短葶山麦冬皂苷DT-13研究进展

短葶山麦冬[Liriope muscari(Decne)Baily]为山麦冬的基原植物之一。短葶山麦冬皂苷DT-13为其主要的活性成分,具有抗肿瘤转移、增强免疫、抗炎等多种药理活性。本文对短葶山麦冬皂苷DT-13的化学结构、提取分离、含量测定、药理活性和安全性评价等进行综述,进一步阐明短葶山麦冬皂苷DT-13的研究价值和应用前景。

短葶山麦冬皂苷C药理作用研究进展

短葶山麦冬皂苷C是短葶山麦冬的主要活性成分之一,现代药理研究表明短葶山麦冬皂苷C有着广泛的药理活性如抗炎、抗肿瘤、抗血栓、心肌保护、免疫调节等。短葶山麦冬皂苷C对短葶山麦冬的进一步研究开发有着重要的学术价值。

短葶山麦冬皂苷C固体脂质纳米粒的制备

目的:制备短葶山麦冬皂苷C固体脂质纳米粒(DT-13-SLN)并考察其理化性质。方法:以乳化-蒸发法制备DT-13-SLN,通过正交设计优化处方和制备工艺条件,测定其粒径、zeta电位、药物包封率和载药量,以透射电镜观察纳米粒形态,并考察DT-13-SLN的稳定性,对DT-13-SLN的冻干粉进行差示扫描量热(DSC)分析,以确定DT-13-SLN的生成。结果:纳米粒的平均粒径为128.8 nm,zeta电位为-30.0 mV,包封率为57.43%,载药量为3.48%。DSC分析表明有新的物相生成。DT-13-SLN于4℃放置1个月,粒径和包封率无明显变化。结论:本研究制备的DT-13-SLN粒径分布范围窄,稳定性良好。

短葶山麦冬皂苷C诱导人胃癌细胞SGC7901自噬机制初探

以人胃癌细胞SGC7901为研究对象,探讨短葶山麦冬皂苷C的抗肿瘤作用及其分子机制。采用MTT检测、流式细胞仪分析、免疫蛋白印记实验,分别检测胃癌细胞SGC7901的增殖、凋亡及自噬。结果表明,短葶山麦冬皂苷C可抑制细胞增殖,但并不诱导细胞凋亡,可诱导细胞自噬,Western blotting检测结果表明短葶山麦冬皂苷C可引起自噬标志性蛋白Beclin-1表达增加及LC3-A转变为LC3-B。因此,短葶山麦冬皂苷C抑制胃癌细胞SGC7901增殖可能与凋亡无关,而是通过抑制经典的自噬信号转导通路Akt/mTOR诱导其发生自噬,从而发挥抗肿瘤作用。

比色法测定短葶山麦冬药材中总皂苷含量

目的探讨一种较为简便的方法对短葶山麦冬药材中甾体皂苷类化合物进行含量测定,建立一种总皂苷含量测定方法。方法采用L9(3)4正交试验设计法对茴香醛比色法进行试验条件的优化,以短葶山麦冬中主要甾体皂苷类化合物短葶山麦冬皂苷C为指标性成分,考察显色剂浓度、反应温度、显色剂体积、反应时间等四因素,优化显色条件。结果优化条件后,测得结果为福建泉州产短葶山麦冬中总皂苷含量为1.48%,平均加样回收率为95.8%。结果以文献方法—高氯酸比色法验证可靠。结论采用此种比色方法结果较为简便、可靠,能够用于短葶山麦冬总皂苷含量测定,可作为传统方法的有效补充。

UPLC-MS/MS同时测定麦冬配方颗粒中4个成分的含量及山麦冬成分的检查

目的:采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)建立同时测定麦冬配方颗粒中4个有效成分的含量,并检查是否含有山麦冬的2个专属性成分的方法。方法:采用XBridge BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速:0.2 mL·min^(–1),柱温:35℃,电喷雾离子源,多反应监测模式正、负离子全扫描。对麦冬配方颗粒中麦冬皂苷C、麦冬皂苷D、甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B、山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C进行含量测定并聚类分析。结果:6个待测成分在各自线性范围内线性关系良好(r≥0.995),平均加样回收率为95.9%~99.3%,RSD为0.9%~2.2%。26批样品中麦冬皂苷C、麦冬皂苷D、甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B的质量分数分别为6.4~17.3、15.1~29.1、9.0~22.6、4.5~14.4μg·g–1;有3批检出山麦冬皂苷B,其中2批同时检出短葶山麦冬皂苷C。结论:该方法简单、快速、准确,可用于麦冬配方颗粒的质量控制。

