2种黑豆球蛋白与矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的相互作用研究

矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside,C3G)在不同pH值环境中的主要存在形式不同,其抗氧化能力也有所差异。黑豆蛋白是一种常见的膳食蛋白,具有作为不稳定生物活性化合物载体的潜力,了解黑豆球蛋白与C3G的相互作用机制有利于它们在食品体系中的应用。通过多种光谱学分析和分子对接实验研究了pH值为2.0、5.0和7.0时黑豆β-伴大豆球蛋白(7S)和大豆球蛋白(11S)与C3G的相互作用及其对C3G氧化稳定性和抗氧化能力的影响。研究结果表明,pH值为2.0和5.0时,C3G与7S和11S结合不仅导致Tyr残基周围的疏水环境减少,极性增加,而且使7S和11S中α-螺旋增加,β-折叠比例下降。pH值为7.0时,C3G的存在使7S和11S中α-螺旋和β-折叠的占比呈增加趋势,但β-转角比例降低。此外,C3G与7S和11S结合是一个放热过程,在不同pH值条件下,C3G与7S和11S主要通过氢键和范德华力相互作用使7S和11S静态荧光猝灭。7S和11S均在pH值为7.0时对C3G亲和力最强。分子对接结果表明,7S上的GLU229、ARG356和PRO101残基,11S上的ARG161、VAL162、ILE171和THR176残基在与C3G结合中起关键作用。在不同pH值条件下,7S、11S与C3G结合后均显著增强了C3G的氧化稳定性和抗氧化能力。

半乳糖凝集素-3在心力衰竭临床应用中的研究进展

心力衰竭(HF)是心血管疾病发展到中晚期的一组复杂临床综合征,高发病率和病死率使其成为巨大的公共卫生负担。半乳糖凝集素-3(Gal-3)是近年来出现的新型生物标志物,大量研究证实其与HF的发生、发展密切相关,在HF患者临床管理应用中的价值日益突出。Gal-3参与心肌的纤维化和炎症反应,能直接反映心脏纤维化和心室重构的进程。Gal-3血清含量升高可促进心肌纤维化,降低心功能,增加HF患者的全因病死及再住院风险,因此监测该指标有助于HF的诊断及指导治疗,对HF患者的预后评估有着重要的临床意义。本文主要综述了Gal-3的结构、功能,Gal-3在HF临床诊断、预后评估中的作用,以及通过抑制Gal-3表达及中医药干预来辅助治疗HF。

补肾化瘀方对PCOS患者血清半乳糖凝集素-3、IL-6及CRP水平的影响

目的 探讨补肾化瘀方治疗肾虚血瘀型多囊卵巢综合征(PCOS)患者的临床疗效及可能的作用机制。方法 将2020年9月至2021年9月期间,首次就诊于浙江省中西医结合医院生殖医学科门诊的60例肾虚血瘀型PCOS患者按照随机数字表法分为对照组和治疗组,各30例。对照组给予二甲双胍治疗,治疗组给予补肾化瘀方治疗,两组均治疗3个月经周期。观察治疗前后中医证候积分、性激素、糖脂代谢相关指标及半乳糖凝集素-3(Galectin-3)、白介素6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)水平的变化情况。结果 治疗前,两组患者性激素、糖代谢相关指标、脂代谢相关指标、炎症因子水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,治疗组PCOS患者排卵率较对照组高(76.83%比49.43%,P<0.01)。与治疗前相比,两组患者中医证候积分[(4.18±2.58)分比(12.50±2.17)分,(6.07±2.94)分比(11.97±2.44)分,P<0.01]、空腹血糖[(5.05±0.45)mmol/L比(5.27±0.70)mmol/L,(4.92±0.56)mmol/L比(5.44±0.37)mmol/L,P<0.05]、空腹胰岛素[(9.66±4.54)mU/L比(13.48±4.73)mU/L,(8.44±2.81)mU/L比(12.20±5.19)mU/L,P<0.05]及胰岛素抵抗指数[(2.18±1.05)比(3.17±1.24),(1.89±0.76)比(2.99±1.42),P<0.05]降低。与对照组比较,治疗组中医证候积分降低[(4.18±2.58)分比(6.07±2.94)分,P<0.05],黄体生成素[(10.12±1.72)mIU/mL比(12.54±2.56)mIU/mL,P<0.05]、黄体生成素/卵泡刺激素[(1.65±0.32)比(1.95±0.40),P<0.05]、睾酮[(0.47±0.12)ng/mL比(0.57±0.16)ng/mL,P<0.05]水平降低,三酰甘油[(1.31±0.62)mmol/L比(1.66±0.56)mmol/L,P<0.05]、总胆固醇[(3.91±0.98)mmol/L比(4.40±0.70)mmol/L,P<0.05]、低密度脂蛋白[(2.60±0.61)mmol/L比(3.05±0.79)mmol/L,P<0.05]水平降低,高密度脂蛋白水平升高[(1.41±0.17)mmol/L比(1.31±0.17)mmol/L,P<0.05]。与对照组比较,治疗组Galectin-3 [(8.71±1.67)ng/mL比(9.91±2.23)ng/mL,P<0.05]、IL-6 [(30.24±3.85)pg/mL比(32.62±4.97)pg/mL,P<0.05]、CRP[(2.80±0.91)mg/L比(3.32±0.64)mg/L,P<0.05]水平降低。结论 补肾化瘀方可有效缓解肾虚血瘀型PCOS临床症状,降低血清炎症指标Galectin-3、IL-6及CRP水平,改善糖脂代谢紊乱,调节性激素水平,促进排卵。

