铁皮石斛叶红曲黄酒的酿造及其品质分析

为拓展铁皮石斛叶的应用并提升红曲黄酒的品质,本研究通过添加5%、15%、25%的铁皮石斛叶匀浆制备红曲黄酒,分析其基本理化性质、总酚和总黄酮含量,咖啡酸、没食子酸、芦丁、槲皮素等单体酚含量,以及抗氧化能力、挥发性成分、γ-氨基丁酸含量和感官品质,探究铁皮石斛叶对酿酒酵母和红曲霉菌生长代谢的影响。结果表明,铁皮石斛叶的添加提高了黄酒中总蛋白、氨基态氮、总酚、总黄酮和γ-氨基丁酸含量;增强了黄酒的抗氧化能力;挥发性物质种类较对照黄酒有所增加,尤以酯类物质变化最为明显,出现了几种有水果香气的成分,丰富了黄酒的风味。但铁皮石斛叶对酿酒酵母与红曲霉菌的生长代谢具有一定的抑制作用,其大量添加导致黄酒的还原糖含量及酒精度有所降低。综合感官评价、功能成分含量和抗氧化活性,确定酿造红曲黄酒的适宜铁皮石斛叶添加量为15%。本研究结果可为铁皮石斛叶红曲黄酒的开发提供技术支撑。

铁皮石斛叶干粉对京红一号蛋鸡生产性能、蛋品质和血清指标的影响

为了探究铁皮石斛叶对蛋鸡生产性能、蛋品质、脏器指数和血清生化指标的影响,试验选用健康的19周龄京红一号蛋鸡240只,随机分为3个处理组,分别为:对照组、1200 mg/kg铁皮石斛叶组、3600 mg/kg铁皮石斛叶组,采用单因素试验设计,试验期16周。结果表明,与对照组相比,在日粮中添加铁皮石斛叶干粉对京红一号蛋鸡的产蛋率、平均蛋重和料蛋比均无显著影响,说明铁皮石斛叶不影响蛋鸡的产蛋性能;3600 mg/kg铁皮石斛叶能够显著降低31~34周龄蛋鸡的日平均采食量和27~34周龄鸡蛋破损率,显著增加19~22周龄的蛋黄颜色及血清总蛋白水平和球蛋白水平;1200 mg/kg铁皮石斛叶能够显著降低31~34周龄蛋鸡的日平均采食量和31~34周龄的鸡蛋破损率,显著提升27~30周龄蛋鸡所产鸡蛋的蛋黄颜色和蛋黄比例、31~34周龄蛋鸡所产鸡蛋的哈氏单位;与其它两组相比,3600 mg/kg铁皮石斛叶干粉组极显著提高了蛋鸡的脾脏指数。说明在饲粮中添加铁皮石斛叶干粉不影响蛋鸡的产蛋性能,但可以改善蛋品质和免疫能力。

铁皮石斛叶的应用价值及开发利用

从药用价值、食用价值与观赏价值方面分析了铁皮石斛叶的应用价值,综述了铁皮石斛叶的开发利用现状,以期为铁皮石斛叶进一步资源化利用、有益补充铁皮石斛产业、促进铁皮石斛全产业链的开发提供参考。

铁皮石斛叶保健茶研制工艺

为开发铁皮石斛叶保健茶产品,研究了铁皮石斛叶萎凋晾青时间、杀青时间及干燥温度对铁皮石斛叶保健茶感官品质的影响。结果表明:室内温度控制在18℃~25℃范围,先将铁皮石斛叶以1.0cm~1.5cm的厚度自然摊放晾青8h后,使用蒸汽杀青机杀青,杀青温度180℃,杀青时间100S,电热鼓风烘焙箱80℃干燥4h-5h。在此工艺下制得的铁皮石斛叶保健茶叶形卷曲,色泽黄绿,香气清香,无苦涩味,口感较佳,感官品质优良,评定分数为87.3分。本研究对铁皮石斛叶的利用及全产业链效益提升具有重要意义和参考价值。

