瞬时受体电位A1通道在神经病理性疼痛中的研究进展

瞬时受体电位A1(TRPA1)是瞬时受体电位大家族中的一员,主要分布在初级感觉神经元上,如三叉神经节、迷走神经节及背根神经节。神经病理性疼痛最常见的原因是周围神经损伤、糖尿病以及化疗药物所致。神经病理性疼痛过程中产生的大量氧化、硝化应激产物作用于TRPA1,产生急性伤害感受刺激、异常感觉痛以及多种刺激超敏状态。TRPA1特异性拮抗剂有望用于神经病理性疼痛的治疗。本文总结了TRPA1在神经病理性疼痛中的研究进展。

瞬时受体电位A1在痒觉传导中的作用

瘙痒的发生涉及众多递质、细胞及神经环路。瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道是一种非选择性阳离子通道,大多分布在皮肤、初级感觉神经元,在痒觉的外周传导中起到重要作用。根据瘙痒递质的不同,瘙痒可分为组胺依赖性和非组胺依赖性,组胺依赖性瘙痒神经信号经TRPV1通道传导,而非组胺依赖性瘙痒神经信号传导与TRPA1和/或TRPV1通路密切相关。本文将集中介绍TRPA1离子通道在痒觉外周传导中的作用。

醋酸铅对人和小鼠瞬时受体电位A1离子通道的抑制作用

目的研究醋酸铅对瞬时受体电位A1(TRPA1)通道的影响。方法应用细胞内钙荧光成像系统检测原代培养的小鼠背根神经节(DRG)神经元上TRPA1(mTRPA1)通道和外源性表达在HEK293细胞上的人源TRPA1(hTRPA1)和mTRPA1通道介导的细胞外钙内流;应用双电极电压钳技术记录外源性表达在爪蟾卵母细胞上的hTRPA1通道介导的电流。结果醋酸铅3.0和10.0μmol·L^(-1)对TRPA1介导的小鼠DRG神经元外钙内流的抑制率分别为(36.7±4.1)%和(79.4±3.1)%;醋酸铅浓度依赖性地抑制爪蟾卵母细胞上h TRPA1通道介导的电流,醋酸铅0.3,1.0,3.0,10.0和30.0μmol·L^(-1)对+80 mV处电流的抑制率分别为(1.0±0.7)%,(11.6±0.8)%,(57.7±3.2)%,(93.6±2.6)%和(93.2±2.7)%,其IC50为2.4μmol·L^(-1)。结论 TRPA1通道是铅的内源性作用靶点,低浓度醋酸铅可抑制TRPA1通道。

瞬时受体电位A1/V1通道联动在慢性咳嗽中的作用机制探讨

咳嗽临床常见,特别是胸部影像检查无明显异常的慢性咳嗽,在我国专科门诊中,慢性咳嗽患者约占三分之一以上^([1]),全球患病率约为9.6%^([2])。其病因繁多,诊疗程序较复杂,临床疗效欠佳,反复发作的咳嗽给患者的工作、生活甚至心理上带来严重困扰,引起了国内外的广泛关注。

瞬时受体电位通道A1在生殖系统炎症和氧化应激中的作用

瞬时受体电位通道A1(TRPA1),又称ANKTMI蛋白,是一种主要通透Ca^(2+)的非选择性阳离子通道,属于瞬时受体电位(TRP)离子通道家族[1]。TRPA1广泛分布于神经细胞和非神经细胞(如皮肤、肾脏、肺、胰腺、睾丸和子宫等多种组织细胞)中[2-3],可感受冷热刺激,可被4-羟基壬烯醛、硫化氢、缓激肽和前列腺素等内源性物质激活,也可被异硫氰酸烯丙酯、肉桂醛、大蒜素以及空气中的刺激物如汽车尾气中的丙烯醛等外源性刺激物激活,其激活可以引起疼痛和炎症等多种生物学效应[4]。

