靶向瞬时受体电位香草酸亚型1离子通道的Nplus-RhTx多肽抑制剂理性设计及功能验证

目的:获得靶向瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)通道的多肽抑制剂。方法:基于已有的靶向TRPV1通道的多肽激动剂红头蜈蚣毒素(RhTx)进行理性设计,在其氨基末端增加带正电荷的氨基酸,并在细胞上使用膜片钳电生理验证设计的多肽对TRPV1通道的抑制作用。结果:理性设计了8条Nplus-RhTx多肽,在膜片钳电生理记录中发现其中4条可以抑制TRPV1的辣椒素激活,4条Nplus-RhTx多肽的半数有效抑制浓度分别为(188.3±4.7)、(193.6±18.0)、(282.8±11.9)和(299.5±6.4)µmol/L。结论:通过对RhTx多肽的氨基端进行理性设计改变其性质,可获得靶向TRPV1的多肽抑制剂。

ST段抬高型心肌梗死病人瞬时受体电位通道1、肌肉生长抑制素表达与心功能、预后的关系

目的:探讨ST段抬高型心肌梗死(STEMI)病人血清中瞬时受体电位通道1(TRPC1)、肌肉生长抑制素(MSTN)表达与心功能、预后的关系。方法:选取2019年3月—2021年3月安阳市人民医院收治的急性STEMI病人110例作为研究组,另选取同期体检健康者90名为对照组。收集研究对象临床资料,检测研究对象血清TRPC1、MSTN水平;采用Killip分级方法评估病人的心功能;采用Spearman相关性分析法分析TRPC1、MSTN与STEMI病人Killip分级的相关性。根据预后是否发生主要不良心脏事件(MACE)将STEMI病人分为预后良好组(83例)和预后不良组(27例);受试者工作特征(ROC)曲线分析血清TRPC1、MSTN水平对STEMI病人预后的预测价值。结果:STEMI病人总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、N末端B型钠尿肽前体(NT-proBNP)及血清TRPC1、MSTN水平高于对照组(P<0.001),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于对照组(P<0.001)。不同Killip分级的STEMI病人血清TRPC1、MSTN水平比较差异有统计学意义(P<0.001),Killip分级越高,血清TRPC1、MSTN水平越高。STEMI病人血清TRPC1、MSTN水平与Killip分级呈正相关(P<0.05);预后不良组血清TRPC1、MSTN水平明显高于预后良好组(P<0.001);血清TRPC1、MSTN单独及联合预测STEMI病人预后的曲线下面积(AUC)分别为0.763,0.891,0.942,敏感度分别为77.27%、86.36%和95.45%,特异度分别为74.36%、75.64%和88.46%;二者联合预测优于TRPC1、MSTN各自单独预测(P<0.05)。结论:STEMI病人血清TRPC1、MSTN水平明显升高,与病人心功能密切相关,且二者联合检测有利于早期评估病人MACE发生情况。

瞬时受体电位通道蛋白A1和V1在正常小鼠耳蜗中的定位表达

目的研究瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1)和V1(TRPV1)在正常小鼠耳蜗中的定位与表达。方法选择12只健康成年BALB/c小鼠,应用免疫荧光染色方法和蛋白质印迹技术检测TRPA1和TRPV1在耳蜗中的定位与表达,同时结合电生理指标听脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测试小鼠的听力。结果 TRPA1和TRPV1在小鼠耳蜗螺旋器的内、外毛细胞、螺旋神经节细胞和血管纹边缘细胞等都有表达,且主要定位于细胞膜;蛋白质印迹检测结果亦显示小鼠耳蜗中有TRPA1和TRPV1的表达。结论 TRPA1和TRPV1在正常BALB/c小鼠耳蜗的多种细胞中均有表达,这为深入研究二者在内耳听觉生理和病理生理中的作用奠定基础。

