多肽BR0336在小鼠2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝炎模型上的初步药效学研究

目的研究多肽BR0336注射液在STZ-HFD诱导的雄性C57BL/6小鼠2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型上的药效学。方法新生雄性小鼠通过链脲佐菌素诱导建立T2DM模型,从1个月龄起开始给予高脂饲料喂养,根据空腹血糖和体重随机分为模型组、替西帕肽(TZP)的0.15 mg·kg^(-1)阳性对照组和BR0336的低(0.05 mg·kg^(-1))、中(0.15 mg·kg^(-1))、高(0.5 mg·kg^(-1))剂量组,通过与正常对照组比较,考察小鼠体重、摄食量、空腹血糖、血清胰岛素、糖化血红蛋白、肝功能和血脂情况,并进行肝脏组织病理学NAS和纤维化分析。结果BR0336各剂量组能显著降低模型小鼠的体重、摄食量、空腹血糖、胰岛素和HbA1c%,减低肝脏NAS评分和纤维化率,并对模型动物的肝功能和血脂异常具有良好保护作用。与阳性对照组相比,等剂量BR0336在动物的摄食量、胰岛素、肝功能和血脂生化方面表现更优,能更有效延缓NASH和纤维化进程。结论BR0336对STZ-HFD诱导的T2DM合并NASH模型小鼠在高血糖和脂质代谢紊乱方面具有一定治疗作用。

非酒精性脂肪性肝炎AML-12体外模型建立

目的分析并评价不同比例浓度梯度OA/PA诱导的非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)炎症体外模型。方法通过采用不同比例浓度梯度OA/PA(2∶3或2∶1)诱导AML-12细胞建立NASH炎症体外模型;收集细胞OA/PA(500μmol/L∶250μmol/L)诱导AML-12株CCK-8检测细胞毒性或存活率;油红O染色观察其胞内脂肪变性;qRT-PCR或Western blotting检测细胞内TNF-α、IL-6和TGF-β1 mRNA含量。结果得出不同比例浓度的OA/PA混合药物刺激24 h或48 h后,OA/PA以2∶1比例(500μmol/L+250μmol/L)等摩尔比混合后,细胞毒性明显低于2∶3的OA/PA(200μmol/L+300μmol/L)浓度(P<0.05);刺激48 h后,模型组细胞内脂滴及IL-6和TNF-αmRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论以2∶1比例的OA(500μmol/L)/PA(250μmol/L)混合药物诱导下成功建立NASH炎症AML-12体外模型。

长效人工肝细胞生长因子模拟分子可缓解非酒精性脂肪性肝炎

据Rojas-chaverra NM[iScience,2024,27(8):110426-110426.]报道,日本金泽大学癌症研究所和纳米生命科学的研究人员利用环肽和蛋白质工程的融合技术,开发出了一种可皮下注射的长效人工肝细胞生长因子(HGF)模拟分子。研究人员在小鼠模型中证实这种分子能改善非酒精性脂肪性肝炎(NASH)引起的肝纤维化。

CT影像组学识别非酒精性脂肪性肝炎的应用研究

目的构建并验证基于CT的全肝影像组学模型用于识别非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)。方法回顾性选取2018年6月至2022年12月浙江省人民医院收治的122例非酒精性脂肪性肝病患者,其中NASH患者52例。将纳入患者按7:3比例随机分为训练组(n=85)和测试组(n=37),选取每例患者的肝脏平扫图像提取影像组学特征,对训练组提取的特征进行降维并建立影像组学标签,之后联合相关临床特征构建联合预测模型用于识别NASH患者,使用受试者操作特征曲线及测试组数据评估模型的诊断效能。结果联合预测模型基于年龄和影像组学标签构建,该模型在训练组和测试组中识别NASH患者的诊断效能分别为0.899和0.880,特异性分别为91.2%和88.1%,敏感度分别为86.7%和88.2%。校准曲线在训练组和测试组中也显示出良好的校准性能。结论基于肝脏CT的影像组学模型可定量评估NASH,有望为临床提供一种无创性评价工具。