短葶山麦冬皂苷DT-13通过抑制MMP-2/9抑制肺癌A549细胞粘附和侵袭的作用(英文)

目的:检测短葶山麦冬皂苷DT-13对肺癌A549细胞粘附及侵袭的作用, 及对金属基质蛋白表达的影响。方法:利用MTT法寻找到DT-13合适的作用浓度;利用A549细胞与人脐静脉内皮细胞、纤连蛋白的粘附, 评价DT-13对细胞粘附的作用;利用transwell小室,考察DT-13对细胞侵袭的作用; 采用Western Blotting方法,检测DT-13对A549细胞中金属基质蛋白-2/9的作用; 结论:DT-13在10和30 μmol·L-1时, 可显著地抑制A549细胞的粘附与侵袭,并且对A549细胞中金属基质蛋白-2和金属基质蛋白-9的表达均有抑制作用。

短葶山麦冬皂苷C的细胞内分布研究

制备纯化短葶山麦冬皂苷C(DT-13)单克隆抗体,选用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及人宫颈癌细胞(HeLa)为研究对象,通过MTT法筛选给药浓度,以细胞免疫荧光定位法探索DT-13在细胞内的作用分布和蓄积情况及其特点。结果显示,在对细胞无显著毒性作用的DT-13浓度下,DT-13能迅速透过细胞膜进入胞浆,逐渐进入细胞核并长时间蓄积。DT-13(5.0μmol/L)在给药30 min前主要分布于人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞的胞浆,给药12 h后主要蓄积于细胞核内且持续时间可达24 h。而对人宫颈癌细胞(HeLa),与HUVEC细胞相比,DT-13(2.5μmol/L)能更快进入并蓄积于细胞核。提示DT-13可能通过作用于细胞核而发挥其主要的生物活性。该方法能直观、可靠、便捷地观察DT-13在细胞内的定位及动态变化,为中药皂苷类活性成分的药效及作用机理研究提供新的技术方法。

高效液相色谱-串联质谱法测定天王补心丸中山麦冬

建立超高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定天王补心丸中麦冬的混淆品山麦冬(湖北麦冬、短葶山麦冬)的方法。样品经甲醇提取,以0.1%(体积分数)甲酸-乙腈为流动相,用Waters CORTECS®C18色谱柱分离,采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测(MRM)模式进行正、负离子同时扫描,用HPLC-MS/MS法测定湖北麦冬、短葶山麦冬的代表性成分山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C。山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C的质量浓度分别在5.18~207.4、5.2~2080 ng/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均为0.9993,方法检出限分别为56、134 ng/g。样品加标回收率分别为99.16%、101.54%,测定结果的相对标准偏差分别为2.57%、5.27%(n=9)。该方法简单、稳定、可靠,可用于分析天王补心丸中麦冬的掺假情况。

HPLC-ELSD测定不同产地与采收期短葶山麦冬中短葶山麦冬皂苷C的含量

目的:利用HPLC-ELSD法测定不同产地和采收期短葶山麦冬Liriope muscari块根中短葶山麦冬皂苷C的含量以控制其质量。方法:Shimadzu C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相乙腈-水(46∶54)等度洗脱;漂移管温度94℃,载气流量2.5L·min-1。结果:短葶山麦冬皂苷C在1.02～12.228μg呈线性,回收率100.80%,RSD1.8%。10批不同产地短葶山麦冬药材中短葶山麦冬皂苷C质量分数为0.25%～0.41%,15批不同采收期药材的质量分数在0.13%～0.38%。结论:本研究所建立HPLC-ELSD方法,可快速、准确测定短葶山麦冬药材中短葶山麦冬皂苷C含量,为控制短葶山麦冬的药材质量及最佳采收时间的确定提供了科学依据。

