量与血清TSGF呈正相关(r=0.632,P<0.05);乳腺癌治疗后病灶STRAP蛋白相对表达量、血清CEA、CA125和TSGF明显较治疗前降低(P<0.01)。结论乳腺癌STRAP、CEA、CA125和TSGF明显升高,与TNM分期和淋巴结转移有关,其中STRAP与TSGF存在正相关关系。

丝／精氨酸蛋白特异性激酶生理功能及其在肿瘤中的研究进展

丝氨酸／精氨酸（serine／arginine，SR或RS）蛋白激酶是一类能与SR或RS二肽模体特异性结合的酶，而SR蛋白是细胞生长发育过程中的关键因子。

丝氨酸/精氨酸蛋白特异性激酶-2在胃癌组织中的表达情况及临床意义

目的探讨丝氨酸/精氨酸蛋白特异性激酶-2(SRPK2)在胃癌组织中的表达情况与胃癌患者临床特征及预后的关系。方法收集胃癌患者经手术切除的胃癌组织及相应的癌旁组织标本各85例,采用免疫组织化学法检测SRPK2在85例胃癌患者胃癌组织及癌旁组织中的表达情况,分析胃癌组织中SRPK2阳性表达与胃癌患者临床特征及预后的关系。结果免疫组化染色结果显示,胃癌组织中SRPK2的阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.01)。浸润深度(根据T分期)为T3~4期、有淋巴结转移、肿瘤直径>5cm、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者胃癌组织中SRPK2的阳性表达率均高于浸润深度(根据T分期)为T1~2期、无淋巴结转移、肿瘤直径≤5cm、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期的胃癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤分化程度、肿瘤部位胃癌患者胃癌组织中SRPK2的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,SRPK2阳性表达的胃癌患者的术后5年总生存率低于SRPK2阴性表达的胃癌患者(P<0.05)。结论SRPK2在胃癌组织中的阳性表达率较高,可能与胃癌的发生、发展有关。SRPK2阳性表达的胃癌患者的预后较差,其可能成为胃癌临床诊疗及预后评估的生物学标志物。

肿瘤睾丸抗原丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶31在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 筛选大肠癌相关肿瘤睾丸抗原丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶31（STK31）,为大肠癌的诊断和靶向治疗提供依据.方法 样本取自本院大肠癌患者及正常人,包括血液、原发灶（癌灶）,其中大肠癌45例（转移18例、非转移27例）及正常人为对照（15例）.提取样本RNA后逆转录合成cDNA,利用聚合酶链反应（PCR）扩增技术测定STK31在各组织中的表达水平,并进行统计学分析.结果 转移性大肠癌原发灶（0.007 78±0.010 80）与非转移癌原发癌灶中（0.00240±0.005 31）,STK31的表达量差异有统计学意义（P＜0.01）;未转移大肠癌（0.000 481±0.000458）与转移性大肠癌（0.000 177±0.000 223）外周血中STK31的表达量差异有统计学意义（P＜0.05）,两者与正常人（0.000 275±0.000312）外周血比较STK31的表达量差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 STK31在转移大肠癌肿瘤组织中的表达明显升高,可作为大肠癌转移的预测因素.