米曲霉固态发酵铁皮石斛叶工艺条件的优化

铁皮石斛(Dendrobium officinale)已在浙江、云南、贵州等地实现了大规模种植,由于药用部分为茎,在制备过程中产生大量的铁皮石斛叶副产物。本文采用米曲霉CGMCC 23295发酵铁皮石斛叶,以α-葡萄糖苷酶抑制活性为指标,研究了初始含水率(v/w)、发酵温度和发酵时间对发酵产物α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响,并以Box-Behnken试验设计结合响应面分析法进行优化。结果表明,米曲霉发酵铁皮石斛叶的最佳工艺参数为初始含水率72%、发酵温度29℃、发酵时间4 d。在此条件下,铁皮石斛叶的α-葡萄糖苷酶抑制活性达(56.69±0.14)mg ACE·g^(-1),较优化前提升了31.3%。本研究结果可为高活性铁皮石斛叶产品的开发提供基础。

铁皮石斛叶多酚提取工艺优化及其清除自由基活性

采用响应面法优化铁皮石斛叶多酚的提取工艺,并考察铁皮石斛叶多酚对自由基的清除作用。结果表明:最优铁皮石斛叶多酚提取工艺条件为乙醇体积分数50%,液料比36∶1(m L/g),超声功率350 W,提取时间37 min,提取温度60℃,提取2次。在最优条件下铁皮石斛叶多酚提取量为34.15 mg/g。铁皮石斛叶多酚可以有效清除羟自由基、超氧阴离子自由基及DPPH自由基,铁皮石斛叶多酚自由基清除率随着多酚质量浓度增加而升高,其对羟自由基、超氧阴离子自由基及DPPH自由基的半数清除率(IC50)分别为0.554、0.775 mg/mL及0.596 mg/mL,较同浓度的VC弱。

铁皮石斛叶多糖提取工艺优化及其抗氧化活性

在单因素试验的基础上,采用响应面试验法优化铁皮石斛叶多糖超声波-微波协同提取工艺。同时,通过测定清除DPPH自由基和ABTS自由基能力,考察铁皮石斛叶多糖的抗氧化活性。结果表明:铁皮石斛叶多糖的最优提取工艺条件为:提取时间30min、微波功率350W、超声波功率50W、液料比35∶1(mL/g)、提取2次。在此条件下,铁皮石斛叶多糖得率为14.03%。抗氧化实验结果表明:铁皮石斛叶多糖和VC对DPPH自由基半数清除率(IC_(50))分别为0.639mg/mL、0.358mg/mL,对ABTS自由基半数清除率(IC_(50))分别为0.608mg/mL、0.293mg/mL,清除率与多糖质量浓度呈正比例关系。超声波-微波协同提取铁皮石斛叶多糖具有提取得率高、时间短的优点,铁皮石斛叶多糖具有一定的抗氧化活性,但弱于VC。

响应面法优化铁皮石斛叶闪式提取工艺

目的:优化铁皮石斛叶多糖的提取工艺。方法:使用闪式提取法对铁皮石斛叶中的多糖成分进行提取,苯酚-硫酸法检测多糖含量,在单因素试验基础上,以料液比、提取时间、提取次数为影响因素,得率为响应值,采用Box-Behnken响应面法,优选最佳提取工艺技术参数。结果:最佳提取工艺条件为以25倍量水提取铁皮石斛叶多糖3次,每次90s,得率为11.52%,与理论得率11.77%接近。结论:经Box-Behnken响应面法优选的铁皮石斛叶多糖的提取工艺,得率与理论值较吻合,模型选用合理有效。

铁皮石斛叶饮料的加工工艺

以浙江温州产铁皮石斛叶为主要原料,并复配石斛鲜茎、杭白菊、西洋参,研究了铁皮石斛叶饮料加工工艺及产品配方。采用正交试验确定了最优配方为石斛鲜茎0.50%、石斛干叶0.50%、杭白菊0.10%、西洋参0.025%,并对产品的稳定性及保质期进行研究。所得铁皮石斛叶饮料色泽淡黄,澄清透明,口味柔和清爽,风味独特。产品含有石斛多糖1 000~1 500 mg·L^(-1)。