基于贝叶斯网络模型分析乙型肝炎合并非酒精性脂肪肝患者中乙型肝炎病毒滴度与慢加急性肝衰竭发生的关系

目的 基于贝叶斯网络模型探讨乙型肝炎病毒滴度(HBV DNA)与慢性乙型肝炎(CHB)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者慢加急性肝衰竭(ACLF)发生的关系。方法 选择2018年9月—2022年1月广西河池市人民医院收治的175例合并NAFLD的CHB患者作为NAFLD组,另选择175例单纯CHB的患者作为对照组,比较两组患者的临床资料以及发生ACLF的概率。NAFLD组根据患者是否并发ACLF分为ACLF组(n=84)和非ACLF组(n=91)两个亚组。比较患者的临床资料;采用多因素logistic回归分析CHB合并NAFLD患者并发ACLF的影响因素;分析各影响因素与ACLF发生率以及各影响因素间的相关性;构建贝叶斯网络模型,使用Netica软件进行贝叶斯网络推理,并对模型效能进行评价。结果 NAFLD组ACLF的发生率为48.00%,显著高于对照组。ACLF组和非ACLF组在年龄、MELD评分、血脂异常、HBeAg阳性、lgHBV DNA、尿素氮(BUN)、总胆红素(TBIL)、血浆凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、国际标准化比率(INR)、血小板(PLT)、白蛋白(ALB)、胆碱酯酶(CHE)、凝血酶原活动度(PTA)方面的差异均具有统计学意义(P均<0.05)。多因素logistic回归分析显示:年龄、lgHBV DNA、TBIL、PT、INR是CHB合并NAFLD患者并发ACLF的独立危险因素(P<0.05),HBeAg阳性、CHE、PTA是保护因素(P<0.05)。相关性分析结果显示:年龄、lgHBV DNA、TBIL、PT、INR与ACLF均呈明显正相关(P<0.05),HBeAg阳性、CHE、PTA与ACLF均呈明显负相关(P<0.05);年龄、lgHBV DNA、TBIL、PT、INR之间均呈明显正相关(P<0.05),分别与HBeAg阳性、CHE、PTA呈明显负相关(P<0.05)。贝叶斯网络模型显示:年龄、HBeAg阳性、PT、TBIL、PTA、INR等变量通过复杂的网络关系与ACLF建立联系,lgHBV DNA、INR、CHE与ACLF的发生有直接联系;节点治疗方式通过影响TBIL、PTA等中间节点联系,间接影响ACLF的发生。结论 HBV DNA滴度是CHB合并NAFLD患者并发ACLF的独立危险因素,对预测ACLF的发生以及控制ACLF病情发展具有重要意义。贝叶斯网络模型分析表明,HBV DNA水平与ACLF的发生有直接联系,且与多个节点之间存在直接或间接的关联,可作为临床预判ACLF发生的重要指标,具有临床应用价值。

金丝桃苷对小鼠酒精性脂肪肝炎的保护作用

为探究低、中、高剂量金丝桃苷对酒精饮食诱发的小鼠酒精性肝病的影响,该文建立短期酒精性脂肪肝炎模型(Gao-Binge模型),测定血清转氨酶、甘油三酯(triglyceride,TG)含量,以及肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,并对肝脏进行苏木精-伊红染色(hematoxylin and eosin staining,H&E)和油红染色观察肝脏组织病理学变化,免疫组化染色检测肝脏中性粒细胞浸润情况,最后利用实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)技术分析肝脏炎性细胞因子和趋化因子的表达。结果显示,酒精液体饲料喂养后,模型组小鼠出现脂肪性肝炎,而金丝桃苷能够降低血清转氨酶和TG含量,减少肝组织油红染色区域,降低肝脏MDA含量,提升SOD活性。此外,金丝桃苷抑制酒精饮食诱发的肝脏白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)表达,减少肝组织中性粒细胞浸润及其趋化因子表达,表明金丝桃苷可以通过降低肝脏脂质过氧化水平,抑制炎症反应来改善小鼠酒精性脂肪肝炎。

高脂饮食致大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化模型

目的:通过高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化模型。 方法:以普通饲料+100g/kg猪油+20g/kg胆固醇组成的高脂饲料喂养SD大鼠,并设普通饲料喂养大鼠作为对照,在实验4,8,12,16,24wk分批处死。测定血脂和血清转氨酶,并通过HE染色和VG苦味酸染色观察肝脏肝细胞脂肪变性、炎症和纤维化程度。 结果:2组大鼠体重均呈进行性增长,模型组大鼠4wk起肝指数(肝脏湿质量/体质量)明显升高,血清TCh水平8wk起明显升高,12～24wk血清ALT明显升高。模型组4wk大鼠出现肝细胞脂肪变性,8wk表现为单纯性脂肪肝,12-24wk进展为脂肪性肝炎,且24wk所有造模大鼠均出现窦周纤维化,1例出现桥接纤维化。 结论:持续24wk的高脂饮食就可建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化模型,该方法简便实用,成功率高。