瞬时受体电位蛋白通道A1在大鼠炎症性膀胱感觉通路中不同部位的表达变化

目的瞬时受体电位蛋白通道A1(TRPA1)参与机械性感觉、痛觉的传导以及炎性反应,我们制作大鼠的膀胱炎症模型,检测在膀胱传入通路中不同部位TRPA1的表达情况。方法采用大鼠腹腔内注射环磷酰胺制作膀胱炎症模型,正常大鼠作为对照组。采集膀胱黏膜层及脊髓后根神经节,利用实时定量PCR检测TRPA1转录水平的变化。结果大鼠腹腔内注射环磷酰胺2 d后,肉眼及病理检查证实膀胱炎性反应。TRPA1在膀胱黏膜层的表达水平没有明显变化,在脊髓后根神经节中,与对照组相比,炎症组的TRPA1的表达水平明显上调(P<0.05)。结论在膀胱炎症状态下,TRPA1在黏膜层的表达没有明显变化,提示它作为黏膜层的机械敏感性受体参与炎症诱发的排尿改变的可能性较小;TRPA1在脊髓后根神经节中表达上调,感觉神经元表达的TRPA1可能参与膀胱炎性反应,并且与膀胱炎时病理性的排尿方式相关。

鞘内注射瞬时受体电位通道A1 shRNA对部分坐骨神经结扎小鼠神经病理性疼痛的作用及其机制

目的:探讨瞬时受体电位通道A1(TRPA1)在部分坐骨神经结扎(pSNL)小鼠神经病理性疼痛模型中的作用,阐明其作用机制。方法:30只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=6)、假手术组(n=6)和pSNL组(n=18)。pSNL组小鼠鞘内置管成功后随机分为pSNL组、pSNL+NC shRNA组(于术后第7天鞘内注射NC shRNA)和pSNL+TRPA1 shRNA组(于术后第7天鞘内注射TRPA1 shRNA)。检测注射前和注射后l、7、12和24 h各组小鼠后肢机械缩足反射阈值(MWT)和热阈值(TWL)。最后一次检测后2 h处死小鼠,采用Western blotting法检测各组小鼠术侧背根神经节(DRG)中TRPA1蛋白激酶Cε型(Prkce)和星形胶质细胞激活标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,ELISA法检测各组小鼠细胞上清和血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平。分离培养pSNL模型小鼠的原代星形胶质细胞,过表达或敲低TRPA1,检测星形胶质细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。采用STRING数据库和免疫共沉淀(Co-IP)法预测并验证TRPA1和Prkce相互作用。检测过表达或敲低TRPA1后空质粒组、Ad-TRPA1、sh-NC组和sh-TRPA1组星形胶质细胞中Prkce和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。将TRPA1 shRNA单独转染或与AdPrkce共转染星形胶质细胞,分为sh-TRPA1+empty vector组(转染空载体)、sh-TRPA1+Ad-Prkce组(转染TRPA1过表达载体)和sh-TRPA1+Ad-Prkce组(转染Prkce过表达载体)。采用Western blotting法检测各组细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平,ELISA法检测细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。结果:与对照组比较,pSNL组小鼠MWT和TWL降低(P<0.01);与pSNL+NC中shRNA组比较,pSNL+TRPA1 shRNA组小鼠MWT和TWL升高(P<0.01)。与假手术组比较,术后第7天pSNL组小鼠DRG中TRPA1和GFAP蛋白表达水平升高(P<0.05),血清中TNF-α和MCP-1水平升高(P<0.05)。与pSNL+NC shRNA组比较,pSNL+TRPA1 shRNA组小鼠DRG中TRPA1和GFAP蛋白表达水平及血清中TNF-α和MCP-1水平降低(P<0.05)。与空质粒组比较,Ad-TRPA1组细胞中GFAP蛋白表达水平明显升高(P<0.01),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显升高(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-TRPA1组细胞中GFAP蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显降低(P<0.05)。与sh-TRPA1+empty vector组比较,sh-TRPA1+Ad-Prkce组细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平升高(P<0.01),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显升高(P<0.05)。结论:TRPA1通过与Prkce相互作用参与pSNL模型小鼠星形胶质细胞的激活以及神经病理性疼痛发生发展过程。