精神分裂症患者血清成纤维细胞生长因子2、瞬时受体电位通道1水平与精神症状的相关性

目的探讨成纤维细胞生长因子2(FGF2)、瞬时受体电位通道1(TRPC1)在精神分裂症患者中的表达及与精神症状的相关性。方法选取2019年7月至2022年6月医院收治的200例精神分裂症患者和进行健康体检的正常人群200例分别设为观察组和对照组。收集一般资料,采用酶联免疫吸附法检测血清中FGF2表达水平;采用WD-3000全自动血液分析仪和免疫比色法检测TRPC1水平;采用阳性与阴性症状量表(PANSS)评价精神症状;Pearson法分析FGF2、TRPC1与精神症状指标的相关性。利用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清FGF2、TRPC1水平对精神分裂症的诊断价值。结果观察组患者血清中TRPC1表达水平均低于对照组,FGF2表达水平高于对照组(P<0.05);观察组患者总PANSS评分、阳性评分、阴性评分、一般症状评分均高于对照组(P<0.05);精神分裂症患者血清FGF2表达与总PANSS评分、阳性评分、阴性评分、一般症状评分均呈正相关,TRPC1表达与总PANSS评分、阳性评分、阴性评分、一般症状评分均呈负相关(P<0.05)。血清FGF2、TRPC1水平预测精神分裂症患者的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.928、0.911,对应的敏感度分别为84.00%、89.50%,特异度分别为89.00%、86.50%;两者联合检测精神分裂症患者的AUC为0.969,敏感度和特异度分别为94.50%、90.00%。结论精神分裂症患者血清FGF2水平明显升高,TRPC1水平明显降低,血清FGF2、TRPC1水平与患者的精神症状密切相关。

宫颈癌患者血清WNT1诱导信号通路蛋白1、瞬时受体电位阳离子通道亚家族M成员7水平及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清WNT1诱导信号通路蛋白1(WISP1)、瞬时受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)水平及临床意义。方法选取150例宫颈癌患者和164例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者。采用酶联免疫吸附法检测两组患者血清WISP1水平,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测两组患者血清TRPM7 mRNA水平。宫颈癌发生的影响因素采用多因素Logistic回归分析。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估血清TRPM7 mRNA、WISP1单独及联合检测对宫颈癌的诊断价值。结果宫颈癌患者血清TRPM7 mRNA、WISP1水平均明显高于CIN患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。宫颈癌患者中文化程度为初中及以下、孕次≥3次、产次≥2次、合并高危人乳头瘤病毒(HPV)感染的比例均明显高于CIN患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,TRPM7 mRNA水平升高、WISP1水平升高、合并高危HPV感染均是宫颈癌发生的独立危险因素(P﹤0.01)。ROC曲线显示,TRPM7 mRNA、WISP1联合检测诊断宫颈癌的AUC为0.944(95%CI:0.921~0.966),高于二者单独检测(P﹤0.05)。结论宫颈癌患者血清TRPM7 mRNA、WISP1水平较高,二者联合检测可提高对宫颈癌的诊断价值。

基于胸腺基质淋巴细胞生成素/蛋白酶激活受体2/瞬时电位受体香草酸受体1/活化T细胞的核因子信号通路探讨麻荆止咳颗粒治疗咳嗽变异性哮喘的作用机制

目的:通过麻荆止咳颗粒调控胸腺基质淋巴细胞生成素(Thymic Stromal Lymphopoietin,TSLP)/蛋白酶激活受体2(Proteinase Activated Receptor-2,PAR2)/瞬时电位感受器香草酸受体1(Transient Receptor Potential Vanilloid 1,TRPV1)/活化T细胞核因子(Nuclear Factor of Activated T cells,NFAT)信号通路的动物实验,探讨其治疗咳嗽变异性哮喘(Cough Variant Asthma,CVA)的疗效机制。方法:将豚鼠随机分为空白对照组、模型组、中药组和地塞米松组,构建CVA豚鼠模型,药物干预10天,采用辣椒素激发各组豚鼠,观察咳嗽情况;苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色法观察各组肺组织病理学变化;酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Method,ELISA)法检测各组血清TSLP含量;免疫组化染色及实时定量聚合酶链反应(quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)法检测肺组织PAR2、TRPV1、NFAT的表达。结果:与模型组对比,中药组和地塞米松组药物干预后咳嗽次数明显减少;血清TSLP含量显著降低;且肺组织病理变化较模型组明显减轻;PAR2、TRPV1和NFAT的蛋白与mRNA表达均下调。结论:麻荆止咳颗粒可通过抑制CVA模型豚鼠TSLP/PAR2/TRPV1/NFAT信号通路表达,降低气道敏感性及改善气道炎症,达到止咳效果。

