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TSEG-2基因在小鼠睾丸扭转复位模型中的表达特征
被引量:
2
1
作者
胡涛
童强松
+4 位作者
曾甫清
陈晓春
顾朝辉
郑丽端
杜志勇
《中华小儿外科杂志》
CSCD
北大核心
2010年第5期377-381,共5页
目的 探讨睾丸特异表达基因2(testis specific expressed gene 2,TSEG-2)在小鼠睾丸扭转复位模型中的表达特征.方法 昆明小鼠36只,随机分组为对照组(6只)、假手术组(6只)、单侧睾丸扭转复位实验组(24只).实验组分为2组,每组12只...
目的 探讨睾丸特异表达基因2(testis specific expressed gene 2,TSEG-2)在小鼠睾丸扭转复位模型中的表达特征.方法 昆明小鼠36只,随机分组为对照组(6只)、假手术组(6只)、单侧睾丸扭转复位实验组(24只).实验组分为2组,每组12只,左侧睾丸扭转720°维持2 h,分别于复位后1、7 d取扭转侧睾丸.采用HE染色、原位末端标记技术(TUNEL)观察睾丸组织形态改变;黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活性;原位杂交法观测TSEG-2在睾丸生精细胞内的表达定位;实时定量PCR法检测TSEG-2基因在睾丸组织中的表达水平.结果 对照组和假手术组生精上皮排列规则,扭转复位后1、7 d的睾丸组织内生精上皮结构松散,出现生精细胞凋亡,Johnsen's评分分别降低23.4%、64.1%(P〈0.01),SOD活性降低11.6%、22.2%(P〈0.05),MDA活性升高69.6%、93.2%(P〈0.01).TSEG-2基因表达定位于小鼠睾丸生精小管的精原细胞和精母细胞.与对照组比较,扭转复位1、7 d后睾丸组织内TSEG-2表达水平分别上调2.2倍、6.6倍(P〈0.01).结论 成功建立小鼠睾丸扭转复位模型,TSEG-2表达上调可能与抗氧化酶活性下降、生精细胞凋亡有关.
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关键词
睾丸
扭转
睾丸特异表达基因2
动物模型
原文传递
TSEG-2基因真核表达载体的构建及其在细胞内的表达
被引量:
2
2
作者
胡涛
王智宇
+4 位作者
童强松
曾甫清
陈晓春
顾朝辉
郑丽端
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期380-382,共3页
目的构建睾丸特异表达基因2(TSEG-2)的真核表达载体,探讨TSEG-2存细胞中的表达及其生物学功能。方法以小鼠睾丸组织cDNA为模版,设计携带HindⅢ和BamHI酶切位点的引物序列,聚合酶链反应(PCR)扩增基因片段,克隆至携带增强型绿色...
目的构建睾丸特异表达基因2(TSEG-2)的真核表达载体,探讨TSEG-2存细胞中的表达及其生物学功能。方法以小鼠睾丸组织cDNA为模版,设计携带HindⅢ和BamHI酶切位点的引物序列,聚合酶链反应(PCR)扩增基因片段,克隆至携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的真核表达载体pEGFP—N1;在阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)的介导下,重组质粒转染体外培养的精母细胞株GC-2spd48h后,荧光显微镜下观察TSEG-2基因在细胞内的表达定位,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长活性,AO/EB荧光染色法、Hoechst33258荧光染色法、AnnexinV—FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR测定Fas、bcl-2、bax表达水平。结果成功构建了TSEG-2与EGFP的融合表达载体pEGFP—TSEG2,转染GC-2spd细胞后可见胞质内绿色荧光蛋白表达。转染pEGFP—TSEG248h后,GC-2spd细胞生长抑制39.2%(P〈0.05),出现细胞凋亡形态学改变,凋亡率为28.3%(P〈0.05);GC-2spd细胞中Fas和bcl-2的表达分别下调17.9%、64.8%(P〈0.05),而bax的表达上调25.1%(P〈0.05)。结论成功构建TSEG-2基因的真核表达载体,能在精母细胞株中表达并促进细胞凋亡。
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关键词
睾丸特异表达基因2
真核
表达
载体
基因
表达
脱噬作用
原文传递
题名
TSEG-2基因在小鼠睾丸扭转复位模型中的表达特征
被引量:
2
1
作者
胡涛
童强松
曾甫清
陈晓春
顾朝辉
郑丽端
杜志勇
机构
华中科技大学同济医学院附属协和医院小儿外科
出处
《中华小儿外科杂志》
CSCD
北大核心
2010年第5期377-381,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:30200284,30600278,30772359)、教育部新世纪优秀人才支持计划(编号:NCET-06-0641)、教育部留学回国人员科研启动基金(编号:2008889)