甘草酸对缺血/再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响及机制探讨

目的观察甘草酸对缺血/再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及甘草酸低、中、高剂量组5组,各10只。后四组制备缺血/再灌注大鼠模型,假手术组只穿线不结扎左冠状动脉降支,甘草酸低、中、高剂量组在缺血前半小时分别于股静脉注射30、60、90 mg/kg的甘草酸,假手术组与模型组注射同体积生理盐水。取各组心肌组织,采用TUNEL染色法测算心肌细胞凋亡率,Western blotting法检测MKK/JNK信号通路蛋白[丝分裂原活化蛋白激酶4/7(MKK4/7)、c-Jun氨基末端激酶1/2/3(JNK1/2/3)、磷酸化MKK4/7(p-MKK4/7)、磷酸化JNK1/2/3(p-JNK1/2/3)]及凋亡相关蛋白[天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)8、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Caspase-3]的表达,同时观察心肌组织病理改变情况。结果与假手术组相比,模型组细胞凋亡率高,p-MKK4/7、p-JNK1/2/3、Caspase-8、Bax、Caspase-3表达高而Bcl-2表达低(P均<0.05)。与模型组相比,甘草酸中剂量组及甘草酸高剂量组细胞凋亡率低,p-MKK4/7、p-JNK1/2/3、Caspase-8、Bax、Caspase-3表达低而Bcl-2表达高(P均<0.05)。模型组较假手术组大鼠心肌组织中出现较多变性坏死心肌细胞,有较多炎性细胞浸润;甘草酸低、中、高剂量组较模型组心肌细胞水肿程度轻且炎性细胞少。结论甘草酸可减少缺血/再灌注大鼠心肌细胞凋亡及心肌组织损伤;其机制可能为抑制MKK/JNK信号通路中MKK4/7和JNK1/2/3磷酸化,降低Caspase-8、Bax、Caspase-3表达,升高Bcl-2表达。

脂肪组织特异性敲除rictor损害胰岛素调节的脂肪细胞和全身糖脂代谢

mTOR是一个重要的调节细胞生长与代谢的丝氨酸／苏氨酸激酶，mTOR有包括两个多蛋白复合体：mTORC1和mTORC2。两种复合体都可以通过经典的P13K途径介导胰岛素和生长因子在细胞内内的信号传导。Akt是一个重要的胰岛素调节脂肪组织、骨骼肌和肝脏的糖脂代谢的信号转导中介，Akt的完全激活有赖于第473位丝氨酸的磷酸化（由mTORC2介导）以及第308位酪氨酸的磷酸化（由PDKl介导）。近年来，脂肪组织越来越受到人们的关注，其不仅仅是作为一个能量储存器官，同时也作为一个重要的内分泌器官，可分泌多种物质，例如瘦素、脂连素和抵抗素等。但是，mTORC2对脂肪组织中糖脂代谢有何作用目前还不清楚。研究者建立了脂肪组织nctor（mTORC2的一个重要组成成分）特异性敲除的小鼠以用于实验，这种小鼠被称为FRic一小鼠。

乳腺癌蛋白激酶C-β靶向治疗的研究进展

蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）是一族至少包括12种不同亚型的丝氨酸，苏氨酸蛋白激酶，它们的不同功能主要表现在细胞增殖、分化、凋亡、肿瘤发生、血管发生和耐药性等方面，基于组织表达、亚细胞定位和底物特异性等方面的差异，PKC同工酶表现出不同的生物学行为。Fields和Gustafsont对PKC同工酶的不同作用做了深入的研究，其结果显示，分子靶向治疗具有巨大的潜力，

辣椒类Pto蛋白激酶(PLPK)基因家族全基因组分析和进化研究

番茄Pto基因编码包含丝氨酸/苏氨酸激酶(STK)结构域的蛋白,它能抗由丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.Tomato,Pst)造成的细菌性斑点病。本研究使用PVX系统的体内识别系统测定显示Avr Pto在辣椒基因型中被特异性识别。这种Avr Pto识别导致非寄主超敏反应(HR),以及PVX::Avr Pto融合蛋白在接种辣椒叶组织中的定位,这表明在辣椒中存在与番茄类似的Pto识别机制。然而,辣椒全基因组分析显示没有对应番茄的Pto进化枝,表明在辣椒中有一个Pto识别的替代系统。不过,辣椒基因组中已经鉴定出25个具有高度保守STK结构域的类Pto蛋白激酶(PLPKs)。对于Ptos和PLPK的STK结构域中的大部分氨基酸位点,非同义(d N)与同义(d S)核苷酸替换速率的比值(ω)小于1,表明纯化选择在进化中起主要作用。然而,一些氨基酸位点在Pto同源物的进化过程中被发现为偶发性正选择,因此,不同的进化过程可能在植物中形成了Pto基因家族。基于RNA-seq数据,PLPK基因和其他Pto通路基因,例如Prf,Pti1,Pti5和Pti6在所有检测的辣椒基因型中都表达了。因此,辣椒中对Pst的非寄主超敏反应可能是由于PLPK同系物对Avr Pto效应物的识别,以及Pto信号通路下游组分的后续作用。然而,辣椒中Avr Pto的识别可能涉及其他类受体激酶(RLKs)的活性。本研究中鉴定的PLPKs将作为进一步了解PLPKs在非寄主抗性中作用的基础。