瞬时受体电位通道 A1促进盆腔神经损伤小鼠结肠动力恢复的实验研究

目的探讨瞬时受体电位通道A1(transient receptor potential ankyrin 1,TRPAl)在去盆腔神经支配(pelvic nerve denervation,PND)小鼠结肠动力适应性恢复中的作用。方法将108只C57小鼠采用随机数字表法分为两组(n=54):PND模型组、假手术组。两组依据干预措施分别再分为3组(n=18):无干预组、TRPA1激动剂(姜黄素)处理组、TRPA1拮抗剂(HC-030031)处理组。另将30只TRPA1基因敲除小鼠随机分为2组(n=15):PND模型组、假手术组。建立PND小鼠模型,术中盲肠预置管以进行结肠传输试验。结肠传输功能分别在术后第1、3、7天测定。结果与假手术组相比,PND模型组小鼠术后第1天传输功能显著降低(P<0.001),术后第3天的结肠传输功能有恢复趋势但仍然降低(P=0.040),至第7天,两组传输功能的差异无统计学意义(P=0.073)。经TRPA1激动剂(姜黄素)干预后,与对照组(无干预假手术组)相比,干预后假手术组结肠传输功能明显增强(P<0.001),PND模型组小鼠术后第1天和第3天的结肠传输功能无差异(P=0.304、0.065),至第7天,PND模型组传输功能显著增高(P=0.001)。相反,TRPA1拮抗剂(HC-030031)干预后,PND模型组与对照组相比,小鼠术后第1、3、7天的结肠传输功能均显著下降(P<0.05),结肠传输功能无恢复趋势。对TRPA1基因敲除小鼠观察到的结果与应用TRPA1拮抗剂的结果一致。免疫组化结果显示:TRPA1表达于小鼠结肠黏膜,小鼠去盆腔神经支配后,TRPA1出现先下降、后逐渐升高的适应性恢复趋势。结论小鼠去盆腔神经支配后存在结肠动力适应性恢复现象,TRPA1表达于结肠黏膜,可显著促进PND小鼠的结肠动力恢复。

瞬时受体电位离子通道A1对慢性偏头痛大鼠模型的作用及氟桂利嗪对其影响

目的本实验通过炎性汤(IS)反复刺激大鼠上矢状窦区硬脑膜疼痛感受器建立慢性偏头痛(CM)大鼠模型,研究瞬时受体电位离子通道A1(TRPA1)及降钙素基因相关肽(CGRP)在CM大鼠模型中的作用,探讨TRPA1在CM发生发展中的可能作用及氟桂利嗪对其影响。方法清洁级SD雄性大鼠48只,体重250~300 g,按随机数字法分为4组(n=12):正常对照组(A组)、假手术组(B组)、CM模型组(C组)及药物干预组(D组)。注射试剂1 h后安静环境中进行大鼠行为学观察及机械刺激缩足反应阈值(PWMT)测定。采用Elisa、Real-Time PCR及Western-Blot技术检测大鼠硬脑膜、三叉神经节(TG)及三叉神经脊束核尾核(TNC)组织部位TRPA1及CGRP表达情况。结果与A组、B组相比较,C组大鼠行为学评分明显升高,PWMT测定值降低,大鼠硬脑膜、TG及TNC组织部位中CGRP及TRPA1表达量均明显上调,差异有统计学意义(P<0.05);与C组相比较,D组大鼠行为学评分降低,PWMT测定值升高,硬脑膜、TG及TNC组织部位CGRP及TRPA1表达量均下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 I TRPA1受体可能参与CM发作的病理生理过程;氟桂利嗪可能通过影响TRPA1受体表达,引起CGRP表达下调,从而缓解CM症状。