瞬时受体电位蛋白通道A1在大鼠炎症性膀胱感觉通路中不同部位的表达变化

目的瞬时受体电位蛋白通道A1(TRPA1)参与机械性感觉、痛觉的传导以及炎性反应,我们制作大鼠的膀胱炎症模型,检测在膀胱传入通路中不同部位TRPA1的表达情况。方法采用大鼠腹腔内注射环磷酰胺制作膀胱炎症模型,正常大鼠作为对照组。采集膀胱黏膜层及脊髓后根神经节,利用实时定量PCR检测TRPA1转录水平的变化。结果大鼠腹腔内注射环磷酰胺2 d后,肉眼及病理检查证实膀胱炎性反应。TRPA1在膀胱黏膜层的表达水平没有明显变化,在脊髓后根神经节中,与对照组相比,炎症组的TRPA1的表达水平明显上调(P<0.05)。结论在膀胱炎症状态下,TRPA1在黏膜层的表达没有明显变化,提示它作为黏膜层的机械敏感性受体参与炎症诱发的排尿改变的可能性较小;TRPA1在脊髓后根神经节中表达上调,感觉神经元表达的TRPA1可能参与膀胱炎性反应,并且与膀胱炎时病理性的排尿方式相关。

瞬时受体电位通道A1在生殖系统炎症和氧化应激中的作用

瞬时受体电位通道A1(TRPA1),又称ANKTMI蛋白,是一种主要通透Ca^(2+)的非选择性阳离子通道,属于瞬时受体电位(TRP)离子通道家族[1]。TRPA1广泛分布于神经细胞和非神经细胞(如皮肤、肾脏、肺、胰腺、睾丸和子宫等多种组织细胞)中[2-3],可感受冷热刺激,可被4-羟基壬烯醛、硫化氢、缓激肽和前列腺素等内源性物质激活,也可被异硫氰酸烯丙酯、肉桂醛、大蒜素以及空气中的刺激物如汽车尾气中的丙烯醛等外源性刺激物激活,其激活可以引起疼痛和炎症等多种生物学效应[4]。

沙库巴曲缬沙坦治疗老年心力衰竭的疗效及对血清炎性因子与瞬时受体电位通道1表达的影响

目的观察沙库巴曲缬沙坦治疗老年心力衰竭的疗效及对血清炎性因子与瞬时受体电位通道1(TRPC1)表达的影响。方法选取2019年6月—2021年6月佛山市第五人民医院收治的老年心力衰竭患者98例。采用随机数字表法分为观察组(n=49)和对照组(n=49)。对照组患者采用常规抗心力衰竭治疗,观察组在对照组的基础上联合沙库巴曲缬沙坦治疗,2组患者均治疗6个月。比较2组患者临床疗效,治疗前后心功能、血清炎性因子、TRPC1表达及不良反应。结果观察组患者治疗总有效率为91.84%,高于对照组的75.51%(χ^(2)=4.780,P=0.025)。治疗6个月后,2组患者的左室射血分数(LVEF)水平高于治疗前,左室舒张终末内径(LVEDD)、氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平低于治疗前,且观察组高/低于对照组(P<0.01);2组患者的血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平及TRPC1表达均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.01)。2组均无严重不良反应。结论沙库巴曲缬沙坦治疗老年心力衰竭的疗效显著,能有效改善患者心功能,抑制炎性因子及TRPC1表达水平,且安全性较高,值得推广应用。

瞬时受体电位通道锚蛋白1与疼痛关系研究进展

当前,疼痛发病率在世界范围内呈上升趋势,严重影响患者的生活质量.临床上镇痛药种类较多,常用的有阿片类、大麻素类、非甾体抗炎药、局麻药、抗癫痫药、抗抑郁药以及N-甲基-D-天冬氨酸受体阻滞剂等,但单一用药往往不能达到令人满意的效果,如最常用的阿片类只在30%患者中有效[1].镇痛药的副作用也较常见,如阿片类成瘾性和非甾体抗炎药肝肾毒性等.所以,对于复杂的慢性炎症性疼痛和神经病理性疼痛,具有不同作用机制的镇痛药联合应用逐渐成为临床医师的共识[2].因此寻找具有新颖药理机制且副作用小的镇痛药物有望完善疼痛的药物治疗方案,是众多学者和制药企业的研究热点.瞬时受体电位通道锚蛋白1(transient receptor potential ankyrin 1,TRPA1)是瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道家族的一员,在初级感觉神经元末梢高表达,疼痛信号最上游介导伤害感受,临床前和临床研究中发现,阻断TRPA1能够有效缓解或终止慢性炎症性疼痛和神经病理性疼痛,且耐受性良好[3-4].近年TRPA1小分子抑制剂开发非常迅速,TRPA1阻滞剂有望成为从起点处阻断疼痛信号的新型镇痛药.