Vaspin通过AMPK/mTOR自噬信号通路影响2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能

目的 探究内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(visceral adipose tissue-derived serpin, Vaspin)改善2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)大鼠胰岛β细胞功能的作用机制。方法 采用高脂高糖喂养联合腹腔注射链脲佐菌素的方式建立T2DM大鼠模型,并随机分为T2DM组(n=10)、Vaspin组(n=10),以同周龄正常饲料喂养的SD大鼠为正常对照组(n=10)。记录造模前及Vaspin干预前、干预4周和干预8周时3组大鼠体质量和空腹血糖(fasting blood-glucose, FBG)。Vaspin干预8周时,测定3组大鼠空腹胰岛素(fasting insulin, FINS)、糖耐量与胰岛素敏感性、胰岛β细胞功能及自噬相关蛋白表达水平,观察胰腺组织病理学形态。结果 与正常对照组比较,T2DM组与Vaspin组干预前、干预4周、干预8周时体质量均下降,FBG均升高(P均<0.05);与T2DM组比较,Vaspin组干预8周时大鼠体质量增高,FBG下降(P均<0.05)。组织病理示,正常对照组大鼠胰腺组织正常,胰岛细胞排列均匀、整齐,形态规则;T2DM组大鼠胰岛结构明显破坏,细胞分布不均匀、形状不规则;Vaspin组大鼠胰岛结构损伤、胰岛细胞形态破坏均较T2DM组减轻。干预8周时,与正常对照组比较,T2DM组及Vaspin组FINS降低,腹腔葡萄糖耐量试验(intraperitoneal glucose tolerance test, IPGTT)及腹腔胰岛素耐量试验(intraperitoneal insulin tolerance test, IPITT)血糖曲线下面积均升高(P均<0.05);与T2DM组比较,Vaspin组FINS升高,IPGTT与IPITT血糖曲线下面积均降低(P均<0.05)。高葡萄糖钳夹试验示,干预8周时,Vaspin组葡萄糖输注速率、第一时相及第二时相胰岛素分泌量虽低于正常对照组,但各指标均较T2DM组升高(P均<0.05)。免疫组化及Western blot结果示,干预8周时,与正常对照组比较,T2DM组大鼠胰腺组织中胰岛素表达水平及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin, p-mTOR)/mTOR比值均降低,P62、微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein1 light chain3, LC3)蛋白水平、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase, p-AMPK)/AMPK比值、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均升高(P均<0.05);与T2DM组比较,Vaspin组大鼠胰腺组织中胰岛素、LC3蛋白水平、p-AMPK/AMPK比值及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均升高,p-mTOR/mTOR比值及P62蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。结论 Vaspin可通过AMPK/mTOR自噬信号通路增强T2DM大鼠胰岛β细胞自噬能力,进而改善胰岛β细胞功能。

超声引导下甲状腺FNAB联合BRAF V600E基因检测对甲状腺微小结节的诊断价值

目的:探讨超声引导下甲状腺细针穿刺活检(FNAB)联合丝/苏氨酸特异性激酶基因突变基因V600E(BRAF V600E)检测对甲状腺微小结节的诊断价值。方法:选取2020年10月~2021年10月于我院进行甲状腺切除术患者67例,术前均接受甲状腺FNAB及BRAF V600E基因检测,并与术后病理结果进行比对分析。结果:与术前单一进行FNAB相比,术前FNAB联合BRAF V600E基因检测的术后病理符合率(94.03%),特异度(97.14%),敏感度(90.63%)均高于单一FNAB检查,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:超声引导下甲状腺FNAB联合BRAF V600E检测可提高甲状腺微小结节术前检出率,对患者治疗及疾病诊断具有较高的参考价值。