瞬时受体电位通道蛋白A1和V1在正常小鼠耳蜗中的定位表达

目的研究瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1)和V1(TRPV1)在正常小鼠耳蜗中的定位与表达。方法选择12只健康成年BALB/c小鼠,应用免疫荧光染色方法和蛋白质印迹技术检测TRPA1和TRPV1在耳蜗中的定位与表达,同时结合电生理指标听脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测试小鼠的听力。结果 TRPA1和TRPV1在小鼠耳蜗螺旋器的内、外毛细胞、螺旋神经节细胞和血管纹边缘细胞等都有表达,且主要定位于细胞膜;蛋白质印迹检测结果亦显示小鼠耳蜗中有TRPA1和TRPV1的表达。结论 TRPA1和TRPV1在正常BALB/c小鼠耳蜗的多种细胞中均有表达,这为深入研究二者在内耳听觉生理和病理生理中的作用奠定基础。

瞬时受体电位通道A1亚型在冠状动脉粥样硬化性心脏病中的临床研究进展

瞬时受体电位通道A1亚型(TRPA1)是存在于细胞膜上的非选择性阳离子通道锚蛋白。TRPA1可能降低心肌再灌注损伤,TRPA1抑制剂在心血管系统中也发挥一定的作用。该文主要介绍TRPA1基本结构、功能、检测方法,TRPA1与冠状动脉粥样硬化性心脏病发病的相关性研究,TRPA1在心肌缺血再灌注损伤中的研究现状和相关治疗。

TRPA1在炎性疾病中的研究进展

瞬时受体电位A1(TRPA1)广泛分布于初级神经元和非神经组织,其参与炎症反应的调控,还参与人体生理过程及感觉的调节。基于TRPA1的结构特性,其在不同组织细胞中的作用有所不同。TRPA1在炎症性皮肤病、气道炎性疾病、动脉粥样硬化、牙髓炎、牙周炎等炎性疾病中表达,且通过协调一系列细胞过程对炎性疾病的发生发展进行调控,但具体的机制尚未完全明确。进一步探寻TRPA1在不同炎性疾病中的作用机制,有助于临床开拓更多更有效的治疗方案。

TRPA1传导皮肤角质细胞温热信息的机制研究

目的探究角质细胞中的温热信息是如何被传导至下游背根神经节(DRG)中的TRPA1离子通道。方法采用单细胞钙离子成像技术,利用TRPA1过表达系统以及野生型和TRPA1基因敲除小鼠,联合TRPA1激动剂(BITC)和抑制剂(HC-030031)检测H_(2)O_(2)在DRG神经元温热感知中的作用及其与TRPA1的相关性。在不同温热条件下培养皮肤角质细胞,并提取角质细胞RNA;采用RNA-seq分析比较不同温度培养的角质细胞基因表达异同,筛选皮肤角质细胞传导温热信息的候选因子。结果过表达TRPA1以及DRG神经元中的TRPA1均可在H_(2)O_(2)存在情况下被温热激活,而温热范围内不同温度可影响皮肤角质细胞中与H_(2)O_(2)产生有关的趋化因子配体2(CCL2)和核心蛋白聚糖(DCN)基因的表达。结论H_(2)O_(2)相关因子可能参与TRPA1介导的温热传导过程。

基于TRPA1离子通道探讨中药干预腰椎间盘突出症的分子机制

疼痛是腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation,LDH)的主要临床表现,也是炎症反应的主要特征之一,疼痛日久失治易成慢性,进而影响患者认知及情绪。在炎症介质刺激下,瞬时受体电位A1(transient receptor potential A1,TRPA1)离子通道被激活,参与疼痛及炎症的产生,并长期恶性循环作用于机体,引发不适,其已成为抗炎、止痛的靶点之一。中药治疗疼痛具有疗效显著、副作用小等优势,本文基于TRPA1离子通道探讨中药干预LDH的分子机制,为临床治疗提供新思路。