老年心力衰竭患者血清瞬时受体电位通道1水平与心功能关系的研究

目的:探讨老年心力衰竭(HF)患者血清瞬时受体电位通道1(TRPC1)水平与心功能的关系。方法:选择2022年1月至2023年3月就诊于佛山市第五人民医院的50例老年HF患者设为研究组,将50例老年健康体检者作为对照组,检测血清N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、TRPC1水平与心功能指标,对比两组和不同心功能老年HF患者TRPC1、NT-proBNP水平及心功能指标的差异,分析老年HF患者TRPC1水平与NT-proBNP水平及心功能指标的相关性。结果:研究组TRPC1、NT-proBNP、左室舒张末期内径(LVEDD)检测值均高于对照组,左心室射血分数(LVEF)检测值低于对照组(P均<0.05);随着心功能分级增高,TRPC1、LVEDD、NT-proBNP检测值逐渐增高,LVEF检测值逐渐降低(P均<0.05);老年HF患者TRPC1水平与LVEF检测值呈负相关(P<0.05),与LVEDD、NT-proBNP检测值呈正相关(P均<0.05)。结论:老年HF患者血清TRPC1水平异常增高,其水平升高与心功能密切相关。

TRPV1和TRPA1通道在心血管疾病中的作用

瞬时受体电位(TRP)通道为机体重要的非选择性阳离子通道,瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)属于TRP通道香草酸受体亚型家族成员,瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)属于TRP通道超家族成员。TRPV1和TRPA1通道可调节血管内皮细胞和心肌细胞功能,其异常表达及功能改变与心血管疾病的发生发展关系密切。TRPV1通道参与心肌梗死后心脏保护和血压调节。TRPA1通道参与调节血流量、血管生成和心肌细胞凋亡。TRPV1和TRPA1通道有望成为心血管疾病的治疗靶点。

瞬时受体电位锚蛋白1离子通道与咳嗽关系的研究概述

瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)离子通道是温度感受器,在人体内低于17℃可被激活,但其激活阈值与物种相关。异硫氰酸烯丙酯、肉桂醛、香烟浓集物等激动剂可以通过调节TRPA1离子通道进而引发咳嗽,并且G蛋白偶联受体在其激活过程中起着重要作用。辛温类中药方剂应用于冷过敏咳嗽疗效确切,推测其治疗机制可能是通过抑制TRPA1通道开放实现的。目前针对咳嗽的TRPA1拮抗剂主要是HC-030031和GRC-17536,辛温类中药作为止咳药的开发或可一定程度弥补西医治疗的不足,但仍需深入研究。

基于TRPA1离子通道蛋白的支气管哮喘病理机制及中医药干预现代研究进展

哮喘是一种反复发作的气道阻塞和喘息为特征的气道慢性炎症性疾病,瞬时受体电位锚蛋白1(Transient Receptor Potential Al,TRPA1)离子通道存在于多种组织细胞中,参与调节气道功能和炎症。以往对于TRPA1的研究更多的是在疼痛领域,尚未对相关调控离子蛋白通道表达治疗支气管哮喘的病理机制及中医药治疗进展做系统阐述。查阅国内外相关文献资料发现,在哮喘发生发展过程中,TRPA1离子通道蛋白参与气道炎症、气道高反应等病理过程。因此调控TRPA1离子蛋白通道的表达有利于治疗支气管哮喘。目前西医的治疗手段主要以吸入糖皮质激素与支气管扩张剂联合治疗为主,但部分患者不能达到完全控制,中医药在治疗哮喘方面具有靶点多、作用广、疗效优等特点,具有祛痰平喘、宣肺下气的中药及复方可以通过抗炎等作用有效调控TRPA1在体内的表达。文章总结TRPA1离子通道蛋白及其与支气管哮喘的关系,并就近年来中医药调控TRPA1的表达治疗支气管哮喘的研究进展进行综述,以期为基于TRPA1探讨支气管哮喘新的病理机制奠定实验室基础,为支气管哮喘防治及相关中药新药研发提供新的作用靶点与研究方向。