FAM3A相互作用蛋白的检测

【目的】FAM3A(family with sequence similarity 3,memberA)为新近发现的细胞因子FAM3的家族成员之一,本研究检测FAM3A的相互作用蛋白。【方法】克隆FAM3A并连接到pGB载体,转化酵母Y190宿主菌,加入含主要信号传导细胞因子人cDNA文库,按标准程序进行酵母双杂交,以X-Gal显色评估活性。提取扩增阳性克隆,连接pACT2载体,测序、检索基因库确定阳性克隆基因。克隆阳性基因并与FAM3A质粒共转染酵母进一步确定相互作用。【结果】酵母双杂交检测到一个与FAM3A相互作用的阳性克隆,提取扩增后测序分析此相互作用蛋白为一睾丸特异性丝氨酸/苏氨酸激酶(TSSK4),一种与精子的发育、成熟、及生育功能有关的蛋白质.共转染pGB-FAM3A质粒与pACT2-TSSK4质粒入Y190酵母证实上述相互作用。【结论】FAM3A可能通过与TSSK4的相互作用参与精子功能与生育能力的调节。

FNAB联合BRAF^(V600E)突变检测在保定地区甲状腺结节诊断中的应用

目的探讨细针穿刺活检(FNAB)联合丝/苏氨酸特异性激酶基因V600E(BRAF^(V600E))突变检测在甲状腺结节诊断中的应用。方法选取本院2011年1月至2013年6月收治的保定地区甲状腺结节患者110例为研究对象,均行超声及甲状腺功能检查,经FNAB及BRAFV600E突变检测分析其应用价值。结果 FNAB检测术后病理符合率为76.36%,BRAF^(V600E)突变检测术后病理符合率为88.18%,FNAB联合BRAF^(V600E)突变检测敏感度为89.66%,特异度为96.67%,联合检测明显优于FNAB检测(P<0.05)。结论 FNAB及BRAF^(V600E)突变检测对甲状腺结节良/恶性的诊断效果良好,且联合检测具有更高的敏感度及特异度,可以有效避免误诊及过度治疗。

无血清条件对诱导转染pEGFP-C1/Akt的骨髓间充质干细胞凋亡的影响

目的探讨无血清条件对诱导pEGFP-C1/Akt转染的骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡的影响。方法实验分实验组(pEGFP-C1/Akt转染MSCs)、抑制组(pEGFP-C1/Akt转染MSCs+PI3K/Akt特异性抑制剂)和对照组(MSCs)。在无血清培养基条件下,分别在4、12、24和36h共4个时间点利用RT-PCR检测Akt及Caspase-3mRNA表达,Western blot检测Akt蛋白表达,免疫组化检测Caspase-3蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果在无血清培养4、12、24和36h后,实验组的Akt mRNA和蛋白的表达均高于抑制组及对照组(P<0.01),Caspase-3mRNA及蛋白的表达水平和细胞凋亡率则均低于抑制组及对照组(P<0.01);抑制组及对照组间Akt和Caspase-3mRNA及蛋白的表达和凋亡率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论Akt可能通过PI3K/Akt途径抑制其下游底物Caspase-3的表达,从而抑制无血清诱导的MSCs凋亡。

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白与肾脏疾病的关系

雷帕霉素（rapamycin）是一类最早在1975年从土壤细菌中提取出来的物质,起初将其用作抗真菌治疗,随后又发现其有免疫抑制作用而广泛应用于器官移植后的抗排斥反应当中。正是由于雷帕霉素的发现,在1994年研究人员又克隆出了哺乳动物的雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamy-cin，mTOR）——一种丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，而雷帕霉素正是mTOR的特异性抑制剂。