重症龋患儿唾液TRPA1、NLRP3的表达水平及临床意义

目的 研究重症龋患儿唾液瞬时电位受体离子通道A1(TRPA1)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)的表达水平及临床意义。方法 选择2021年1月至2022年6月期间在保定市妇幼保健院接受治疗的142例龋齿患儿,根据龋失补指数(DMFT)分为重症组(n=46)和非重症组(n=96);另取同期体检的70名无龋齿健康儿童作为对照组(n=70)。检测并比较三组受试儿童唾液TRPA1、NLRP3表达水平的差异,采用Pearson检验分析TRPA1、NLRP3表达水平与DMFT的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析唾液TRPA1、NLRP3表达水平对重症龋的诊断价值,采用单因素分析和多因素logistic分析探讨重症龋的影响因素。结果 三组唾液TRPA1、NLRP3表达水平比较为:重症组>非重症组>对照组,差异均有统计学意义(F=75.482,91.391,P<0.05);重症组患儿唾液TRPA1、NLRP3的表达水平与DMFT呈正相关(r=0.351、0.384,P<0.05);唾液TRPA1、NLRP3的表达水平对重症龋具有诊断价值,截断值分别为1.41 pg/mL、2.54 pg/mL,灵敏度分别为76.09%、89.13%,特异度分别为83.33%、82.29%;吃甜食频率≥2次/d、唾液TRPA1表达水平≥1.41 pg/mL、唾液NLRP3表达水平≥2.54 pg/mL是发生重症龋的危险因素,刷牙频率≥2次/天、家长监督刷牙是发生重症龋的保护因素(P<0.05)。结论 重症龋发病可能与TRPA1、NLRP3表达增加介导的生物学效应相关。

TRPA1/TRPV1在心血管疾病中的作用

目前,心血管疾病是导致我国居民死亡人数最多的疾病。高血压、动脉粥样硬化、代谢紊乱和衰老等危险因素相互促进,在心血管疾病发生发展中起着重要作用。TRP蛋白是一个四聚体结构,由S1~S6的6次跨膜结构域组成,其C端和N端均位于细胞膜内。依据TRP序列同源性可将哺乳动物中的TRP离子通道分为7个亚家族即TRPC、TRPM、TRPV、TRPA、TRPML、TRPP和TRPN。TRP家族至少有28个成员,参与多种细胞功能,包括感知觉和信号转导[1]。Ca^2+是平滑肌收缩的主要调节因子,也起到细胞内第二信使和必要的辅助因子酶活性作用。TRP通道的特定生理作用是调控细胞内Ca^2+浓度和分布,直接影响多种细胞功能,参与调节细胞收缩、舒张、增殖、分化和细胞凋亡等过程,在多种心血管疾病的病理生理学中发挥重要作用。

瞬时受体电位通道A1与5-羟色胺在慢传输型便秘结肠黏膜中表达的意义

目的探讨瞬时受体电位通道A1（TRPA1）与5-羟色胺（5-HT）在慢传输型便秘（STC）患者结肠黏膜中表达的意义。方法回顾性分析第三军医大学大坪医院2013年3月至2014年3月收治的10例STC患者和2013年12月至2014年5月收治的10例乙状结肠癌患者的临床资料。收集患者手术切除的降结肠标本，其中10例STC患者的降结肠标本为便秘组；10例乙状结肠癌患者的降结肠标本（距肿瘤边缘距离〉10cm）为对照组。采用免疫荧光染色检测对照组结肠黏膜中TRPA1与5-HT的表达情况，免疫组织化学染色检测两组结肠黏膜中TRPA1与5-HT的表达情况，Westernblot检测检测结肠黏膜中TRPA1表达情况。正态分布的计量资料用面±s表示，组问比较采用t检验。结果免疫荧光染色检测结果显示：对照组TRPA1与5-HT共表达于结肠黏膜（肠嗜铬细胞）。免疫组织化学染色检测结果显示：便秘组TRPA1与5-HT表达的IOD值分别为3619±1702、55721±28613；对照组分别为9894±3325、12949±2200，两组比较，差异有统计学意义（t=-5．312，4．713，P〈0．05）。Westernblot检测结果显示：便秘组TRPA1蛋白相对表达量为0．8±0．3，对照组为1．5±0．5，两组比较，差异有统计学意义（t=-2．379，P〈0．05）。结论TRPA1在肠黏膜的肠嗜铬细胞中表达，STC患者降结肠黏膜5-HT表达上调、TRPA1表达下调可能与其发病相关。

