眼镜蛇短链神经毒素镇痛和抗吗啡依赖作用实验研究

目的：眼镜蛇短链神经毒素（Cobratoxin，CTX）是从眼镜蛇蛇毒中提纯的短链α-神经毒素，是nACHR拮抗剂，特别是α7-受体亚型拮抗剂。本研究考察CTX是否有抗炎性疼痛和吗啡依赖的作用，并初步探讨其可能的作用机制。方法：采用5％福尔马林足皮下注射造成大鼠急性炎性疼痛和完全弗氏佐剂致大鼠慢性炎症模型，考察CTX是否具有抗炎性疼痛的作用；采用递增给药方式建立吗啡依赖小鼠和大鼠模型以及行为敏化模型探讨CTX的抑制吗啡依赖作用。

抗平颏海蛇短链神经毒素全人源单克隆抗体的筛选、制备及生物活性研究

目的重组表达3种平颏海蛇短链神经毒素,利用噬菌体抗体库筛选制备全人源抗毒素单克隆抗体并评估其生物活性。方法以重组表达纯化的神经毒素蛋白作为抗原,从自主构建的噬菌体抗体库中筛选获得噬菌体抗体,经序列测定确定其抗体类型后构建完整抗体。利用真核表达系统表达纯化抗体后鉴定其抗原结合活性、生化特性及药代动力学特性。在体内验证抗体药物的抗毒素作用。结果经过4轮筛选,获得2株能同时结合3种神经毒素的噬菌体单链抗体,并将其制备成完整的抗体,进一步证实所获得的抗体可特异性结合3种抗原。2株全人源抗体均可拮抗神经毒素对昆明小鼠的致死作用。结论利用重组神经毒素和噬菌体抗体库技术成功获得了特异性抗平颏海蛇短链神经毒素的全人源治疗性抗体。