非酒精性脂肪性肝炎动物模型的建立与应用

非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)是由单纯性脂肪肝发展至肝纤维化、肝硬化和肝癌的重要阶段。由于生活方式的改变,在我国NASH发病率呈明显增加趋势,许多学者都在着眼于研究NASH病因学的预防和治疗,而建立理想NASH动物模型是非常重要的研究工具。本文综述了国内外常用的NASH动物模型,包括营养失调性、复合因素诱导及特殊品系的脂肪性肝炎模型,详述了各种模型的造模方法及优缺点,为今后建立更稳定的动物模型提供支持。

游离脂肪酸诱导非酒精性脂肪性肝炎细胞模型的建立及动态监测

目的:研究游离脂肪酸(FFA)诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)细胞模型,动态观测细胞脂肪变性、炎症、过氧化损伤及糖转运缺陷发生发展的特点。方法:以HepG2细胞为实验对象,采用不同浓度游离脂肪酸(0.25mM,0.5mM,1mM)对HepG2细胞进行不同时间(12小时,18小时,24小时)的干预刺激,并通过油红O染色,酶联免疫的方法分别对细胞内脂肪变及细胞培养上清液中白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)进行测定评估。结果:FFA作用的实验各组,随着时间的延长及浓度的增加,细胞脂肪样变、IL-8、TNF-α、SOD、MDA及GLUT4均有不同程度的改变,以24小时0.5mM FFA、24小时1mM FFA最为明显,与同期空白对照组相比,其在IL-8、TNF-α、SOD、MDA、GLUT4的表达方面均有统计学意义(P<0.05),油红O染色可见典型的"印戒"状。结论:应用游离脂肪酸诱导建立体外NASH模型成模效果好,重复率高,以0.5mM FFA 24小时为佳。

大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型的制备

目的建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的动物模型。方法雄性SD大鼠20只,随机分为模型组(n=10)和正常对照组(n=10)。模型组喂养高脂饮食,即在普通饲料基础上加10%猪油、2%胆固醇、5%蛋黄粉。正常对照组喂养普通饲料。喂养12周后,观察-般情况,检测大鼠血清生化指标及炎症介质,并行肝组织病理检查。结果模型组体重、肝体比、血清甘油三脂(TG)、肿瘤坏死因子α(TNFα)均高于正常组;病理学均出现弥漫性肝细胞脂肪变性,且90%存在小叶内炎症,80%出现汇管区炎症;电镜示肝细胞索排列紊乱,胞浆脂滴大量出现、聚积、线粒体嵴肿胀,肝星形细胞和枯否细胞增生,细胞核变形,部分呈现核固缩表现。结论通过12周的高脂肪、高胆固醇饮食成功地制备出大鼠NASH模型。

不同饮食结构构建小鼠非酒精性脂肪性肝炎模型的实验研究

目的采用高果糖、高脂、复合高果糖饲料构建小鼠非酒精性脂肪性肝炎模型,探讨最佳饮食结构。方法将60只C57BL/6J雄性小鼠随机分为高果糖组、高脂组、复合组和对照组,比较造模4、8和12周各组间一般情况、肝功能、脂质代谢、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和病理学改变的差异。结果与对照组比较,造模组小鼠各时间点体质量、肝湿重和Lee's指数均明显升高(P<0.01);12周时复合组体质量增长较高脂及高果糖组更明显(P<0.05);H-E染色显示:造模组均有不同程度肝脏脂肪变,仅复合组肝小叶内见明显的炎症细胞浸润;血清检测结果显示:12周时复合组和高脂组总胆固醇、三酰甘油明显增高;复合组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、TNF-α、IL-6水平较高脂组、高果糖组升高明显。结论 12周的高脂、高糖饮食可成功构建适用于脂肪性肝炎研究的小鼠模型。

非酒精性脂肪性肝炎动物模型的研究进展

本文主要阐述了目前国内外常用的非酒精性脂肪性肝炎动物模型,包括营养失调性、药物中毒性、特殊品系及复合因素诱导的脂肪肝模型,详述了各种模型的造模方法、效果及模型优缺点。有研究表明,高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎动物模型在病因学、组织病理学和全身疾病背景方面均与人类非酒精性脂肪性肝炎极为相似,是研究非酒精性脂肪性肝炎发病机制和寻求临床治疗策略的一个很好的工具。文章同时对非酒精性脂肪性肝炎动物模型的前景进行了展望。