大鼠慢性前列腺炎模型中TRPA1及相关炎症因子的表达

目的：探讨模拟慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征（CP/CPPS）动物模型疼痛产生的分子机制。方法：取SD大鼠36只,随机分为实验组和对照组,每组18只。实验组向前列腺双腹侧叶注射50μl 3%无菌λ-角叉菜胶制作大鼠无菌性前列腺炎症性疼痛模型,对照组注射等量无菌生理盐水。两组分别于造模后1周、2周和4周3个时间节点,每个节点6只大鼠,解剖获取大鼠前列腺组织、L6~S1段背根神经节（DRG）及脊髓,采用免疫组化联合Western印迹法检测神经生长因子（NGF）、瞬时受体电位通道蛋白A1（TRPA1）及降钙素基因相关肽（CGRP）在不同组织内的表达情况。结果：慢性前列腺炎症性疼痛大鼠前列腺组织中NGF、CGRP、TRPA1蛋白的表达均高于对照组（P〈0.05）,且随造模时间的延长各蛋白表达逐渐减弱,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。在大鼠L6~S1段DRG及脊髓内,造模后1周,实验组NGF、CGRP及TRPA1表达与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,造模后2周及4周,各蛋白表达呈持续高水平状态,与造模后1周大鼠比较差异无统计意义（P〉0.05）,但各实验组大鼠与对照组蛋白表达比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,两时间点上两组蛋白表达比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：前列腺内注射λ-角叉菜胶方法制作的大鼠前列腺炎症性疼痛模型,可在分子水平模拟CP/CPPS的产生机制;TRPA1在CP/CPPS患者疼痛产生上可能发挥中继通道的作用。

