猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗免疫程序的研究

应用猪瘟（ＨＣ）犊睾细胞苗７５０个兔感染量／头接种空怀期母猪，以ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ监测其亲代仔猪母源抗体效价。结果，１０日龄时，ＯＤ值＞０．３的占６３％，ＯＤ值由≥０．３～＞０．２的占３７％；２０日龄时，ＯＤ值＞０．３的占２８％，ＯＤ值由≥０．３～＞０．２的占５５％；３０日龄时，ＯＤ值＞０．３的仅占７％，ＯＤ值由≥０．３～＞０．２的占４１％；４０日龄时，ＯＤ值＞０．３的为零，ＯＤ值由≥０．３～＞０．２的为１７％。说明母源抗体消失很快。仔猪于３０日龄接种ＨＣ犊睾细胞苗１５００个兔感染量／头，以ＰＰＡ－ＡＬＩＳＡ监测血清抗体效价。免疫后９个月，ＯＤ值达０．４５者为１００％；免疫后１０个月，ＯＤ值＞０．３４者为７６％，ＯＤ值≥０．３～＞０．２者为２４％。证明３０日龄仔猪接种１５００个兔感染量／头，可使猪至出栏（１０个月）仍保持保护性抗体。对现地５７万余头３０～３５日龄仔猪于阉害割同时接种疫苗１５００个兔感染量／头．被接种仔猪于全年内无ＨＣ和非典型ＨＣ发生。免疫接种后８个月（出栏时），随机检测８０头份血清，其ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ抗体效价，ＯＤ值＞０．３者为９８．７５％，ＯＤ值≥０．３～＞０．２者为１．２５％，与实验室?

猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗免疫程序研究

作者用猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗(以下简称猪瘟犊睾细胞苗)750个对兔感染量(以下简称感染量),在配种前40天至配种后45天内免疫母猪,所产亲代仔猪在20～28日龄时猪瘟间接血凝滴度(IHA)4~×(++)占10/32、8~×占11/32、16~×占10/32、32~×占1/32;41～43日龄时,IHA滴度4~×占11/43、8~×占21/43、16~×占9/43、32~×占2/43;在55～58日龄时,IHA滴度4~×占9/33、8~×占17/33、16~×占7/33。用600、760、900、1500个感染量分别给20～28日龄、41～43日龄、55～58日龄仔猪实施免疫,免疫后6～8个月时,监测其抗体水平,结果表明:IHA滴度16~×以上者达100％。750个感染量免疫20～28日龄仔猪组,注苗后持续6个月,IHA滴度32~×以上者达100％;8个月时32~×以上者达87.5％,16~×占12.5％。用猪瘟石门系强毒攻毒,获100％保护。试验首次发现:用猪瘟犊睾细胞苗免疫母猪所产仔猪母源抗体明显低于猪瘟乳兔苗免疫母猪所产仔猪的母源抗体。对猪瘟犊睾细胞苗免疫母猪所产亲代仔猪在20～28日龄用该苗一头剂(750个感染量)进行免疫,8个月之内能抵抗猪瘟感染或强毒攻击,突破了以往认为仔猪用猪瘟乳兔苗免疫应在45日龄以后的常规,为猪瘟犊睾细胞苗的免疫提供了新的免疫程序。

猪瘟牛睾丸细胞苗生产工艺改进试验

在猪瘟牛睾丸细胞苗常规培养中,延长收获间隔时间,由原来的4 d收一次改为8 d收一次;增加营养液的装量,每10 000 mL瓶装量由1 000 mL改为3 000 mL;改变营养液的配方。结果表明试验组收获6次、对照组收获8次,毒价均达到5×10-4 mL/只兔;易感猪30头份安检1次通过。用改进后工艺生产的24批疫苗完全符合《规程》要求,说明新工艺完全适用猪瘟牛睾丸细胞苗的生产。

猪瘟细胞苗与犊牛血清中BVD/MD抗体的检测

猪瘟兔化牛睾丸细胞苗在生产中,常出现疫苗毒价不达标的问题。其主要的原因是在生产中使用了含BVD/MD抗体的犊牛血清。试验过程中,采用合格的疫苗与标准的BVD/MD抗血清中和,然后再加入标准BVD/MDV,接种BT细胞,结果出现CPE。证实了疫苗中的HCV与BVD/MD抗体发生了结合。故生产前对血清中BVD/MD抗体的检测是不可忽视的。