芦荟大黄素对非酒精性脂肪性肝炎细胞模型脂质过氧化损伤的影响

目的:探讨芦荟大黄素(aloe-elodin,AE)对非酒精性脂肪肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)细胞模型脂质过氧化损伤的影响。方法:将正常人肝细胞株L-02分为对照组和实验组,对照组用普通培养基,实验组按培养基含30%脂肪乳剂终浓度不同再分为0.25,0.5,0.75,1 m L/L组,培养72 h后予以油红O染色,观察细胞形态和细胞内脂肪滴数量,测定培养液谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、三酰甘油含量。选择最合适浓度(0.5 m L/L组)建立NASH模型,再设立对照组、模型组、实验组,实验组加入10-4,10-5,10-6mmol/L的AE,分别于培养24,48,72 h监测细胞内脂滴数量、三酰甘油含量和细胞培养液中ALT、AST、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、内毒素、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)等指标。结果:用含30%脂肪乳剂0.5 m L/L的培养液培养L-02细胞株72 h,成功建立NASH肝细胞模型。不同浓度AE干预NASH细胞72 h后,培养液中ALT、AST、丙二醛、内毒素、TNF-α等含量均较模型组明显下降,SOD含量较模型组明显升高(P<0.05)。结论:AE可改善肝细胞脂质过氧化程度,减轻炎症反应及细胞损伤。

非酒精性脂肪肝与脂肪性肝炎动物模型研究进展

非酒精性脂肪肝是无酒精滥用的包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化和肝硬化的肝病综合征,目前已成为广受关注的肝病医学难题。随着抗脂肪肝药物的深入研究,动物模型制作得到很好发展。近年来,在大鼠、沙鼠、小鼠、兔和小猪等动物种属成功地建立了食物、胃肠外营养与蛋氨酸胆碱缺乏等诱导的单纯性脂肪肝和脂肪性肝炎动物模型,这些模型为研究脂肪肝和脂肪性肝炎的发病机理与治疗提供了机会。每种动物模型各有优缺点,合理应用动物模型能更好地开展脂肪肝病的实验和临床研究。本文综述了非酒精性脂肪肝及脂肪性肝炎动物模型制作方法的若干研究进展。

胆宁片对高脂饮食大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型形成的影响

目的 高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型 ,观察中药胆宁片对造模形成的影响。方法 以连续16周的高脂饮食建立大鼠脂肪性肝炎模型 ,治疗组大鼠从高脂饮食 8周起加用胆宁片治疗。测定血脂和血清转氨酶 ,苏木精 伊红染色观察肝脏病理改变 ,并以正常饮食大鼠作为对照。结果 与正常组 (n =6)相比 ,模型组大鼠 (n =12 )血清TC、LDL C、ALT、AST水平显著升高 ,所有造模肝组织均呈现脂肪性肝炎改变 ,模型复制率为 10 0 %。与模型组相比 ,治疗组大鼠 (n =12 )血清TC、LDL C以及肝指数 ( 3 .91± 0 .5 3对 3 .48± 0 .2 9,P <0 .0 5 )显著下降 ,肝组织炎症活动计数显著降低 ( 5 .83± 2 .0 2对 4.2 3± 0 .64 ,P <0 .0 5 ) ,但仍显著高于正常对照组 ,并且血清转氨酶和肝脂肪变性程度在模型组和治疗组之间差异无显著性。结论 持续 16周的高脂饮食可成功复制大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型 ,胆宁片对模型大鼠血脂紊乱和肝组织炎症改变有一定改善作用。

慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病动物模型的建立

目的探索建立慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病动物模型的方法。方法筛选16只先天感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的雏麻鸭饲养至3周龄,随机分为对照组和模型组,每组8只,分别予普通饲料及填饲高糖高脂饲料3周,并在造模前、造模2周、造模3周分别观察鸭体质量,血糖、血脂、转氨酶等生化指标,DHBV DNA载量的变化,同时造模结束后观察肝脏病理形态学变化和肝指数。结果模型组鸭血糖(GIu)、血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、ALT、AST均高于对照组(P<0.01),且造模后各项指标明显高于造模前(P<0.01),模型组肝组织病理可见大量肝细胞脂肪变性;造模后2周、3周模型组DHBV载量比造模前有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过高糖高脂饲料填饲法成功建立乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病动物模型。