去盆腔神经对大鼠结肠动力与结肠黏膜瞬时受体电位通道A1的影响

目的 探讨去盆腔神经对大鼠结肠动力与结肠黏膜瞬时受体电位通道A1（TRPA1）的影响.方法 将96只成年大鼠按随机数字表法分为3组：（1）对照组18只,大鼠不做特殊处理,仅常规饲养.（2）假手术组39只,大鼠开腹后剥离出盆腔神经,缝合切口,关闭腹腔.（3）手术组39只,大鼠开腹后分离出盆腔神经,显微剪剪断,缝合切口,关闭腹腔.通过计算各组大鼠术后第1、3、7天结肠组织和粪便中铬（51Cr）分布的几何中心（GC）检测结肠传输功能.运用Western blot检测各组大鼠术后第1、3、7天近端及远端结肠黏膜TRPA1的表达.符合正态分布的计量资料以（x）±s表示,多组间比较采用重复测量的方差分析,两两比较采用LSD检验.结果 假手术组大鼠51Cr的GC值术后第1、3、7天分别为5.8±0.9、7.5±0.5、7.3±0.5,3者比较,差异有统计学意义（F =9.508,P＜0.05）.手术组大鼠51Cr的GC值术后第1、3、7天分别为4.9±0.4、5.6±0.4、6.4±0.8,3者比较,差异有统计学意义（F=11.689,P＜0.05）.假手术组和手术组大鼠51Cr的GC值术后第1、3天分别比较,差异均有统计学意义（=2.227,7.144,P＜0.05）;术后7天两组比较,差异无统计学意义（t=2.162,P＞0.05）.Western blot检测结果显示：对照组大鼠近端结肠黏膜中TRPA1相对表达量术后第1、3、7天分别为1.00 ±0.05、1.00±0.07、1.00±0.06,3者比较,差异无统计学意义（F=0.055,P＞0.05）.假手术组大鼠近端结肠黏膜中TRPA1相对表达量术后第1、3、7天分别为0.78 ±0.09、0.94 ±0.08、0.95 ±0.12,3者比较,差异有统计学意义（F=5.651,P＜0.05）.手术组大鼠近端结肠黏膜中TRPA1相对表达量术后第1、3、7天分别为0.37 ±0.12、0.89 ±0.10、0.92 ±0.14,3者比较,差异有统计学意义（F=41.005,P＜0.05）.对照组、假手术组和手术组大鼠近端结肠黏膜中TRPA1相对表达量术后第1天比较,差异有统计学意义（F=73.497,P＜0.05）;对照组分别与假手术组和手术组比较,差异均有统计学意义（t=4.224,11.954,P＜0.05）;手术组和假手术组比较,差异有统计学意义（t=7.730,P＜0.05）.对照组、假手术组和手术组大鼠近端结肠黏膜中TRPA1相对表达量术后第3、7天比较,差异均无统计学意义（F=2.087,0.656,P＞0.05）.对照组大鼠远端结肠黏膜中TRPA1相对表达量术后第1、3、7天分别为1.00±0.05、1.00±0.07、1.00±0.06,3者比较,差异无统计学意义（F=0.055,P＞0.05）.假手术组大鼠远端结肠黏膜中TRPA1相对表达量术后第1、3、7天分别为0.68 ±0.11、0.98±0.12、1.11 ±0.16,3者比较,差异有统计学意义（F=16.975,P＜0.05）.手术组大鼠远端结肠黏膜中TRPA1相对表达量术后第1、3、7天分别为0.39±0.12、0.78 ±0.10、1.06 ±0.13,3者比较,差异有统计学意义（F=50.417,P＜0.05）.对照组、假手术组和手术组大鼠远端结肠黏膜中TRPA1相对表达量术后第1、3天比较,差异均有统计学意义（F =58.773,8.680,P ＜0.05）.术后第1天,对照组分别与假手术组和手术组比较,差异均有统计学意义（t=5.706,10.837,P＜0.05）;手术组和假手术组比较,差异有统计学意义（t=5.131,P＜0.05）.术后第3天,对照组与假手术组比较,差异无统计学意义（t=0.166,P＞0.05）;对照组与手术组比较,差异有统计学意义（t=3.694,P＜0.05）;假手术组和手术组比较,差异有统计学意义（t=3.528,P＜0.05）.对照组、假手术组和手术组大鼠远端结肠黏膜中TRPA1相对表达量术后第7天比较,差异无统计学意义（F=1.319,P＞0.05）.结论 去盆腔神经支配后,大鼠结肠动力减弱,远端结肠黏膜中TRPA1表达下调,但随时间推移可逐渐恢复,两者在恢复趋势上存在一致性.

TRPA1激动剂桂皮醛防止高糖介导的心肌细胞氧化应激损伤

目的探讨桂皮醛对高糖介导的心肌细胞氧化应激损伤的作用及机制。方法大鼠心肌细胞(H9C2)以高糖培养基(33 mmol/L D-葡萄糖)培养,以低糖培养基(5.5 mmol/L D-葡萄糖)作为对照。首先利用Western blot和免疫组织化学证实瞬时受体电位通道A1亚型(TRPA1)在H9C2心肌细胞中的表达;在此基础上分别利用线粒体超氧化物荧光探针(mito SOX)及TUNEL细胞凋亡试剂盒观察桂皮醛对高糖环境下H9C2细胞线粒体活性氧(ROS)水平以及细胞凋亡的影响,以Western blot法观察Nrf2和TRPA1的表达;利用荧光定量PCR观察TRPA1及Nrf2 mRNA水平。结果 TRPA1在H9C2细胞中有表达,桂皮醛可显著抑制高糖介导线粒体ROS生成(P<0.01),并可减少心肌细胞的凋亡(P<0.01),而上述作用可被TRPA1的阻断剂HC 030031所阻断。桂皮醛可上调TRPA1、Nrf2的蛋白及mRNA表达(P<0.01),而通过HC 030031抑制TRPA1可显著减弱桂皮醛的上述作用(P<0.01)。结论桂皮醛可防止高糖介导的心肌细胞氧化应激损伤,而该作用可能与其激活TRPA1,上调Nrf2有关。