非洲猪瘟病毒全长与截短p72蛋白的抗原性比较

比较非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)全长p72与截短p72蛋白(p72s)的抗原性,为ASFV特异性抗体检测技术研究提供试验依据。应用大肠杆菌表达系统表达p72和p72s蛋白,应用Western blot和液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术鉴定表达的蛋白,分析蛋白的抗原表位;用纯化的重组全长和截短p72蛋白分别免疫小鼠,比较其免疫原性;通过ELISA和Western blot,评价重组p72和p72s蛋白与ASFV阳性血清的免疫反应性。结果:重组p72和p72s蛋白均以包涵体形式表达,相对分子质量分别约为76和42 ku,与预期大小相符;表达蛋白的酶解肽段对p72和p72s蛋白推测氨基酸序列的覆盖度分别为89.3%和88.39%,两者分别包含27和17个抗原表位;用p72与p72s蛋白免疫小鼠3次后,血清特异性抗体效价分别为1∶200~1∶25600和1∶12800~1∶409600;基于重组p72与p72s蛋白的ELISA从108份猪血清中分别检出78份(72.2%)和85份(78.7%)阳性血清,两者的检测结果具有很好的一致性(kappa=0.826,P=0.016);经Western blot检测的10份ASFV抗体阳性血清中有7份与p72蛋白反应,全部与p72s蛋白反应。截短p72蛋白比全长p72蛋白的抗原性好,更适合用于ASFV抗体检测。

基于非洲猪瘟病毒截短p72蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立

【目的】建立非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)ELISA抗体检测方法。【方法】以重组截短p72(p72s)蛋白作为检测抗原,通过方阵滴定法,确立ELISA的抗原、待检血清和酶标抗体的最佳工作浓度,优化抗原包被、酶标板封闭、血清/酶标抗体反应及底物显色等工作条件;应用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线阈值评价标准,确定方法的阴阳性临界值;检测方法的特异性、敏感性、批内与批间重复性;最后分别用建立的ELISA方法和商品试剂盒检测124份血清,比较两者的阳性检出率,并通过Western blotting验证ELISA的检测结果。【结果】ELISA方法的抗原最佳包被浓度为0.5μg/mL,待检血清与酶标抗体的最适稀释度分别为1∶100和1∶5000;反应条件为:抗原于37℃孵育1 h后经4℃包被酶标板过夜、于37℃封闭1 h或室温封闭2 h、待检血清和酶标抗体分别于37℃反应60和45 min及加入底物后于室温避光显色20 min;阴阳性血清的判定标准为:当待检血清的D_(450 nm)值≥0.365时,判定为阳性;当D_(450 nm)值<0.365时,判定为阴性。该方法只与ASFV阳性血清发生特异性结合,与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等病毒抗血清均无交叉反应;能检测到ASFV抗血清中的总蛋白量为0.091~0.153 mg/mL,低于商品试剂盒的最低检测量(0.110~0.554 mg/mL);批内和批间重复性试验的平均变异系数分别为4.70%与5.125%。对临床血清样本检测时,建立方法和商品试剂盒的阳性检出率分别为75.81%(94/124)和32.26%(40/124)。进一步验证表明,Western blotting与ELISA的检测结果完全一致。【结论】建立了基于ASFV-p72s蛋白的ELISA抗体检测方法,该方法特异、敏感和重复性稳定,能够用于ASF临床诊断与流行病学调查,具有极大的开发应用潜力。

女性青年短P-R间期分析

目的探讨18～28岁女性青年短P-R间期发生的原因及临床意义。方法对990例18～28岁女性青年P-R间期与940例其他年龄女性P-R间期作比较。结果18～28岁女性青年短P-R间期达28例,且均无心动过速史,其他年龄女性2例。结论心电图出现短P-R间期,正常QRS波,并非全部传导异常,可由多种原因引起,不能轻易地诊断为L-G-L综合征。只要不发作心动过速临床意义不大,一般不需特殊治疗。

晚期妊娠孕妇心电图短P-R间期综合征44例回顾分析

晚期妊娠者可出现P—R间期缩短,其概率明显高于正常人群,现在作一回顾性分析。1资料与心电图分析我院就诊的晚期妊娠者均常规12导心电图检查,年龄22～40岁,排除了心肌炎、先天性心脏病、风湿性心脏病及心肌病变等。

女性不同人群中短P-R间期发生率对比

目的本文对比分析不同年龄组女性以及妊娠期妇女人群中短P鄄R间期的发生率,探讨其发生的原因及临床意义。方法选择我院产前检查的妊娠妇女800例为观察组,年龄为19～30岁。选择同期门诊健康体检女性30岁以下共800例,31岁以上者共800例为对照组。常规心电图检查,比较3组短P鄄R间期的发生率。结果妊娠组短P鄄R间期者共37例,发生率为4.63%;30岁以下组短P鄄R间期者共17例,发生率为2.13%;30岁以上组短P鄄R间期者共5例,发生率为0.63%。结论短P鄄R间期发生率以妊娠妇女最高,30岁以下女性短P鄄R间期发生率比31岁以上女性高。

妊娠期短P-R间期的心电图分析

目的探讨妊娠期妇女心电图短P-R间期现象的原因及其临床意义。方法对65例有短P-R间期现象的妊娠期妇女心电图进行分析,并在其分娩或终止妊娠后2～3个月复查心电图。结果 65例妊娠期发现短P-R间期的妇女63例在复查心电图中发现短P-R间期现象消失,2例在复查中仍发现短P-R间期现象存在。结论妊娠期妇女短P-R间期现象多数为生理性改变,分娩或终止妊娠后可逐渐恢复正常。

