知母皂苷A-Ⅲ、知母皂苷C对照品的制备与鉴定

目的:研究知母中知母皂苷A-Ⅲ、知母皂苷C对照品的制备方法,并对其进行鉴定。方法:采用大孔吸附树脂、硅胶色谱、Sephadex LH-20色谱、反相ODS色谱分离制备对照品,采用红外、质谱、核磁等波谱方法进行结构鉴定。结果:从知母中分离得到知母皂苷A-Ⅲ与知母皂苷C对照品,纯度均>98%。结论:本试验结果可为知母皂苷的新药开发提供物质基础。

HPLC-ELSD法同时测定知母药材中2种皂苷含量

目的:用HPLC-ELSD同时测定知母药材中2种皂苷的含量。方法:采用Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水梯度洗脱,流速1 mL.min-1,柱温为30℃。蒸发光散射检测器漂移管温度50℃,蒸发温度70℃,以氮气为雾化气,压力为1.03×105 Pa。结果:知母皂苷C在0.310～3.10μg,知母皂苷AⅢ在0.323～3.23μg,进样质量的对数值与峰面积的对数值呈良好的线性关系。知母皂苷C回归方程为lgA=1.254 2lgM+5.734 7,r=0.999 5,测定的平均回收率(n=6)98.1%,RSD2.0%;知母皂苷AⅢ回归方程为lgA=1.328 4lgM+5.937,r=0.999 6,测定的平均回收率(n=6)97.3%,RSD1.5%。结论:建立的含量测定方法准确、快速,是控制知母药材质量较理想的方法。对我国北方主要知母产地药材中两种皂苷含量测定和比较表明不同产地野生知母质量差异较大。

知母的HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的 采用HPLC-ELSD法建立知母的指纹图谱,全面综合反映和控制知母整体质量。方法 Thermo色谱柱C8（250mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈（A）-0.2%冰醋酸水溶液（B）梯度洗脱：0~5 min,5%~7%A;5~15 min,7%~15%A;15~36 min,15%~22%A;36~43 min,22%~35%A;43~51 min,35%~50%A;51~60 min,100%A;柱温25℃,体积流量1 m L/min,ELSD检测器雾化器（空气）体积流量2.6 L/min,漂移管温度100℃,进样量20μL。结果 在60 min内获得了较好分离效果的特征图谱,确定12个主要特征峰作为共有峰,建立了能够使多数化学成分色谱分离的知母药材HPLC-ELSD指纹图谱。结论 该方法简便、可靠,并且同时指认了知母中皂苷类和双苯吡酮类成分,能较全面地反映知母整体性的化学成分特征,可用于全面有效地控制知母的质量。