大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型的建立

目的建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型。方法16只雄性SD大鼠,适应性饲养1周后随机分为对照组和模型组,每组8只,对照组大鼠给予普通饲料喂养,模型组大鼠给予高脂饲料(在普通饲料内添加100g/L猪油、20g/L胆固醇),12周后处死实验动物,观察2组大鼠体重量、肝脏质重(湿)、血清生化指标(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、三酰甘油、游离脂肪酸、肿瘤坏死因子等)及肝细胞脂肪变性程度。结果模型组肝脏质量(湿)显著高于对照组(P<0.05);模型组肝细胞变性程度显著重于对照组(P<0.05);模型组谷丙转氨酶、谷草转氨酶、三酰甘油都显著高于对照组(P<0.05);2组大鼠游离脂肪酸水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论利用高脂饲料喂养的方法成功复制了NASH单纯脂肪性肝炎期模型。

大鼠非酒精性脂肪性肝炎常用模型探讨

本文主要阐述大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)常用模型,介绍模型的造模方法、效果及优缺点。由于生活方式的改变,NASH发病率呈明显增加趋势,现代医学证实部分NASH可发展为肝纤维化、肝硬化而导致严重后果,许多学者都在着眼于研究NASH的病因学及治疗和预防等,而建立理想的大鼠NASH模型是非常重要的研究工具,本文旨在对常用大鼠NASH模型,着重大鼠营养失调性脂肪肝模型进行探讨及分析。

低氧诱导的非酒精性脂肪性肝炎动物模型的构建

目的构建低氧诱导的非酒精性脂肪性肝炎动物模型。方法 50只大鼠分为正常组、低氧组、高脂组、低氧高脂组4组,分别给予正常饮食、腹腔内注射亚硝酸钠、高脂饮食、腹腔内注射亚硝酸钠+高脂饮食。检测4组大鼠生化指标(ALT、AST、AKP、TG)、透明质酸(HA)、动脉高铁血红蛋白及氧分压,并行肝组织HE与Masson染色及NASH评分。结果低氧高脂组大鼠的ALT、AST、AKP、TG、HA明显升高,NASH评分明显增加,肝组织可见明显的脂肪变性、炎症细胞浸润及纤维化。结论高脂饮食大鼠诱导单纯脂肪肝基础上给予腹腔注射亚硝酸钠能够建立低氧诱导的非酒精性脂肪性肝炎动物模型。

新型非酒精性脂肪性肝炎小鼠模型的建立

为了开发与人类非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholic steatohepatitis,NASH)特征相似的动物疾病模型,本试验利用肝脏特异性Dicer1基因敲除(KO)小鼠,经高脂高糖饮食诱导12周构建了一种新型NASH小鼠模型。试验分为4组包括正常饮食的野生型小鼠组(CW组)、正常饮食的KO小鼠组(CK组)、高脂高糖饮食的野生小鼠组(HW组)、高脂高糖饮食的KO小鼠组(HK组,本试验模型组)。研究结果显示,HK组小鼠体重和肝脏比重升高,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平显著升高;HK和HW组肾周白色脂肪和附睾白色脂肪比重均明显升高;血脂相关指标显示,HK组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDLC)水平明显升高;口服糖耐量测试(OGTT)结果显示,HW、HK组糖耐量降低;组织病理学方面,HK组和CK组均可见肝脏脂肪变性、肝小叶炎症及纤维化,且HK组程度更为严重;此外,HK组还可见肝细胞气球样,个别肝细胞胞浆内Mallory-Denk小体,以及单个肝细胞凋亡。而HW组仅存在肝细胞脂肪变性。油红O染色证实肝细胞中的空泡为脂肪滴。天狼星红染色显示,HK和CK组存在肝纤维化。综上所述,本试验构建了一种新型非酒精性脂肪性肝炎小鼠模型,与人类NASH在诸多方面特征相似,包括体重增长快、肝功异常、白色脂肪蓄积、血脂异常、糖耐量降低、以及NASH相关的肝脏病理特征。此外,该模型相对诱导周期短,且饮食结构与引起人类NASH的常见的膳食结构相似。这一新模型的建立将有助于NASH疾病机制以及治疗方面的研究。