瞬时受体电位通道蛋白6(TRPC6)在SGC-7901细胞增殖中的作用

目的探讨瞬时受体电位通道蛋白6(TRPC6)与SGC-7901细胞增殖的关系。方法体外培养SGC-7901细胞,以是否加入TGF-β_1分为对照组和实验组。根据实验组是否加入SKF96365抑制剂分为TGF-β_1和TGF-β_1+SKF96365组。免疫荧光染色观察TRPC6在对照和TGF-β_1组的表达。Western blot方法检测TRPC6和增殖指标在对照组、TGF-β_1组和TGF-β_1+SKF96365组中的变化。结果与对照组相比,TRPC6蛋白在TGF-β_1组中表达升高(P<0.05)。抑制TRPC6蛋白表达,增殖指标在TGF-β_1+SKF96365组表达明显降低(P<0.01)。结论抑制TRPC6蛋白表达可降低SGC-7901细胞增殖能力。

瞬时受体电位锚蛋白1通道调节慢性鼻窦炎上皮细胞自噬及细胞间黏附分子表达的作用探究

目的 探究瞬时受体电位锚蛋白1(transient receptor potential ankyrin1,TRPA1)对慢性鼻窦炎(CRS)上皮细胞自噬与细胞间黏附分子(intercellular adhesion moleclar-1,ICAM-1)表达的影响。方法 通过免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR及Western blot检测TRPA1在对照组、慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(chronic nasal-sinusitis without nasal polyps,CRSsNP)及慢性鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP)患者鼻黏膜组织中的表达水平,并采用免疫组织化学染色和Western blot观察各组患者鼻黏膜组织内自噬水平;分离培养鼻黏膜上皮细胞,利用细胞角蛋白AE1进行免疫荧光染色鉴定上皮细胞;将鼻黏膜上皮细胞随机分为对照组、脂多糖(LPS)组、LPS+TRPA1抑制剂组,实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞TRPA1在mRNA和蛋白上的表达水平,以自噬双标腺病毒mRFP-GFP-LC3感染细胞并通过荧光显微镜观察各组细胞自噬情况,并使用透射电镜观测各组细胞自噬小体形成,实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞ICAM-1在mRNA和蛋白上的表达水平。结果 相较于对照组,CRSsNP与CRSwNP患者鼻黏膜上TRPA1平均光密度值升高,其mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均上调(P<0.05),且LC3-Ⅱ平均光密度值升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,Beclin-1蛋白相对表达量上调而p62蛋白相对表达量下调(P<0.05),组织内自噬水平升高。成功分离到生长密集、形状为梭形或多边形以及AE1呈阳性表达的鼻黏膜上皮细胞;与LPS组比较,经过LPS与TRPA1抑制剂共处理的鼻黏膜上皮细胞TRPA1 mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均下调(P<0.05),自噬溶酶体红色荧光减弱,自噬小体也明显减少,同时,ICAM-1mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均下调(P<0.05)。结论CRS中TRPA1表达异常增加,自噬水平也升高,靶向抑制TRPA1能够抑制CRS上皮细胞自噬以及ICAM-1表达的升高。

瞬时受体电位A1/V1通道联动在慢性咳嗽中的作用机制探讨

咳嗽临床常见,特别是胸部影像检查无明显异常的慢性咳嗽,在我国专科门诊中,慢性咳嗽患者约占三分之一以上^([1]),全球患病率约为9.6%^([2])。其病因繁多,诊疗程序较复杂,临床疗效欠佳,反复发作的咳嗽给患者的工作、生活甚至心理上带来严重困扰,引起了国内外的广泛关注。

