响应面法优化短短芽孢杆菌S1039发酵培养基的研究

近年来,传统抗生素的过量使用导致动植物病害耐药性增强,这不仅使得抗生素的作用越来越小,而且严重威胁着人类的健康.因此寻找高产细菌素或类细菌素的微生物菌株成为研究的热点.本研究为了提高短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis S1039)类细菌素的抑菌活性,对其发酵培养基进行了响应面优化.通过单因素试验筛选出了适合短短芽孢杆菌产抗菌物质的最佳碳源、氮源分别是马铃薯淀粉和蛋白胨,并发现适量的CaCl_2和Tween-20能够有效的促进类细菌素的产生.利用Box-Behnken实验设计及响应面分析确定了培养基四个因子的最佳浓度分别为:马铃薯淀粉12.9g/L、蛋白胨27.6g/L、CaCl_21.2g/L、Tween-20 1.05%.采用优化后的培养基发酵,类细菌素抑菌圈直径达到25.4mm,比优化前提高了56.8%,说明响应面法优化短短芽孢杆菌发酵培养基能够明显的提高类细菌素的抑菌活性,为该菌株规模化生产类细菌素提供了基础应用参考.

短短芽孢杆菌的鉴定及其抑菌物质的初步研究

从美国黄石国家公园土样分离到一株耐高温菌株S1039,经过形态、生理生化以及16SrDNA测序分析鉴定为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis).并对其产生的抑菌物质粗提物的部分性质进行了初步探究.实验结果表明,菌株S1039产生的抑菌物质粗提物具有良好的抑菌活性,并且耐高温、耐碱性物质、对胰蛋白酶、胃蛋白酶不敏感.能够抑制革兰氏阴性菌及阳性菌的生长,具有工业开发前景.

瓜类作物枯萎病生防菌BS-2000和JK-2的分子鉴定

采用生理生化和16SrDNA两种不同的方法对生防菌BS-2000和JK-2进行鉴定。生理生化鉴定显示,BS-2000属于地衣芽孢杆菌,JK-2属于短短芽孢杆菌；16S rDNA基因的测定与分析表明,BS-2000与B．licheniformis(地衣芽孢杆菌)的同源性达99.9％,JK-2与B．brevis(短短芽孢杆菌)的同源性达99.9％,故推定BS-2000属于地衣芽孢杆菌,JK-2属于短短芽孢杆菌。

生防菌株1404的鉴定及其对采后柑橘炭疽病的防治效果

【目的】柑橘是世界上重要的果树。由胶孢炭疽菌[Colletotrichum gloeosporioides（Penz.）Sacc.]引起的柑橘炭疽病是柑橘生产的主要病害。为开发对采后柑橘炭疽病有效的生防措施,对从辣椒根际土壤中分离的一株生防细菌1404进行了鉴定,并对其特性及生防效果进行了研究。【方法】根据菌株1404的形态特征、生理生化特性以及16SrDNA序列对其进行鉴定;通过连续在人工培养基上转代培养,测定该菌株拮抗活性的稳定性;用果实刺伤接种法对采后柑橘炭疽病的防效进行测定。【结果】菌株1404与来自GenBank的短短芽孢杆菌[Brevibacillus brevis（Migula）Shidaetal.]以100%bootstrap水平类聚一群。该菌株的形态特征及生理生化特性与Brevibacillus brevis相符。连续4次在人工培养基上转代培养,菌株1404对柑橘炭疽病菌生长的抑制力没有发生明显改变。该生防菌对柑橘炭疽病的防治效果明显,处理后第20天防效达到64.9%。【结论】根据16SrDNA序列、形态特征、生理生化特性,将菌株1404鉴定为短短芽孢杆菌。本文首次报道对柑橘采后炭疽病具有较好防效的生防菌Brevibacillus brevis。