ATX-shRNA表达质粒对肝癌细胞体外增殖和运动能力的影响

目的研究ATX基因短发夹状RNA(shRNA)质粒表达载体对人MHCC-97肝癌细胞ATX基因表达和增殖、运动能力的抑制作用。方法应用RT-PCR检测转染后肝癌细胞ATX mRNA的表达,同时应用MTT、细胞运动、侵袭实验检测其对人MHCC-97肝癌细胞增殖、侵袭、运动能力的影响。结果ATX-shRNA表达载体可以有效的抑制人MHCC-97肝癌细胞中ATX基因的表达,使ATX基因的mRNA表达量显著下降,以转染后第四天下降最明显,并且转染后细胞增殖、侵袭、运动能力均减弱。结论ATX-shRNA表达载体能有效地抑制ATX基因表达。

ATX短发夹shRNA表达载体的构建和测序

目的构建ATX基因重组表达载体.并进行测序鉴定,为下一步探索肿瘤基因治疗的途径打下基础。方法设计有小发夹结构的两条DNA序列.经退火成互补双链,再克隆至Psilencer2.1-U6 neo质粒载体中构建重组表达载体,转化DH5a菌株,提取质粒行酶切鉴定后,进行序列鉴定。结果成功构建了ATX shRNA重组表达载体。结论ATX shRNA质粒表达载体的成功构建为研究ATX靶向RNA干扰抗肿瘤的作用打下基础。