超声引导下FNAC+BRAF^V600E检测对甲状腺乳头状癌患者诊断效能的影响

目的:探讨超声引导下细针穿刺细胞学检查(FNAC)+丝/苏氨酸特异性激酶突变基因V600E(BRAFV600E)检测对甲状腺乳头状癌患者诊断效能的影响。方法:选取2017年1月至2019年6月我院疑似甲状腺乳头状癌患者92例,均行超声引导下FNAC、BRAFV600E检测,以术后病理学诊断为"金标准",分析超声引导下FNAC、BRAFV600E检测单独与联合诊断甲状腺乳头状癌的结果,比较两种检测方法单独与联合诊断甲状腺乳头状癌的敏感度、特异度、准确率。结果:超声引导下FNAC、BRAFV600E检测联合诊断甲状腺乳头状癌敏感度为93.83%(76/81)、准确率为92.39%(85/92),均高于超声引导下FNAC单独诊断79.01%(64/81)、79.35%(73/92),BRAFV600E检测单独诊断80.25%(65/81)、81.52%(75/92)(P<0.05),联合诊断与单一方法诊断特异度比较均无显著差异(P>0.05)。结论:超声引导下FNAC+BRAFV600E检测可显著提高甲状腺乳头状癌诊断敏感度及准确率,具有较高诊断效能。

PC12细胞中OIP5与Raf1相互作用调节p-ERK的表达

OIP5(Opa interacting protein5)是癌睾丸抗原家族成员之一,参与多种癌症。研究显示Raf1能够直接结合OIP5,促进其表达。Raf1为一种丝/苏氨酸蛋白激酶,是Ras/Raf/MEK/ERK信号通路中的关键分子。OIP5能否通过与Raf1作用参与Ras/Raf/MEK/ERK信号通路还未见报道。因此,本研究以PC12细胞为基础,通过细胞转染Raf1和OIP5的siRNA(siRaf1,siOIP5)分别抑制Raf1和OIP5,利用Westernblot技术,验证OIP5与Raf1的作用关系及对磷酸化ERK(p-ERK)表达的影响。结果显示转染siRaf1后,有效抑制Raf1表达的同时,OIP5和p-ERK表达较对照组均显著降低;而转染siOIP5后,不仅抑制了OIP5的表达,也显著降低Raf1和p-ERK的表达。

数字油滴PCR法与ARMS法检测结直肠癌BRAF基因突变中应用价值

目的探讨数字油滴聚合酶链式反应法(ddPCR)与扩增阻碍突变系统法(ARMS)在结直肠癌患者丝/苏氨酸特异性激酶基因(BRAF)V600E突变检测中的应用价值。方法收集2018年4月—2019年7月浙江大学医学院杭州市第一人民医院诊治的162例结直肠癌患者的手术标本,采用ARMS法和ddPCR法检测结直肠癌患者BRAF V600E突变,比较ARMS法和ddPCR法检测阳性率及一致性,分析BRAF V600E突变与结直肠癌患者临床病理特征的关系。结果ARMS法和ddPCR法检测BRAF V600E突变阳性率为8.64%(14/162)和9.26%(15/162)。对ARMS法检测BRAF V600E突变存在歧义的1例进行高通量测序,ddPCR法与高通量测序的结果一致。对应ddPCR法,ARMS法的阳性符合率、阴性符合率和一致性分别为93.33%、99.32%和99.38%。年龄越高、组织学类型低分化、临床分期Ⅲ~Ⅳ期患者BRAF V600E突变分布越高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ddPCR与ARMS均可用于检测结直肠癌的BRAF V600E突变,ddPCR有更高的检测效能。

细针抽吸细胞学联合检测BRAF^(V600E)在甲状腺结节诊断中的应用价值

目的探讨细针抽吸细胞学(FNAC)联合丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(BRAF^(V600E))基因突变检测在甲状腺结节术前诊断中的临床意义。方法回顾性分析温州市中心医院2022年1月至2023年1月经手术后常规组织病理确诊的126例甲状腺结节术前FNAC及检测BRAF^(V600E)基因突变结果,并与单用FNAC检查所获得的结果进行比较分析。结果FNAC联合检测BRAF^(V600E)基因突变与单用FNAC对甲状腺结节检测特异度比较差异无统计学意义(P>0.05);FNAC联合检测BRAF^(V600E)基因突变对甲状腺结节检测敏感度[97.6%(82/84)]高于单用FNAC[85.5%(65/76)],差异有统计学意义(χ^(2)=7.82,P<0.05);FNAC联合检测BRAF^(V600E)基因突变对甲状腺结节检测总准确率[96.8%(122/126)]高于单用FNAC[85.0%(96/113)],差异有统计学意义(χ^(2)=10.47,P<0.05)。结论FNAC联合检测BRAF^(V600E)基因突变在术前甲状腺结节诊断价值良好,可提高诊断敏感性和准确性,值得临床进一步推广。

