知母-黄芪散复方通过TNF-α/JNK通路改善阿尔茨海默症大鼠认知障碍的研究

目的研究知母-黄芪散复方通过TNF-α/JNK通路改善阿尔茨海默症大鼠认知障碍的作用机制及其药效初探。方法取雄性SD大鼠50只,根据基础血糖和体质量水平随机分为5组,每组10只,即正常组,模型组,知母组,黄芪散组,知母-黄芪散组;采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合喂食高脂饲料+AlCL_3灌胃的方法建立模型,连续灌胃20周。分别在给药第8、16周时,测定空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平;结合Barnes迷宫检测大鼠的认知状况;给药20周时,测定血浆TNF-α、P-JNK、Aβ_(1-42)蛋白及INS水平,结合Morris水迷宫检测大鼠的认知能力;给药20周结束,解剖保存大鼠脑组织、海马组织作病理形态学观察。结果给药8周、16周时,与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖(FPG)、TC、TG水平均显著性升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,知母-黄芪散组可有效降低模型大鼠FPG、TC、TG水平(P<0.05);给药20周,与正常组比较,模型组大鼠血浆TNF-α、P-JNK、Aβ_(1-42)水平也明显升高(P<0.01);与模型组比较,经连续给药后,知母组,知母-黄芪散组大鼠血浆TNF-α、P-JNK、Aβ1-42水平均显著降低(P<0.05,P<0.01);行为学实验结果显示,与模型组比较,知母-黄芪散组表现出较显著的改善记忆、认知行为的作用(P<0.05,P<0.01);组织形态学结果显示,正常组大鼠海马CAI区神经元排列整齐,形态规则,着色均匀;与模型组比较,知母组可有效改善大鼠海马组织神经元形态及细胞排列形态,修复神经损伤,大鼠胰腺病理形态改变与海马CAI区神经元病理改变具有一定正相关趋势。结论知母组及知母-黄芪散组不仅降糖效果明显,并且可以通过调节TNF-α/JNK通路改善STZ+高脂饲料+AlCL_3灌胃喂养诱导实验性阿尔茨海默症大鼠认知、记忆能力。

黄芪-知母对大鼠糖尿病认知功能障碍及海马组织JAK2/STAT3信号通路的影响

目的观察黄芪-知母对糖尿病认知功能障碍(DCI)大鼠的影响,评价其神经保护作用并探讨其机制。方法空白组大鼠采用普通饲料喂养,其余大鼠采用高脂高糖饲料联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)(35 mg·kg^(-1))建立DCI大鼠模型。造模成功后将大鼠随机分成模型组(Model)、黄芪-知母低剂量组[HQ-ZM-L,2.4 g/(kg·d)]、黄芪-知母高剂量组[HQZM-H,4.8 g/(kg·d)]和二甲双胍组[Met,0.02 g/(kg·d)],每组6只,给药30 d,给药期间每周测量大鼠体重及空腹血糖,给药结束后采用Morris水迷宫检测DCI大鼠空间记忆能力,测试结束后取大鼠全脑进行病理切片,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马组织形态变化,ELISA检测大鼠海马血清中胰岛素(INS)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,蛋白免疫印迹法检测大鼠海马组织中JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达情况。结果与空白组相比,模型组大鼠体重显著下降,空腹血糖显著上升;逃避潜伏期显著延长,穿越平台次数显著减少;海马组织神经细胞形态被破坏;IL-1β、TNF-α、MDA水平显著升高,INS水平及SOD含量显著下降;大鼠海马组织中p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平升高。与模型组相比,给药各组大鼠体重、空腹血糖均得到控制;逃避潜伏期均显著缩短,穿越平台次数及在目标区域活动时间和距离均增加;大鼠海马组织神经细胞形态破坏程度明显改善;IL-1β、TNF-α、MDA水平下降,INS水平及SOD含量升高;p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平降低。结论黄芪-知母可以显著改善DCI大鼠的认知障碍,其机制可能与抑制JAK2/STAT3蛋白磷酸化水平,减轻炎症反应,修复大鼠海马神经损伤有关。

HPLC测定知母-黄芪药对中芒果苷、毛蕊异黄酮苷和毛蕊异黄酮

目的:建立知母-黄芪中芒果苷、毛蕊异黄酮苷和毛蕊异黄酮3种有效成分的含量测定方法。方法:采用HPLC,Phenomenex Luna C18(4.8 mm×250 mm,5μm)色谱柱,加预柱(Security Guard,C18,3.0 mm×4.0 mm,Phenomenex);以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,检测波长260 nm。结果:芒果苷、毛蕊异黄酮苷和毛蕊异黄酮的线性范围分别为36.733～550.999 ng,33.376～166.88 ng,44.544～222.72 ng,相关系数(R2)均>0.999,平均加样回收率分别为102.47%,102.38%,100.20%,其RSD分别为2.23%,2.86%,2.06%。结论:方法简便快速,重复性良好,结果准确可靠,可用于知母-黄芪中芒果苷、毛蕊异黄酮苷和毛蕊异黄酮的含量测定。

黄芪知母参七汤联合西药治疗糖尿病肾病Ⅳ期(气阴两虚)随机平行对照研究

[目的]观察黄芪知母参七汤联合西药治疗糖尿病肾病Ⅳ期(气阴两虚)疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将45例门诊患者按就诊顺序号抽签随机分为两组,糖尿病肾脏疾病健康知识宣传,畅情志,适量运动,预防感冒;低盐低脂糖尿病饮食,保证每日总热量摄入,均衡饮食营养;积极给予抗感染、抗氧化及改善微循环等对症处理,禁输注白蛋白。对照组23例精蛋白生物合成人胰岛素注射液,1支/次,1次/d,皮下注射;卡托普利,12.5mg/次,2～3次/d;辛伐他汀,10mg/次,1次/d;以上药物均根据患者实际情况调整剂量。治疗组22例芪知母参七汤(黄芪30g,知母15g,地黄熟、构祀、黄柏、泽泻各12g,肉从蓉、三七、赤芍、丹参各10g),半袋/次,热开250mL冲服,2次/d;西药治疗同对照组。连续治疗4周为1疗程。观测临床表现、中医证候、空腹血糖(GLU)、糖化血红蛋白(GHb)、尿微量白蛋白(ALB)、血清肌酐、血清尿素氮、血清胱抑素(Cys-c)、血清视黄醇结合蛋白(RBP)、尿β2微球蛋白(尿β2-MG)、尿α1微球蛋白(尿α1-MG)、肾脏体积、不良反应。治疗1疗程(4周),判定疗效。[结果]治疗组显效15例,有效5例,无效3例,总有效率86.96%;对照组显效7例,有效4例,无效11例,总有效率50.00%;治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。中医证候疗效治疗组显效16例,有效5例,无效2例,总有效率91.30%;对照组显效6例,有效7例,无效9例,总有效率59.09%;治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。GLU、GHb、ALB、尿微量白蛋白/尿肌酐、Cys-c、RBP、尿β2-MG、尿α1-MG、RI两组均有改善(P<0.01),治疗组改善优于对照组(P<0.05,P<0.01),肾脏体积治疗前后两组均无显著变化(P>0.05)。[结论]黄芪知母参七汤联合西药治疗糖尿病肾病Ⅳ期(气阴两虚),疗效满意,无严重不良反应,值得推广。