半乳糖凝集素-3在儿童心血管疾病诊治中的应用

心血管疾病的发病率不断上升且病死率较高,严重危害人类生命健康。半乳糖凝集素-3在机体细胞间相互作用过程中起着细胞增殖、凋亡调节、炎症反应、纤维化和宿主防御等多种生物学作用。近年来,半乳糖凝集素-3研究取得重大进展且在心血管疾病中的作用受到越来越多的关注。半乳糖凝集素-3作为心脏生物标志物已被证明是成人的重要预后工具。然而,它尚未在儿科人群中作为日常临床实践中的生物标志物建立。该文综述半乳糖凝集素-3在心力衰竭、病毒性心肌炎、川崎病、心律失常等心血管疾病诊治中的应用。

半乳糖凝集素-3、白细胞介素35、白细胞介素17在支气管哮喘病儿血清中的水平及与肺功能的相关性

目的探究半乳糖凝集素-3(Galectin-3)、白细胞介素35(IL-35)及白细胞介素17(IL-17)在支气管哮喘病儿血清中的水平及临床意义。方法选取2021年8月至2022年8月徐州医科大学附属医院诊治的哮喘病儿77例,分为轻中度哮喘急性发作组(40例)及哮喘缓解组(37例),选择同期徐州医科大学附属医院健康体检儿童26例为对照组。采用酶联免疫法测定血清Galectin-3、IL-35、IL-17水平。应用肺功能仪进行肺功能检查,记录第1秒用力呼气容积/1 s用力呼气量预计值百分比(FEV1%)、1 s用力呼气量占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、最大呼气50%瞬间流量(FEF50%),最大呼气75%瞬间流量(FEF75%)指标。结果轻中度急性发作组Gal-3、IL-17水平分别为(50.89±7.90)ng/L、(60.95±8.14)ng/L,明显高于缓解组的(33.93±9.49)ng/L、(42.94±6.67)ng/L及对照组的(24.8±5.84)ng/L、(35.45±8.68)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。轻中度急性发作组IL-35水平为(101.28±9.44)ng/L明显低于缓解组(125.91±7.79)ng/L及对照组(148.83±8.09)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。轻中度急性发作组FEV1%、FEV1/FVC水平分别为(67.22±12.11)%、(67.56±12.60)%明显低于缓解组的(95.4±10.63)%、(95.58±10.95)%和对照组的(108.21±10.49)%、(108.9±10.03)%,均差异有统计学意义(P<0.05),FEF50%、FEF75%在轻中度急性发作组分别为(46.22±11.80)%、(38.42±9.94)%,与缓解组的(50.11±11.53)%、(42.76±12.39)%比较,差异无统计学意义(P>0.05),与对照组(91.75±12.43)%、(93.84±12.07)%比较差异有统计学意义(P<0.05)。Gal-3与IL-17呈正相关(P<0.05),IL-35与IL-17呈负相关(P<0.05),Gal-3、IL-17与FEV1%、FEV1/FVC、FEF50%、FEF75%呈负相关(P<0.05),IL-35与FEV1%、FEV1/FVC、FEF50%、FEF75%呈正相关(P<0.05)。结论哮喘病儿Gal-3表达上调,IL-35表达下调,引起IL-17促表达增强、表达抑制作用减弱,IL-17水平升高从而导致气道炎症加重,可能是轻中度哮喘急性发作的发病机制之一;亦可能是哮喘缓解期部分病儿小气道炎症持续存在的可能机制之一。Gal-3、IL-35、IL-17水平测定有助于预测轻中度哮喘急性发作风险及指导调整吸入糖皮质激素(ICS)用药。