基于药效团和分子对接探究诃子制草乌通过瞬时受体电位香草酸1介导的减毒机制

目的:本研究利用药效团、分子对接及实时反转录PCR(RT-PCR)方法探究诃子制草乌通过瞬时受体电位香草酸1(TRPV1)介导的减毒机制。方法:采用Discovery Studio 4.0软件构建基于TRPV1激动剂分子共同特征的TRPV1激活药效团,虚拟筛选出草乌中的潜在活性成分;对草乌成分及诃子制草乌中引入的诃子成分进行Autodock vina分子对接研究;根据结果选出代表性成分,采用实时反转录PCR验证是否可促进心肌细胞中TRPV1 mRNA表达。结果:药效团共筛选出草乌中包括毒性较大的双酯型生物碱乌头碱、新乌头碱及次乌头碱在内的13个成分,分子对接结果表明这13个成分及诃子制草乌引入的诃子成分均有潜力与TRPV1结合。RT-PCR实验中没食子酸和新乌头碱在浓度≥25μmol/L时,均可明显促进大鼠H9c2心肌细胞中TRPV1 mRNA表达的增加,随着给药浓度的增大表达量增加,新乌头碱促进TRPV1 mRNA表达的作用更强。药效团、分子对接结果表明诃子和草乌中均含有多种具备TRPV1激活潜力的成分。结论:实验证明新乌头碱、没食子酸均可在一定程度上激活TRPV1通道,可作为TRPV1的激动剂。根据结果推测,诃子可能会通过拮抗草乌中的活性成分与TRPV1的结合,从而降低草乌通过TRPV1介导的毒性;也可能是诃子制草乌在引入没食子酸等诃子成分后,可在安全剂量范围内使TRPV1通道快速脱敏从而实现减毒。

大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后纹状体和海马区瞬时受体电位通道蛋白4的表达增加

实验在大鼠大脑中动脉阻塞性脑缺血(middle cerebral arterv occlusion,MCAO)模型上采用Western Blot方法检测脑缺血再灌注不同时程(6h、12h、1d、3d)脑组织中瞬时受体电位通道蛋白4(transient receptor potential channel4,TRPC4)的表达情况,并与正常对照组相比,结果显示,12 h、1 d、3 d组纹状体、海马区域TRPC4含量明显高于正常组(P<0.05)。采用免疫组织化学定位检测,显示TRPC4主要表达在神经元细胞膜上;免疫组化阳性细胞统计分析显示,在不同时程缺血组中纹状体、海马区域TRPC4的表达与正常组相比有所增加,其中纹状体、海马区缺血再灌注1 d、3 d组缺血同侧1RPC4阳性细胞升高显著(P<0.05)。脑缺血再灌注损伤后TRPC4相对含量增加,提示TRPC4可能参与脑缺血引起的急性和迟发性神经元损伤。

吴茱萸汤通过热敏通道瞬时电位锚蛋白-1抑制福尔马林内脏痛模型小鼠的疼痛研究

目的探查吴茱萸汤减轻福尔马林诱导的内脏痛模型小鼠的疼痛作用机制。方法 40只C57BL/6雄性小鼠,随机分为正常组、模型组、吴茱萸汤低剂量组、吴茱萸汤中剂量组和吴茱萸汤高剂量组。吴茱萸汤各剂量组分别灌以吴茱萸汤水煎液[3.12、6.24、12.48 g/(kg·d)],共4天。第4天,吴茱萸汤各剂量组灌胃后2小时,以瞬时感受器电位锚蛋白-1(transient receptor potential ankyrin 1,TRPA1)激动剂10%福尔马林,10 μL/只灌肠,在福尔马林诱导的急性内脏痛模型小鼠上,观察吴茱萸汤干预后的疼痛行为变化和运用免疫组化染色及免疫印迹法检测吴茱萸汤干预后的小鼠结肠组织中TRPA1的表达变化。结果 HE染色显示吴茱萸汤各剂量组干预均可使小鼠结肠中肌层、黏膜层坏死减轻,炎性浸润减少,受损的隐窝修复;行为学实验观察吴茱萸汤高、中、低剂量预处理4天后与模型组对比,小鼠疼痛行为频次明显降低( P <0.05);免疫组化实验,吴茱萸汤高、中、低剂量预处理后,与模型组对比,肌层的TRPA1阳性表达明显下调( P <0.05);蛋白条带密度分析提示,吴茱萸汤高、中剂量预处理后能使小鼠结肠组织中TRPA1表达下调,与模型组差异明显( P <0.05 )。结论热敏通道TRPA1是吴茱萸汤发挥止痛作用,尤其是缓解内脏痛的重要靶点。