文摘
目的 探讨睾丸特异表达基因2(testis specific expressed gene 2,TSEG-2)在小鼠睾丸扭转复位模型中的表达特征.方法 昆明小鼠36只,随机分组为对照组(6只)、假手术组(6只)、单侧睾丸扭转复位实验组(24只).实验组分为2组,每组12只,左侧睾丸扭转720°维持2 h,分别于复位后1、7 d取扭转侧睾丸.采用HE染色、原位末端标记技术(TUNEL)观察睾丸组织形态改变;黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活性;原位杂交法观测TSEG-2在睾丸生精细胞内的表达定位;实时定量PCR法检测TSEG-2基因在睾丸组织中的表达水平.结果 对照组和假手术组生精上皮排列规则,扭转复位后1、7 d的睾丸组织内生精上皮结构松散,出现生精细胞凋亡,Johnsen's评分分别降低23.4%、64.1%(P〈0.01),SOD活性降低11.6%、22.2%(P〈0.05),MDA活性升高69.6%、93.2%(P〈0.01).TSEG-2基因表达定位于小鼠睾丸生精小管的精原细胞和精母细胞.与对照组比较,扭转复位1、7 d后睾丸组织内TSEG-2表达水平分别上调2.2倍、6.6倍(P〈0.01).结论 成功建立小鼠睾丸扭转复位模型,TSEG-2表达上调可能与抗氧化酶活性下降、生精细胞凋亡有关.
关键词
睾丸
扭转
睾丸特异表达基因2
动物模型
Keywords
Testcular torsion
Testis specific expressed gene
2
Models,animal
分类号
R697 [医药卫生—泌尿科学]
原文传递
题名
TSEG-2基因真核表达载体的构建及其在细胞内的表达
被引量:
2
2
作者
胡涛
王智宇
童强松
曾甫清
陈晓春
顾朝辉
郑丽端
机构
华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科
华中科技大学同济医学院附属协和医院小儿外科
华中科技大学同济医学院附属协和医院病理科
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期380-382,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30200284,30600278,30772359)
教育部新世纪优秀人才支持计划资助项目(NCET-06-0641)
教育部留学回国人员科研启动基金资助项目(2008889)
文摘
目的构建睾丸特异表达基因2(TSEG-2)的真核表达载体,探讨TSEG-2存细胞中的表达及其生物学功能。方法以小鼠睾丸组织cDNA为模版,设计携带HindⅢ和BamHI酶切位点的引物序列,聚合酶链反应(PCR)扩增基因片段,克隆至携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的真核表达载体pEGFP—N1;在阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)的介导下,重组质粒转染体外培养的精母细胞株GC-2spd48h后,荧光显微镜下观察TSEG-2基因在细胞内的表达定位,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长活性,AO/EB荧光染色法、Hoechst33258荧光染色法、AnnexinV—FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR测定Fas、bcl-2、bax表达水平。结果成功构建了TSEG-2与EGFP的融合表达载体pEGFP—TSEG2,转染GC-2spd细胞后可见胞质内绿色荧光蛋白表达。转染pEGFP—TSEG248h后,GC-2spd细胞生长抑制39.2%(P〈0.05),出现细胞凋亡形态学改变,凋亡率为28.3%(P〈0.05);GC-2spd细胞中Fas和bcl-2的表达分别下调17.9%、64.8%(P〈0.05),而bax的表达上调25.1%(P〈0.05)。结论成功构建TSEG-2基因的真核表达载体,能在精母细胞株中表达并促进细胞凋亡。
关键词
睾丸特异表达基因2
真核
表达
载体
基因
表达
脱噬作用
Keywords
Testis specific expressed gene
2
Eukryotic expression vector
Gene expression
Apoptosis
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TSEG-2基因在小鼠睾丸扭转复位模型中的表达特征
胡涛
童强松
曾甫清
陈晓春
顾朝辉
郑丽端
杜志勇
《中华小儿外科杂志》
CSCD
北大核心
2010
2
原文传递
2
TSEG-2基因真核表达载体的构建及其在细胞内的表达
胡涛
王智宇
童强松
曾甫清
陈晓春
顾朝辉
郑丽端
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
原文传递
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