高糖高脂环境下抑制自噬对矢车菊素-3-O-葡萄糖苷保护胰岛β细胞损伤的影响

目的:探究高糖高脂(HGHF)环境下矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对胰岛β细胞损伤的影响及作用机制。方法:采用含10、20、30、40、50μmoL/L C3G的培养液处理胰岛β细胞24h,以未经处理的胰岛β细胞作为对照组,CCK-8法检测各处理组细胞活力;使用含25mmoL/L葡萄糖与0.5mmoL/L棕榈酸的培养液建立HGHF环境,并添加含10、20、30、40、50μmoL/L C3G处理胰岛β细胞24h,以未经处理的胰岛β细胞作为对照组,25mmoL/L葡萄糖与0.5mmoL/L棕榈酸诱导的胰岛β细胞作为HGHF组,CCK-8法检测各处理组细胞活力。实验分为对照组、HGHF组、HGHF+C3G组、HGHF+C3G+3-MA组,进行相应处理后,CCK-8法检测各组细胞活力,DCFH-DA荧光探针检测各组细胞活性氧(ROS)水平,比色法检测各组细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)水平,ELISA法测定各组细胞胰岛素分泌情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组细胞中自噬相关基因5(Atg5)、微管相关蛋白轻链3(LC3)、Beclin-1的mRNA表达水平,蛋白质免疫印记(Western blot)测定各组细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1及Bcl-2关联X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、活化型半胱天冬酶-3(Cleaved Caspase-3)的蛋白表达水平。结果:与对照组比较,不同浓度(10、20、30、40、50μmoL/L)C3G组胰岛β细胞活力升高(P<0.05),HGHF组胰岛β细胞活力下降(P<0.05);与HGHF组比较,在HGHF环境下加入20、30、40、50μmoL/L C3G能够显著提高胰岛β细胞活力(P<0.05)。与HGHF组比较,HGHF+C3G组细胞活力升高(P<0.05),ROS含量和MDA含量下降(P<0.05),SOD活性和GSH-Px含量上升(P<0.05),胰岛素分泌水平增加(P<0.05),Atg5、LC3、Beclin-1的mRNA相对表达量上调(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和Beclin-1蛋白相对表达量上调(P<0.05),Bax、Cleaved Caspase-3的蛋白相对表达量下调且Bcl-2蛋白相对表达量上调(P<0.05)。而在HGHF环境下添加C3G处理的同时使用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)作用,C3G对HGHF环境下胰岛β细胞的保护作用消失。结论:C3G对HGHF环境下的胰岛β细胞起到保护作用,其能够提高细胞活力,抑制氧化应激损伤,该作用可能与促进自噬相关。

心房颤动首次导管射频消融术患者趋化素与半乳糖凝集素-3和内脂素水平与术后复发的关联性及临床意义评价

目的探讨心房颤动(房颤)首次导管射频消融术患者趋化素(chemerin)、半乳糖凝集素-3(Gal-3)、内脂素(visfatin)水平与术后复发的关联性及临床意义。方法选取四川绵阳四○四医院2021年9月至2023年8月首次行导管射频消融术的105例房颤患者进行前瞻性队列研究,随访3个月根据有无复发分为复发组和未复发组。比较两组基线资料、术前Chemerin、Gal-3及visfatin水平,logistic回归分析复发的预警因素,以方差膨胀因子和容忍度评价logistic回归分析是否存在多重共线性问题,以受试者工作特征曲线(ROC)分析各相关因素对复发的预测价值,以精准-召回(PR)曲线评价联合预测方案的召回率和精准率。结果复发组OSAS患者占比(27.59%)高于未复发组(3.95%),行神经节丛消融患者占比(37.93%)低于未复发组(61.84%)(P<0.05);复发组Chemerin、Gal-3、visfatin水平高于未复发组[(170.54±36.83)ng/ml比(122.69±31.50)ng/ml、(6.13±2.00)μg/L比(3.99±1.25)μg/L、(34.17±10.22)g/ml比(21.58±6.97)g/ml,均P<0.05]。Logistic回归显示,OSAS、Chemerin、Gal-3、visfatin均是复发的相关危险因素,行神经节丛消融是复发的相关保护因素(P<0.05),多重共线性检验显示,各相关因素的方差膨胀因子介于1.045~2.007,容忍度介于0.544~0.901,多重共线性可能性低。将OSAS、行神经节丛消融、Chemerin、Gal-3、visfatin原始数据按照20%、20%、60%随机划分为测试集、验证集、训练集,得到OSAS、行神经节丛消融、Chemerin、Gal-3联合visfatin的ROC曲线显示,各相关因素联合的AUC为0.911,高于OSAS(0.842)、行神经节丛消融(0.501)、Chemerin(0.780)、Gal-3(0.841)、visfatin(0.727)(P<0.05)。PR曲线显示,各相关因素联合方案的AUC为0.858,具有较高的召回率和精准率。结论房颤首次导管射频消融术患者术前Chemerin、Gal-3、visfatin水平与术后复发密切相关,三者联合OSAS、行神经节丛消融预测复发呈现出较高的预测性能,可为临床识别房颤复发高风险人群提供客观数据参考,有助于制定预防策略,从而减少术后的复发。

