短小芽孢杆菌HN-10抗菌肽P-1对粉红单端孢细胞膜结构和活性氧代谢的影响

粉红单端孢(Trichothecium roseum)是多种植物及采后果蔬重要的病原菌,该文探讨了短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)HN-10抗菌肽P-1对粉红单端孢细胞膜结构以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)代谢的影响。通过平板培养(牛津杯法)和液体培养体系考察了B.pumilus HN-10抗菌肽P-1对粉红单端孢菌体生长的抑制作用;采用碘化丙啶染色和透射电镜技术,动态观察了抗菌肽P-1对液态培养12 h的内粉红单端孢细胞壁、膜结构的影响;通过液态培养试验体系,分析了抗菌肽P-1对膜通透性的影响,并基于膜脂过氧化反应研究了抗菌肽P-1对粉红单端孢ROS及其代谢产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的影响。结果表明,固态、液态培养的粉红单端孢菌体生长受到明显抑制,随着抗菌肽P-1处理时间的延长,粉红单端孢孢子数逐渐增多,抗菌肽P-1对粉红单端孢孢子壁、膜造成了局部损伤,并出现缺口,导致细胞质大量流出,孢子变形。抗菌肽P-1处理使得菌体麦角甾醇的含量减少,第7天时,比对照组低35%。同时,抗菌肽P-1处理显著增大了N-苯基-1-萘胺的摄取率、相对电导率,第7天时,分别比对照组高24%、35%。此外,抗菌肽P-1处理使胞内·O_(2)^(1)含量显著增高(P<0.05),引起了细胞抗氧化超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶系统平衡的破坏,加剧了脂质过氧化和蛋白羰基化程度,MDA含量增加,最终抑制了菌体的生长。

短小芽孢杆菌抗菌代谢物对斑马鱼的毒性研究

试验研究了短小芽孢杆菌抗菌代谢物对斑马鱼96 h急性毒性并同时检测了乙酰胆碱酯酶、SOD、MDA、Na^+K^+-ATP酶等生化指标。结果表明:短小芽孢杆菌代谢物对斑马鱼的96 h LC50为1.606 mg/l,95%置信区间为1.207~2.199 mg/l,代谢物浓度为1.5 mg/l以下时,短小芽孢杆菌抗菌代谢物对斑马鱼机体并没有造成损伤,但随着时间及浓度的增加,抗菌代谢物对斑马鱼的毒性作用开始明显,表现为MDA、Na+K+-ATP酶含量上升、SOD、乙酰胆碱酯酶含量下降,并有明显的时间效应、浓度效应关系。

重金属污染土壤微生物的分离与研究

为了解重金属污染土壤中微生物的群落状况,摸索土壤微生物改良方法,试验对不锈钢厂排污口周边土壤中的铅(Pb)、铬(Cr)、镍(Ni)、铜(Cu)、铁(Fe)、锌(Zn)采用火焰原子吸收光谱法进行检测,针对土壤重金属含量设计选择培养基进行微生物分离,然后采用基质解析飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)方法对分离的微生物进行鉴定,并在重金属培养基中采用数学方法建立生长模型。结果表明,不锈钢厂污水污泥中Fe含量高达2.0×10~5 mg/kg,Cr含量也达到4.7×10~4 mg/kg。采用高Fe培养基在污染土壤中筛选到1株微生物,经质谱鉴定为希瓦氏菌;在高Cr培养基中筛选到1株微生物,经鉴定为短小芽孢菌;2株微生物在高浓度重金属盐培养基中可耐受,但无重金属高营养培养基传代培养2代后重金属耐受能力消失。