精原干细胞和睾丸组织的同种异体移植

背景:精原干细胞作为精子发生过程的基础和前提,其自我更新和分化途径目前仍不完全清楚。目的:观察非免疫缺陷动物新生Wistar大鼠的精原干细胞和睾丸组织移植于去势成年Wistar大鼠后的成活及生长发育情况。设计、时间及地点:组织细胞形态学水平的随机动物对照实验,于2007-04/08在广西医科大学实验动物中心外科实验室完成。材料:选用健康新生7～9d雄性Wistar大鼠为供体,受体为经过严格检疫合格的8～12周的成年雄性Wistar大鼠,体质量180～220g。方法:取新生雄性大鼠睾丸,采用两步法组合酶顺序消化制备大鼠精原干细胞悬液,以Percoll不连续密度梯度离心法初步纯化精原干细胞。取10只成年雄性大鼠,切除双侧睾丸形成去势大鼠,按随机数字表法分为2组,每组5只。精原干细胞悬液移植组将制取好的1mL精原干细胞悬液在5min内注射至受体背部皮下。睾丸组织块移植组将制备好的已剖开的睾丸组织植入受体背部皮下,每个受体移植2个睾丸4块睾丸组织。主要观察指标:移植物的生长发育情况,移植8周末移植物的组织学特点及C-kit免疫组化定性分析结果。结果:精原干细胞悬液移植后,移植物未见成活生长。睾丸组织块移植后移植物部分成活,移植8周末组织学检查可见特征性的精曲小管和细胞结构,可见精子细胞,部分生精小管退化;睾丸间质中可见淋巴细胞浸润;免疫组化鉴定可见睾丸组织内C-kit阳性细胞表达。结论:同种异体异位移植于非免疫缺陷鼠中,新生睾丸组织块可以成活并能形成精子细胞,而精原干细胞悬液移植后未见移植物生长。