血清半乳糖凝聚素-3、α-klotho表达与代谢相关脂肪性肝病糖脂水平及预后的关系

目的 探讨半乳糖凝聚素-3(Gal-3)、α-klotho在代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)病人血清中的表达情况,并分析其与糖脂水平和预后的关系。方法 选取2020年12月至2021年12月来保定市人民医院就诊并确诊为MAFLD病人112例为研究对象,根据非酒精性脂肪性肝病肝纤维化评分(NAFLDFS)将病人分为肝纤维化危险组(n=46)、无肝纤维化组(n=66),同时选取50例健康者为对照组。收集研究对象一般资料,采用酶联免疫吸附法对血清中α-klotho、Gal-3表达水平进行检测,Pearson法分析α-klotho、Gal-3表达的相关性,及两者分别与糖脂代谢指标的相关性;受试者操作特征(ROC)曲线分析血清α-klotho、Gal-3水平对MAFLD病人预后的预测价值。结果 MAFLD病人血清中α-klotho表达水平低于对照组(268.15±82.13)ng/L,Gal-3表达水平高于对照组(1.48±0.47)μg/L,其中肝纤维化危险组病人血清中α-klotho表达水平低于无肝纤维化组[(140.49±45.16)ng/L比(215.51±70.33)ng/L],Gal-3表达水平高于无肝纤维化组[(2.26±0.50)μg/L比(1.96±0.33)μg/L](P<0.05);预后不良的MAFLD病人血清中α-klotho表达水平低于预后良好病人,Gal-3高于预后良好病人,均差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,MAFLD病人血清中α-klotho、Gal-3表达呈显著负相关(r=-0.49,P<0.05);MAFLD病人血清中α-klotho表达与空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗(HOMA-IR)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、谷氨酰转肽酶(GGT)表达呈负相关,与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、血小板(PLT)、血清白蛋白(Alb)表达呈正相关(P<0.05);Gal-3表达与FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-c、AST、ALT、GGT表达呈正相关,与HDL-c、PLT、Alb表达呈负相关(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清α-klotho、Gal-3水平评估预后不良病人的曲线下面积(AUC)分别为0.83、0.84,对应的灵敏度分别为86.84%、80.90%,特异度分别为66.22%、82.02%;二者联合评估的AUC为0.93,灵敏度为86.84%,特异度为89.19%。结论 MAFLD病人血清中α-klotho表达降低,Gal-3表达升高,二者表达与糖脂水平和病人预后密切相关。

高效液相色谱法测定黑米花色苷矢车菊素-3-O-葡萄糖苷方法的建立

本试验建立一种高效液相色谱法测定黑米花色苷矢车菊素-3-O-葡萄糖苷含量的方法。结果表明:本方法可有效分离目标色谱峰。矢车菊素-3-O-葡萄糖苷在0.20~50.0μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(R^(2)为0.999894),精密度RSD为0.1%,重复性RSD为0.2%~1.3%,检出限和定量限分别为0.1 mg/kg、0.3 mg/kg。矢车菊素-3-O-葡萄糖苷低、中、高浓度回收率分别为96.5%、98.4%、100.7%。该方法线性良好,准确度和精密度高,重复性和回收率较好,适用于黑米花色苷矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的测定。