HPLC-ELSD法测定短葶山麦冬中短葶山麦冬皂苷C的含量

目的：建立短葶山麦冬中短葶山麦冬皂苷C的含量测定方法,并对其块根和须根中短葶山麦冬皂苷C的含量进行了测定。方法：采用HPLC-ELSD法,使用Phenomenex C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱（0~15min,乙腈20%→30%;15~16 min,乙腈30%→48%;16~40 min,乙腈48%）,流速1 mL.min-1,柱温30℃,漂移管温度105℃,氮气流速2.4 L.min-1。结果：短葶山麦冬皂苷C进样量在1.04~8.34μg范围内线性良好（r=0.9998）;平均回收率（n=6）为95.8%;RSD为1.5%。结论：本方法简便,准确,可用于短葶山麦冬中短葶山麦冬皂苷C的定量分析。须根中的短葶山麦冬皂苷C含量明显高于块根。

UPLC-MS/MS法检测妇康宁片中掺加的山麦冬

目的建立超高效液相色谱-串联电喷雾三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)法检测妇康宁片中掺加的山麦冬(湖北麦冬和短葶山麦冬)。方法该药物甲醇提取物的分析采用Zorbax Eclipse Pluse C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,等度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃,以测定麦冬皂苷D、山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C的含有量。结果 35批样品中有11批检测到湖北麦冬,7批检测到短葶山麦冬,3批同时检出两者。结论该方法选择性强,灵敏度高,可用于筛查妇康宁片中的麦冬用药品种。

基于LC-MS/MS法的玄麦甘桔颗粒中麦冬及山麦冬的检查

目的:建立玄麦甘桔颗粒中麦冬有效成分甲基麦冬黄烷酮A和甲基麦冬黄烷酮B及山麦冬特征性成分山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C的检查方法,并对市售不同厂家、不同批号的玄麦甘桔颗粒进行检测和分析。方法:采用液相色谱-串联三重四级杆质谱仪(LC-MS/MS),ACQUITY UPLC BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),流动相为乙腈和0.1%甲酸溶液,流速0.3 mL/min,采用正负离子同时监测,多反应监测模式扫描。结果:上述4种成分分别在24.07~1203.52、10.58~529.13、8.31~415.70、9.11~455.71 ng/mL内线性关系良好(r>0.999 0),加样回收率为91.1%~103.2%,RSD均小于3.0%;30批玄麦甘桔颗粒中,3批检出山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C。结论:此方法选择性强、灵敏度及准确度高,操作简便,可快速、有效地评价玄麦甘桔颗粒中麦冬的质量。

基于HPLC-Q-TOF-MS技术检测川贝清肺糖浆中掺伪山麦冬的研究

目的采用高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱(HPLC-Q-TOF-MS)技术建立川贝清肺糖浆中掺伪山麦冬的检测方法。方法采用色谱柱Agilent Po roshell 120 EC-C_(18)(50 mm×4.6 mm,2.7μm),流动相为乙腈-0.1%冰醋酸(50∶50),流速为0.3 mL·min^(-1),柱温为35℃;电喷雾电离(ESI-),以麦冬皂苷D、山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C为指标性成分进行分析。结果50批样品中有6批检出山麦冬皂苷B和麦冬皂苷D,应为掺山麦冬(湖北麦冬)投料;有4批均未检出3种指标性成分,疑似未使用麦冬投料。结论该方法专属性强,灵敏度高,可用于对川贝清肺糖浆中掺伪山麦冬的检查。

不同采收期短葶山麦冬中短葶山麦冬皂苷C差向异构体含量测定

目的：建立短葶山麦冬皂苷C差向异构体含量测定方法,测定不同采收期短葶山麦冬中短葶山麦冬皂苷C差向异构体含量。方法：采用HPLC-UV法,Waters XBridge C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,3.5μm）,流动相乙腈-水（42∶58）,检测波长203 nm,柱温40℃,流速1.0 m L·min-1。结果：25R-短葶山麦冬皂苷C和25S-短葶山麦冬皂苷C分别在20.40~408.00 mg·L-1（R2=0.999 9）,20.09~401.80 mg·L-1（R2=0.999 9）呈良好线性关系,平均回收率分别为99.85%（RSD 2.1%）,101.40%（RSD 1.8%）;8批不同采收期短葶山麦冬中25R-短葶山麦冬皂苷C,25S-短葶山麦冬皂苷C分别为0.081%~0.136%,0.012%~0.150%。结论：该方法简便、快速,可准确测定短葶山麦冬皂苷C差向异构体含量;不同采收期短葶山麦冬中短葶山麦冬皂苷C差向异构体含量差异较大,25S-短葶山麦冬皂苷C含量变化尤为明显,应严格控制短葶山麦冬采收期。

