穴位贴敷通过TLR4/MyD88/NF-κB通路调节原发性痛经大鼠的免疫功能

目的:基于Toll样受体(TLR)4/髓样分化因子(MyD)88/核转录因子κB p65(NF-κB p65)信号通路探讨石墨烯暖宫穴位贴对原发性痛经(PD)模型大鼠免疫功能的影响及对辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2免疫平衡的调节作用。方法:将SD雌性大鼠随机分成正常组、模型组和穴贴组,每组10只。股部皮下注射苯甲酸雌二醇制备PD模型。在造模的同时予穴贴组大鼠石墨烯暖宫穴位贴贴敷“关元”“子宫”(双侧)和“三阴交”(双侧)干预,连续10 d、1次/d、5 h/次。第11天腹腔注射缩宫素观察各组大鼠的扭体潜伏时间、30 min内的扭体次数,进行扭体评分;计算脾脏和胸腺的脏器指数;HE染色法观察大鼠脾脏和胸腺组织的病理变化;ELISA法检测血清免疫球蛋白(Ig)A、IgG、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-2、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4和IL-10含量;Western blot法和实时荧光定量PCR法分别检测大鼠子宫组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65的蛋白及mRNA的相对表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠出现扭体反应(P<0.01),30 min内扭体次数和扭体评分显著增加(P<0.001);脾脏指数和胸腺指数均显著降低(P<0.01,P<0.05);脾脏和胸腺均出现了明显的病理变化;血清IgA、IgG、TNF-α、IL-2、IFN-γ含量显著升高,IL-4和IL-10含量显著降低(P<0.001,P<0.01);子宫组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白及mRNA表达均显著升高(P<0.001)。与模型组比较,穴贴组大鼠扭体潜伏时间延长(P<0.001),其他指标均逆转(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。结论:石墨烯暖宫穴位贴可通过调控TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路,调节Th1/Th2的免疫平衡,修复免疫组织的病理损伤,改善免疫功能,从而有效缓解PD大鼠的疼痛症状。