硫代半乳糖苷通过抑制半乳糖凝集素-8的糖结合活性改善脑出血继发性脑损伤

目的探讨小鼠脑出血后半乳糖凝集素-8(Galectins-8)对脑出血急性期脑损伤程度的影响。方法采用胶原酶注入法建立小鼠脑出血模型,制作冰冻切片,采用免疫荧光染色观察血肿周围免疫炎症细胞表达情况,干湿质量法检测脑组织含水量,劳克坚牢蓝/焦油紫(LFB/CV)染色观察CH急性期脑组织的血肿体积、脑肿胀程度。结果脑出血后硫代半乳糖苷抑制Galectins-8的糖结合活性,可显著减少血肿周围活化的小胶质细胞及浸润的中性粒细胞数量(Iba1:t=2.904,P=0.0272;MPO:t=3.503,P=0.0128),抑制脑血肿体积扩大(t=2.486,P=0.0486),减轻脑水肿(t=5.369,P=0.0126),从而改善脑出血后的继发性脑损伤。结论脑出血后Galectins-8一定程度上加重了继发性脑损伤的程度,可能成为治疗脑出血新的潜在治疗靶点。

2型糖尿病患者血清半乳糖凝聚素-3水平与牙周炎的相关性研究

目的探讨血清半乳糖凝聚素-3(Galectin-3)水平与2型糖尿病(T2DM)患者牙周炎发病风险的相关性。方法选取2021年7月—2022年11月在潍坊医学院附属潍坊市人民医院内分泌科就诊的T2DM患者140例,根据是否合并牙周炎分为T2DM不伴牙周炎组(T2DM组,n=67)和T2DM伴牙周炎组(T2DMP组,n=73),同期选取口腔科门诊血糖正常的非牙周炎志愿者65例为健康对照组(NC组)。采集所有受试者血液标本,检测并比较3组血清Galectin-3水平及相关实验室指标。结果NC组、T2DM组和T2DMP组血清Galectin-3水平分别为3.81(3.49,4.15)、4.82(4.25,5.26)和6.83(5.19,7.28)ng/mL,采用多元线性回归模型校正基线资料影响后,T2DMP组和T2DM组血清Galectin-3水平比NC组显著升高(均P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,血清Galectin-3水平与稳态模型胰岛素抵抗指数(β=0.254,95%CI:0.089~0.419,P=0.003)、糖化血红蛋白A1c(β=0.397,95%CI:0.049~0.745,P=0.026)和临床附着丧失(β=0.298,95%CI:0.024~0.572,P=0.033)独立正相关。校正协变量影响后,二分类Logistic回归结果显示,血清Galectin-3水平与T2DM患者牙周炎发病风险显著相关(OR=2.146,95%CI:1.260~3.655,P=0.005);趋势检验显示,T2DM患者牙周炎发病风险随着血清Galectin-3三分位数分组水平增加而增加(Ptrend=0.011)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清Galectin-3预测T2DM伴发牙周炎的曲线下面积(AUC)为0.861(95%CI:0.801~0.920,Z=11.806,P<0.001)。结论T2DM伴牙周炎患者的血清Galectin-3水平升高;血清Galectin-3水平与T2DM患者牙周炎发病风险存在相关性。

血浆半乳糖凝集素-3与房颤左心耳重塑和血栓形成的关系

目的 探讨血浆半乳糖凝集素-3水平(Gal-3)与房颤(AF)患者左心耳(LAA)重塑和血栓形成的关系。方法 本研究入选了2015年1月—2017年2月期间住院的153名非瓣膜性房颤患者,其中阵发性房颤58例,持续性房颤55例,永久性房颤40例。通过食道超声评估LAA的形态和收缩功能,同时应用酶联免疫吸附法测定患者血浆Gal-3水平。结果 经食道超声检查共发现22例LAA血栓形成,其中阵发性房颤组2例、持续性房颤组11例、永久性房颤组9例。不同类型房颤患者之间,LAA形态和收缩功能存在显著性差异。血浆Gal-3水平在不同类型房颤中也存在明显的差异,持续性或永久性房颤患者的Gal-3水平显著高于阵发性房颤(P<0.01)。Gal-3水平升高与LAA容积增加、 LA射血分数降低、 LAA峰值血流速度降低、 LAA血栓形成密切相关。多变量Logistic回归分析提示Gal-3是房颤患者LAA血栓形成的独立预测因素之一。结论 房颤患者血浆Gal-3水平升高与LAA重塑密切相关,Gal-3水平升高可能是LAA血栓形成的独立预测因子之一。