短葶山麦冬皂苷C提取工艺优化及因子效应分析

通过二次旋转回归试验优化短葶山麦冬[Liriope muscari(Decn.)Bailey]皂苷C提取工艺,获到最佳提取工艺参数为:提取温度40℃,酒精浓度为100%,料液比1∶30,超声时间40 min,短葶山麦冬皂苷C得率为3.33%。因子效应分析结果表明,不同因子对短葶山麦冬皂苷C得率的贡献值表现为乙醇浓度>提取温度>料液比>超声时间。

基于HPLC-MS/MS法的咽炎片中麦冬掺伪检查

目的建立咽炎片中麦冬掺伪检测方法。方法高效液相色谱-串联电喷雾三重四级杆质谱法(HPLC-MS/MS),采用Innoval ODS-2色谱柱(2.1 mm×100 mm,3μm),以乙腈-0.1%甲酸(75:25)为流动相,流速为0.3 ml/min,柱温40℃,进样量2μl,多反应监测(MRM)模式。结果31批咽炎片样品中,有7批次样品检出短葶山麦冬掺伪,有1批次样品检出湖北麦冬掺伪,有1批次样品同时检出短葶山麦冬和湖北麦冬掺伪。结论咽炎片中存在麦冬和山麦冬混用,本方法准确可靠,可为咽炎片中麦冬的质量控制提供参考。

石斛夜光丸中麦冬掺伪情况考察

目的:建立眼科经方石斛夜光丸中麦冬的混淆品山麦冬(湖北麦冬、短葶山麦冬)的检查方法,考察样品中麦冬的投料状况。方法:应用超液相色谱-串联电喷雾三重四级杆质谱(HPLC-MS-MS)技术,采用Waters CORTECS® C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm, 2.7μm),以0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速:0.25 ml·min;,柱温:35℃,采用电喷雾离子源(ESI^(±)),以多反应监测(MRM)模式进行正、负离子分别扫描。结果:山麦冬的特征成分山麦冬皂苷B与短亭山麦冬皂苷在相应线性范围内线性关系良好(r>0.999),平均加样回收率为99.03%、97.96%,RSD均小于3.9%(n=9),91批石斛夜光丸样品检出山麦冬22批。结论:石斛夜光丸中存在麦冬和山麦冬的混用情况。

UPLC-MS/MS快速检测生脉饮系列中山麦冬

目的建立生脉饮系列药品中山麦冬的超高效液相色谱-串联电喷雾三重四级杆质谱快速检查方法。方法样品经甲醇提取,采用Inertsil ODS-3色谱柱(150 mm×4.6 mm,2μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液(50∶50)为流动相,柱温:40℃,流速:0.4 mL·min^(-1),进样量:5μL。ESI^(+)模式,山麦冬皂苷B检测离子对为m/z 723.5→415.2和m/z 723.5→251.0,短葶山麦冬皂苷C检测离子对为m/z 871.5→431.3和m/z 871.5→413.3。结果51批次样品中,有3批样品同时检出山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C,有2批次检测出山麦冬皂苷B,有7批次检测出短葶山麦冬皂苷C。结论建立方法准确性高,重复性好、耐用性强,可用于快速准确筛查生脉饮系列中山麦冬掺伪的现象。

基于安全监管的玄麦甘桔制剂中麦冬投料真实性的考察

目的建立玄麦甘桔制剂中山麦冬的掺伪检测方法,考察样品中麦冬的投料状况。方法应用超液相色谱-串联电喷雾三重四级杆质谱技术,采用Ultimate LP-C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.2 mL·min-1,柱温为30℃,进样量3μL,采用电喷雾离子源(ESI^(+)),多反应监测(MRM)模式。结果山麦冬(湖北麦冬)的特征成分山麦冬皂苷的线性范围为0.0247~6.185μg·mL^(-1)(r=0.9985),加样回收率为92.50%,RSD为1.88%。同时,以掺伪山麦冬(湖北麦冬)10%作为依据,拟定了检出限度,结果237批次样品中有25批检出山麦冬皂苷B,均为含糖型颗粒剂,检出率为10.5%。结论所用方法准确可靠,可作为玄麦甘桔制剂中山麦冬掺伪的检测方法。