SRPK1基因对膀胱癌细胞生物学行为的影响及机制研究

目的观察丝氨酸/精氨酸蛋白特异性激酶1(SRPK1)对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并进一步探究其分子机制。方法利用Oncomine癌症数据库分析SRPK1基因在膀胱癌组织及正常膀胱组织中的表达;构建SRPK1特异的慢病毒干扰质粒(sh1和sh2)和阴性对照质粒(NC),包装慢病毒颗粒,分别感染T24细胞和5637细胞。设空白对照组(T24和5637)、阴性对照组(T24/NC和5637/NC)、干扰组1(T24/sh1和5637/sh1)和干扰组2(T24/sh2和5637/sh2);采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测各组细胞中SRPK1 mRNA和蛋白水平的表达变化;采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力的变化;采用Transwell细胞迁移和侵袭实验检测各组细胞迁移和侵袭能力的变化;采用Western blot检测各组细胞上皮间质转化(EMT)及AKT通路相关蛋白表达变化。结果Oncomine癌症数据库中SRPK1 mRNA在膀胱癌组织中的表达明显高于正常膀胱组织(P<0.001)。通过qRT-PCR和Western blot检测结果显示病毒感染后的细胞SPRK1在mRNA和蛋白水平均明显下调;在慢病毒感染后的T24细胞中,第3~5天干扰组的吸光度值均低于阴性对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);在慢病毒感染后的5637细胞中,第2~5天干扰组的吸光度值均低于阴性对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);Transwell细胞迁移和侵袭实验显示:与阴性对照组比较,干扰组的迁移和侵袭的膀胱癌细胞数目均明显减少,差异均有统计学意义(均P<0.05);Western blot结果显示,与阴性对照组比较,干扰组的E-cadherin表达量增加,而N-cadherin和vimentin的表达明显减少,同时AKT通路蛋白p-AKT及p-GSK3β明显下调,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论SRPK1基因在膀胱癌组织中高表达,下调SRPK1的表达可抑制膀胱癌细胞的增殖,并降低膀胱癌细胞的侵袭和迁移能力。

基于PI3K/Akt通路观察五子衍宗方对老龄大鼠精原干细胞增殖的影响

目的：探讨五子衍宗方（Wuzi Yanzong Fang,WYF）基于磷酯酰肌醇3-激酶（PI3K）/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（Akt）信号通路对老龄大鼠精原干细胞增殖的作用及其机制研究。方法：以自然衰老大鼠为研究对象,将40只18月龄SPF级SD雄性大鼠随机分为老龄模型组,WYF低、中、高剂量组,每组10只,另以10只2月龄大鼠作为青年组。WYF低、中、高剂量组分别灌胃给药0.4,0.8,1.6 g·kg^-1,青年组、老龄模型组分别灌胃给予生理盐水,每周停药2 d,持续给药4个月。末次给药后麻醉处死大鼠,快速取出睾丸组织。免疫荧光法检测Sertoli细胞数量,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）,前髓细胞锌指蛋白（PLZF）,干细胞因子（SCF）和骨形态蛋白4（BMP4）mRNA表达水平,免疫荧光法检测精原干细胞数量及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）和免疫荧光法检测磷酯酰肌醇3-激酶（PI3K）和磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（p-Akt）的表达与定位。结果：与青年组比较,老龄模型组Sertoli细胞数量未见明显差异,而GDNF,PLZF,SCF和BMP4 mRNA表达水平显著降低,精原干细胞数量减少,PCNA表达下降,PI3K,p-Akt蛋白表达降低（P〈0.01）;与老龄模型组比较,WYF各剂量组GDNF,PLZF,SCF和BMP4 mRNA表达水平显著升高,精原干细胞数量增多,PCNA表达上调,PI3K,p-Akt表达明显增多（P〈0.05,P〈0.01）。结论：WYF能够明显促进老龄大鼠精原干细胞的增殖,其作用机制可能与调节睾丸内PI3K/Akt信号通路有关。