血清半乳糖凝集素-1、凝集素-3水平与阿尔茨海默病临床特征相关性及其诊断价值研究

目的探讨血清半乳糖凝集素-1(Gal-1)、凝集素-3(Gal-3)水平与阿尔茨海默病(AD)患者认知功能及日常生活能力的相关性,以期为AD的临床诊疗提供循证依据。方法选择2021年1月至2023年1月该院收治入院62例AD患者列入观察组,同期选择56名健康志愿者为对照组,采用酶联免疫吸附法检测两组对象血清Gal-1、Gal-3水平。并运用简易智力状态检查量表(MMSE)、日常生活量表(ADL)评估其认知功能及日常生活能力。采用Pearson相关分析观察组血清Gal-1、Gal-3水平与MMSE、ADL评分的相关性;并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析Gal-1、Gal-3在AD中的诊断效能。结果观察组血清Gal-1水平、MMSE、ADL评分低于对照组,Gal-3水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。Pearson相关分析显示:观察组MMSE、ADL评分与血清Gal-1水平均呈正相关(r=0.422、0.385,P<0.05),与血清Gal-3水平均呈负相关(r=-0.481、-0.356,P<0.05)。ROC曲线显示:Gal-1、Gal-3对AD的诊断效能较高,其ROC曲线下面积(AUC)分别为0.725、0.759,灵敏度分别为72.6%、75.8%,特异度分别为66.1%、62.5%,Gal-1、Gal-3两项标志物联合检测的AUC为0.826,灵敏度和特异度为82.3%、73.2%。结论AD患者血清Gal-1水平降低,Gal-3水平升高,这与其认知功能和日常生活能力密切相关。血清Gal-1、Gal-3有望成为临床辅助诊断AD的潜在生物标记物。

慢性心力衰竭病人血清半乳糖凝集素-3、炎症反应与心功能及MACE的相关性分析

目的:分析血清半乳糖凝集素-3(Gal-3)及炎症反应与慢性心力衰竭病人心功能和心脏主要不良心脏事件(MACE)的相关性。方法:选取2019年4月—2020年6月在上海中医药大学附属曙光医院心血管内科诊断为慢性心力衰竭病人138例为试验组,选取同时期健康体检者62名为对照组。观察血清Gal-3及炎症反应因子超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平变化,分析其与心功能指标[左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)及左室射血分数(LVEF)]及3个月内发生MACE的相关性。结果:试验组血清Gal-3、hs-CRP、TNF-α及IL-6水平高于对照组(P<0.01)。慢性心力衰竭病人心功能分级越高,Gal-3、hs-CRP、TNF-α及IL-6水平越高(P<0.05)。试验组血清Gal-3和炎症反应因子与LVESD、LVEDD呈正相关(P<0.01),与LVEF呈负相关(P<0.01)。发生MACE病人血清Gal-3和炎症反应因子高于未发生MACE病人(P<0.05)。结论:慢性心力衰竭病人血清Gal-3及炎症反应因子水平升高,对心功能及MACE发生情况有影响,提示Gal-3及炎症反应可辅助判断慢性心力衰竭病情严重程度及预后。

矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对水中丙溴磷的光降解抑制效应

为明确丙溴磷在水中的光降解行为和黄酮类化合物矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对丙溴磷光降解作用效应和机制,研究了高压汞灯光照下矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对不同初始浓度丙溴磷光降解的影响,分别通过PNDA捕获羟基自由基和离子色谱法研究了丙溴磷光降解过程中羟基自由基和溴离子含量变化情况,并利用LC-MS-MS确定了丙溴磷光降解的初级产物。结果表明:高压汞灯光照下,3种浓度丙溴磷(5、25和50μmol·L^(-1))的光降解半衰期分别为8.97、12.36和13.15 min;加入摩尔浓度比1∶5的矢车菊素-3-O-葡萄糖苷后,丙溴磷的光降解半衰期分别延长了1.65倍、3.93倍和5.71倍。丙溴磷光降解过程中产生了羟基自由基,加入矢车菊素-3-O-葡萄糖苷后羟基自由基含量骤减;丙溴磷光降解反应体系中丙溴磷的降解摩尔量与溴离子产生摩尔量呈1∶1关系,而加入矢车菊素-3-O-葡萄糖苷后,溴离子产生摩尔量显著减少。丙溴磷初级光降解产物是O-(2-氯苯基)-O-乙基-S-丙基-硫代磷酸酯,添加矢车菊素-3-O-葡萄糖苷后不改变丙溴磷的光降解路径。研究结果将有助于明确丙溴磷在环境中的行为,尤其是环境中的黄酮类化合物对于丙溴磷光降解的影响效应,从而为评估丙溴磷使用后的潜在环境安全风险提供依据。

