矮垂头菊正丁醇提取物对低压低氧小鼠心肌损伤的保护作用

目的研究矮垂头菊正丁醇提取物(n-butanol extract of Cremanthodium humile,BECH)对低压低氧小鼠心肌损伤的保护作用。方法取清洁级BALB/c雄性小鼠50只分为(n=10):缺氧模型组、乙酰唑胺组,BECH低(125 mg/kg)、中(250 mg/kg)、高剂量(500 mg/kg)组进行常压密闭缺氧实验确定最佳给药剂量。30只小鼠分为(n=10):急性减压组、乙酰唑胺组、BECH给药组进行减压缺氧耐受实验确定最佳给药剂量的存活率。52只小鼠分为(n=13):正常对照组、低压低氧组、乙酰唑胺组和BECH给药组,连续灌胃5 d,第5天给药后,正常对照组置于当地海拔,其余小鼠置于低压低氧动物实验舱中。模拟海拔高度8000 m暴露24 h,摘眼球取血后随即处死,HE染色观察小鼠心肌组织病理变化;测定血清中肌酸激酶(creatine kinase,CK)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,c-TnI)活性;测定心肌组织中活性氧(reactive oxygen species,ROS)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、乳酸(lactic acid,LD)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)含量和水平;蛋白印迹法检测心肌组织中Nrf-2、HO-1、Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3蛋白的表达水平。结果与缺氧模型组相比,BECH可以显著延长常压密闭缺氧小鼠的存活时间,且以高剂量组效果较好;与急性减压组相比,BECH给药组能够显著降低急性减压小鼠的死亡率。与正常对照组相比,低压低氧组小鼠心肌组织中ROS含量升高(P<0.05),MDA、CAT、LD、LDH的水平显著增加(P<0.01),SOD、GSH-Px、T-AOC的水平显著降低(P<0.01),Nrf-2、HO-1、Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达上调(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05)。经BECH治疗后,能够显著降低低压低氧环境下小鼠的心肌组织氧化应激损伤(P<0.01),显著降低LD的含量与LDH活性(P<0.01),显著提高SOD、GSH-Px、T-AOC、LDH的水平(P<0.01),上调Bcl-2、Nrf-2、HO-1的蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),下调Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达(P<0.05,P<0.01),降低Bax/Bcl-2比值(P<0.05)。结论BECH通过激活Nrf-2/HO-1信号通路,降低低压低氧小鼠心肌组织的氧化应激损伤,改善能量代谢,抑制细胞凋亡,进而缓解低压低氧诱导的心肌损伤。

矮垂头菊正丁醇提取物改善高原缺氧小鼠脑组织损伤的作用

目的研究矮垂头菊正丁醇提取物对高原缺氧小鼠脑组织的保护作用。方法将50只小鼠分为缺氧模型组、阳性对照组(乙酰唑胺)和矮垂头菊正丁醇提取物低、中、高剂量组(125、250、500 mg·kg^(-1)),进行常压密闭缺氧实验选择最佳给药剂量。另将40只小鼠分为正常对照组、低压低氧组、阳性对照组(乙酰唑胺)和矮垂头菊正丁醇提取物给药组(500 mg·kg^(-1)),连续灌胃5 d,最后一次给药后,除正常对照组外,其余小鼠在模拟8000米海拔的低氧舱中暴露24 h,随后处死小鼠,取脑组织,测定丙二醛、乳酸、过氧化物酶、乳酸脱氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和总抗氧化能力的水平,酶联免疫法测定脑组织中白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α含量,蛋白印迹法检测脑组织中核因子E2相关因子2、血红素加氧酶1、核转录因子-κB和肿瘤坏死因子-α蛋白的表达水平。结果与正常对照组比较,低压低氧组小鼠脑组织中丙二醛、乳酸、乳酸脱氢酶的含量显著升高(P<0.01),炎性因子白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α的水平增加(P<0.05),超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化氢酶和总抗氧化能力的水平显著降低(P<0.01),核因子E2相关因子2、血红素加氧酶1、核转录因子-κB、肿瘤坏死因子-α的蛋白表达增加(P<0.05),各指标数据均有显著性差异,因此低压低氧模型建立成功。与低压低氧组比较,矮垂头菊正丁醇给药组小鼠脑组织中丙二醛、乳酸、乳酸脱氢酶的含量显著降低(P<0.01),炎性因子白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α的水平降低(P<0.05),超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化氢酶和总抗氧化能力的水平显著升高(P<0.01),核转录因子-κB、肿瘤坏死因子-α的蛋白表达降低(P<0.05),而核因子E2相关因子2和血红素加氧酶1的蛋白水平表达进一步升高(P<0.05)。结论矮垂头菊正丁醇提取物能够激活Nrf-2/HO-1通路,抑制炎性因子的释放,从而降低高原缺氧诱发的氧化应激和炎性反应,缓解脑组织损伤。

矮垂头菊乙醇提取物的体外自由基清除活性及其对高原缺氧小鼠的保护作用研究

本文对矮垂头菊乙醇提取物(Ethanol extract of Cremanthodium humile,EECH)中总黄酮与总多酚含量,体外自由基清除活性以及对高原缺氧小鼠的保护作用进行研究。结果显示:EECH中总黄酮与总多酚的含量分别为378.35±7.04 mg芦丁/g提取物和114.58±0.99 mg没食子酸/g提取物。其对DPPH、羟自由基、NO自由基均表现出一定的清除活性,IC50值分别为80.90±0.47、263.54±6.82和285.26±4.45μg/m L,但均弱于Vc,然而其对超氧阴离子的清除作用优于Vc。此外,EECH能够显著延长缺氧常压密闭缺氧小鼠的存活时间,减少低压低氧小鼠心脑组织中MDA含量,提高抗氧化酶SOD、CAT和GSH-Px的活力。以上结果表明:EECH是一种活性优异的天然抗氧化剂,对高原缺氧诱导的小鼠心脑组织损伤具有明显的保护作用。

矮垂头菊不同极性溶剂萃取物的抗氧化活性研究

为了研究矮垂头菊植物的抗氧化活性,本文采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、羟基自由基清除法、超氧自由基清除法、一氧化氮自由基清除法和铁还原/抗氧化能力(FRAP)测定法六种抗氧化对矮垂头菊粗提物(CE)、正己烷相(HE)、乙酸乙酯相(EAE)、正丁醇相(BE)、水相(WE)等5个不同极性溶剂萃取物的抗氧化活性进行评价,并探讨抗氧化活性与总酚和总黄酮含量之间的关系。结果显示矮垂头菊不同极性溶剂的萃取物均有抗氧化活性,且抗氧化活性与总黄酮和总酚含量密切相关,其中BE中总黄酮含量最高可达588.02±10.18 mg 芦丁/g,总酚含量最高可达568.49±8.14 mg 没食子酸/g,且自由基清除能力和FRAP值均高于其它组分,但HE中总黄酮和总酚含量及抗氧化活性均较低。结果表明矮垂头菊EAE萃取物和BE萃取物具有很强的自由基清除能力,可作为潜在的天然抗氧化剂开发。