短P-R间期孕妇的孕期及产后调查

目的了解孕妇妊娠期间短P-R间期的临床意义。方法对728例孕晚期孕妇做心电图,并于产后进行随访。结果17例(2.34%)孕晚期妇女出现短P-R间期、正常QRS现象。结论孕晚期妇女出现短P-R间期可能与房室结解剖或传导异常,及循环血量、机体氧耗增加有关。

健康孕妇晚期妊娠心电图短P-R间期探讨

目的:探讨孕妇晚期妊娠心电图短P-R间期形成原因。方法:晚期妊娠孕妇175例,同龄组健康体检妇女175例作为对照组,比较两组心电图短P-R间期发生率,孕妇产后随访3～6个月。结果:健康体检妇女175例,心电图出现短P-R间期2例(1.14%);晚期妊娠妇女175例,心电图出现短P-R间期16例(9.14%),产后随访3～6个月,15例恢复正常P-R间期。结论:晚期妊娠孕妇组心电图出现短P-R间期发生率明显高于同龄健康体检妇女组(P<0.01),晚期妊娠孕妇组心电图短P-R间期在产后6个月后基本恢复正常。

妊娠中晚期孕妇短P-R间期37例原因分析

临床心电图诊断工作中发现，单纯出现P—R间期缩短、QRS波群正常、临床上无反复发作心动过速病史的病例多见于年轻女性，尤其是妊娠中晚期孕妇。本文就此现象的发生原因及临床意义进行探讨。

妊娠妇女心电图短P-R间期的临床分析

目的 分析妇女妊娠期心电图短P R间期的临床意义.方法 回顾性分析1 642例孕妇的12导联同步心电图,并测量P R间期,比较短P R间期孕妇与正常P R间期孕妇的心悸、贫血、心动过速发生率和分娩方式.结果 妊娠早、中、晚期短P R间期发生率分别为1.34%、8.78%和14.10%.短P R间期孕妇心悸发生率高于正常P R间期孕妇（23.02% vs 2.53%,χ2=130.97,P〈0.01）.短P R间期孕妇贫血和心动过速发生率高于正常P R间期孕妇（χ2值分别为38.75、9.11,均P〈0.01）.短P R间期孕妇和正常P-R间期孕妇剖宫产率分别为23.02%和20.36%,分娩方式比较无显著性差异（χ2=0.55,P〉0.05）.结论 孕妇心电图的短P R间期随孕龄增长发生率增加,其发生与贫血、心率增快有关,但不影响分娩方式.

妊娠女性短PR间期的临床分析

目的：探讨妊娠期女性短PR间期的发生率。并分析其产生机制及临床意义。方法：选择1680例接受常规心电图检查的女性分为两纽，妊娠组910例，健康非妊娠组770例（对照组），分析两组短P—R间期的发生率。结论：妊娠组心电图短PR间期发生率较健康非妊娠组明显增高。

妊娠晚期短P—R间期76例分析

对妊娠晚期P—R间期缩短现象进行调查分析，探讨其发生原因及临床意义。

妊娠妇女P—R间期缩短的心电图分析

目的探讨妊娠妇女P—R间期缩短的临床意义。方法选择接受心电图检查的599例妇女,分为2组:妊娠组528例,健康非妊娠组51例,分析2组P—R间期缩短的发生率。按生理孕周分为2组,对2组P—R间期缩短发生率进行分析。结果妊娠组发生P—R间期缩短48例(9.1%),非妊娠组发生P—R间期缩短9例(17.6%),2组比较有显著性差异(P<0.01);妊娠中晚期与妊娠早期P—R间期缩短发生率有显著性差异(P<0.05)。结论妊娠期妇女P—R间期缩短发生率明显高于非妊娠期妇女,妊娠中晚期P—R间期缩短发生率高于妊娠早期。

妊娠中晚期妇女短P-R间期心电图分析

目的:探讨妊娠中晚期妇女心电图短P-R间期的临床意义及预后。方法:选择1280例接受常规心电图检查的女性分为两组,妊娠组860例,健康非妊娠组420例(对照组),分析两组短P-R间期的发生率。妊娠组又分早期妊娠组和中晚期妊娠组,分别对各组短P-R间期发生率进行分析。结果:中晚期妊娠组与对照组及早期妊娠组差异均有统计学意义(P<0.01),早期妊娠组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:妊娠中晚期妇女心电图短P-R间期发生率增高,考虑与妊娠中晚期孕妇耗氧量增大使机体缺氧,反射性引起交感神经兴奋有关,并非由于传导途径异常,属于良性电生理改变,不宜诊为L-G-L综合征。

晚期妊娠与短P—R间期的调查分析

目的：探讨晚期妊娠出现短P～R闾期的原因及临床意义。方法：采集晚期妊娠待产妇200例和健康非妊娠妇女300例（对照组）在静息下的12导联同步心电图，测定P—R间期并比较。结果：晚期妊娠待产妇P--R间期为（150士50）ms，p-R间期〈120ms者62例，占31％；而对照组P—R间期为（160±60）ms，P—R间期~]20ms者27例，占9％，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：晚期妊娠待产妇P—R间期较非孕者缩短，且短P—R间期发生率较非孕者明显增高。