血清半乳糖凝集素-3、心房颤动血栓危险度评分及超声心动图与阵发性房颤患者冷冻球囊导管消融术后复发的关系

目的探讨血清半乳糖凝集素-3(galactose lectin-3,Gal-3)、心房颤动血栓危险度评分(AF recurrence risk score,CHA2DS2-VASc评分)、超声心动图参数的变化与阵发性房颤(paroxysmal atrial fibrillation,PAF)患者冷冻球囊导管消融(cryoballoon catheter ablation,CBCA)术后复发的关系。方法本研究采取病例对照回顾性研究方法,选取河北省秦皇岛市第一医院2018年5月至2021年4月采取CBCA手术治疗的PAF且术后1年内出现心房颤动复发的患者40例作为复发组,另外选取同期接受CBCA手术且未复发的PAF患者60例作为对照组,通过查阅两组患者CBCA术前的血清Gal-3、CHA2DS2-VASc评分、超声心动图参数指标,并采用多因素logistic回归模型分析各项指标与术后心房颤动复发的关系。结果复发组患者的左心房容积、左心耳分叶数、左心耳容积测定值均大于对照组,差异有显著性(P<0.05);复发组患者左心耳射血分数低于对照组,差异有显著性(P<0.05);复发组患者血清Gal-3水平高于对照组,复发组CHA2DS2-VASc评分高危患者占比大于对照组,差异有显著性(P<0.05);Logistic回归模型结果显示,心房颤动病程延长、NT-proBNP水平升高,左心房容积、左心耳分叶数、左心耳容积测定值增大,左心耳射血分数降低,Gal-3水平升高、CHA2S2-VASc评分为高危是PAF患者CBCA术后是否复发的独立危险因素(P<0.05)。结论PAF患者的左心耳功能受损、血清Gal-3升高及CHA2DS2-VASc评分增高与患者CBCA术后发生复发具有密切的相关性。

矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制动力学

通过超滤-高效液相色谱、酶动力学以及分子对接等方法研究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性抑制的机制。结果表明,矢车菊素-3-O-葡萄糖苷以可逆非竞争性的方式抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的活性。此外,荧光猝灭分析结果表明,在疏水作用力驱动下,矢车菊素-3-O-葡萄糖苷可与两种酶结合生成复合物。分子对接结果显示,矢车菊素-3-O-葡萄糖苷通过氢键与疏水作用力与α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的关键氨基酸残基相互作用,其结合能分别为-7.8 kcal/mol和-9.8 kcal/mol。本研究为矢车菊素-3-O-葡萄糖苷作为功能性膳食食品中α-淀粉酶/α-葡萄糖苷酶的潜在抑制剂的开发提供了新思路。

D-阿洛糖下调半乳糖凝集素-3抑制AMPK/mTOR通路减轻脑缺血再灌注损伤

目的探讨D-阿洛糖(D-allose)对小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的神经功能恢复、半乳糖凝集素-3(Gal-3)、腺苷一磷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)及部分炎症因子表达的影响。方法C57BL/6雄性小鼠50只,随机分为对照组(Con组)、假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注损伤组(MCAO组)、脑缺血再灌注损伤+D-阿洛糖组(MCAO+D-allose组)及脑缺血再灌注损伤+改良柑橘果胶组(MCAO+MCP组)。采用线栓法建立大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型。造模成功后对小鼠进行Longa神经功能评分及转棒行走评分;采用TTC染色法观察脑梗死灶体积;通过Western blot及RT-PCR技术检测Gal-3、自噬相关分子的表达水平;免疫荧光技术检测脑组织中Gal-3的分布情况;试剂盒检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-8分泌。结果相较于Con组和Sham组,MCAO模型可增加小鼠神经功能评分(P<0.01)、增加脑梗死体积(P<0.01)、上调Gal-3的表达并增强自噬(P<0.01)。给予D-阿洛糖及Gal-3抑制剂MCP治疗后可改善神经功能障碍、减小脑梗死体积(P<0.01),并降低Gal-3的表达(P<0.01),抑制AMPK磷酸化,促进mTOR磷酸化,抑制自噬(P<0.01)。结论D-阿洛糖可有效促进CIRI小鼠神经功能恢复和减小梗死灶体积,其机制可能是通过下调Gal-3的表达进而抑制组织损伤后细胞过度自噬,并减少TNF-α,IL-8等炎性因子释放,从而发挥神经保护作用。

子宫内膜癌组织中基质金属蛋白酶-14及半乳糖凝集素-3表达、血清糖类抗原125水平与临床病理特征的关系

目的分析子宫内膜癌(EC)组织中基质金属蛋白酶(MMP)-14、半乳糖凝集素-3(Gal-3)的表达及其与临床病理特征的相关性。方法选取2019年1月至2021年10月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的120例EC患者作为研究对象,记录患者的临床病理特征,并检测患者癌组织中MMP-14、Gal-3的表达,分析二者与临床病理特征的关系。结果G3、Ⅲ期和Ⅳ期、肌层浸润≥1/2及淋巴结转移的EC患者组织中MMP-14及Gal-3阳性率、血清糖类抗原125(CA-125)水平均高于G2和G1、Ⅰ期和Ⅱ期、肌层浸润<1/2及淋巴结未转移的患者,差异具有统计学意义(P<0.05);EC患者组织中MMP-14、Gal-3表达及血清CA125水平与淋巴结转移、病理分级、肌层浸润及病理分期呈正相关(r>0,P<0.05)。结论不同临床病理特征的EC患者组织中MMP-14、Gal-3阳性表达率及血清CA125水平存在差异,且其与临床病理特征存在一定关系。

黑米花色苷矢车菊素-3-O-β-葡萄糖苷对脂多糖诱导的人THP-1单核细胞炎症损伤的保护作用

单核细胞介导的炎症反应在动脉粥样硬化发生和发展过程中起关键作用。花色苷是一种具有多种生物学活性的多酚类黄酮化合物,富含于各种深色的蔬菜、水果及谷类中,其中矢车菊素-3-O-β-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-β-glucoside,Cy-3-g)是花色苷中重要的单体,本研究旨在探讨黑米来源的Cy-3-g对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人单核白血病细胞(Tohoku hospital pediatrics-1,THP-1)炎症损伤的作用及可能的分子机制。采用乙醇-盐酸溶液浸提、大孔树脂吸附洗脱等步骤得到黑米花色苷粗提物,然后用中压液相层析联合紫外检测提取得到纯化的Cy-3-g(纯度>96.5%)。用不同质量浓度(0、0.10、0.25μg/mL和0.50μg/mL)Cy-3-g与THP-1细胞共孵育4 h,然后加入LPS(质量浓度50 ng/mL)与细胞继续孵育48 h,用酶联免疫吸附试验法测定培养液中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-8、IL-10和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,用定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、Toll-样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)和核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)p65的mRNA表达水平,用Western blot蛋白免疫印迹法检测TLR4、NF-κB p65、核因子κB抑制因子(inhibitor of NF-κB,IκBα)蛋白表达水平。结果表明,与溶剂对照组相比,LPS诱导的THP-1细胞IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA相对表达量和释放水平可被不同质量浓度Cy-3-g显著抑制(P<0.05、P<0.01、P<0.001),在LPS作用下,质量浓度0.25、0.50μg/mL Cy-3-g能够显著促进IL-10 mRNA表达(P<0.01、P<0.001),质量浓度0.10、0.25、0.50μg/mL Cy-3-g能够显著促进IL-10释放(P<0.05、P<0.01、P<0.001),但是不同质量浓度Cy-3-g对LPS诱导的细胞IL-8 m RNA表达水平和释放水平的促进作用无显著差异(P>0.05)。质量浓度0.25、0.50μg/m L Cy-3-g能够显著抑制TLR4和NF-κB p65的m RNA和蛋白表达(P<0.05、P<0.001、P<0.01),同时能够抑制IκBα和NF-κB p65的磷酸化,并抑制LPS对IκBα的降解作用。与溶剂对照组相比,NF-κB的特异性抑制剂Bay11-7082可高度显著下调LPS诱导的THP-1细胞IL-1β、IL-6和TNF-α释放水平(P<0.001),但是与质量浓度0.50μg/mL Cy-3-g联合使用时无协同抑制效果(P>0.05)。综上,黑米花色苷Cy-3-g能够对LPS诱导的THP-1单核细胞炎症损伤起到保护作用,其机制可能是下调TLR4/NF-κB介导的信号通路。