不同生长年限铁皮石斛叶主要功效成分及抗氧化活性分析

铁皮石斛是一种以茎入药的药食两用中药,为了开发铁皮石斛叶资源,以不同生长年限铁皮石斛叶为试验材料,分析其主要功效成分及抗氧化活性。结果表明:不同年限的铁皮石斛叶中均含有较丰富多糖、总黄酮和总酚类以及生物碱类,其中三年生铁皮石斛叶中多糖的含量最高,为146.6 mg/g;一年生铁皮石斛叶中含量最少,仅为119.7mg/g;两年生叶中黄酮含量最高,为14.75 mg/g,总多酚和总生物碱的含量均以三年生铁皮石斛叶中含量最高,分别达127.1 mg/g和0.123 mg/g;不同生长年限的铁皮石斛叶都具有较强的DPPH自由基清除能力,特别是其醇提物的抗氧化活性效果较好。因此铁皮石斛叶具有开发成健康食品和天然抗氧化剂的潜力,是一种经济前景广阔的植物材料。

复方铁皮石斛叶超微粉改善高脂血症小鼠的脂质代谢作用

观察复方铁皮石斛叶超微粉不同配比对高脂高糖致高脂血症模型小鼠的影响。采用高脂高糖饲料喂养制备高脂血症模型小鼠,造模成功后灌胃给予复方铁皮石斛叶超微粉(铁皮石斛叶超微粉和山楂精提物不同配比依次为1:1、1:2、1:4、2:1、4:1)连续9周。检测血清中胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、谷草转氨酶(ALT)和谷丙转氨酶(AST)水平;末次给药后,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)水平;检测肝脏中胆固醇(TC);HE染色观察小鼠肝脏组织形态学。结果表明,复方铁皮石斛叶超微粉(4:1)能有效缓解高脂血症,降低血清TC、LDL-c、MDA、Ox-LDL水平,下降幅度分别为40.84%、36.67%、5.69%、8.22%(p<0.01),血清SOD活性提高5.48%(p<0.01);肝脏TC水平下降14.10%(p<0.05);肝脏重量降低31.35%(p<0.01),能改善肝脏中脂肪沉积。上述结果明确了复方铁皮石斛叶超微粉(4:1)给药组效果较好,可以改善高脂高糖致小鼠血脂异常、肝脏病变。

铁皮石斛叶干粉对蛋鸡盲肠菌群、短链脂肪酸、免疫性能和肠道屏障功能的影响

本试验旨在研究日粮中添加铁皮石斛叶干粉对京红1号蛋鸡免疫性能、盲肠菌群多样性、盲肠内容物短链脂肪酸含量、十二指肠肠道屏障和肠道炎症相关基因表达的影响。选用体重相近约为1 kg,19周龄的京红1号蛋鸡240只,随机分为3个组,每个组10个重复,每个重复8只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加1 200 mg/kg和3 600 mg/kg铁皮石斛叶干粉,试验期20周。结果显示:3 600 mg/kg铁皮石斛叶组脾脏指数、血清总蛋白、血清球蛋白和血清IgG含量显著高于对照组;1 200 mg/kg和3 600 mg/kg铁皮石斛叶组脱硫菌门(Desulfobacterota)相对丰度极显著低于对照组;与对照组相相比,1 200 mg/kg和3600mg/kg铁皮石斛叶组拟杆菌属(Bacteroidales)相对丰度显著增高,脱硫菌属(Desulfovibrio)、梅尔海拉菌属(Mailhella)和α-变形菌(Alphaproteobacteria)相对丰度显著减少;3 600 mg/kg铁皮石斛叶组十二指肠闭锁蛋白(Occludin)、钙黏蛋白(Cadherin)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、紧密连接蛋白-3(Claudin-3)、紧密连接蛋白-5 (Claudin-5)、闭合小环蛋白-1(ZO-1)、闭合小环蛋白-2 (ZO-2)、闭合小环蛋白-3 (ZO-3)基因的mRNA表达量较对照组显著上调;1 200 mg/kg铁皮石斛叶组十二指肠Occludin、Claudin-3、ZO-3基因的mRNA表达量较对照组显著上调;1200mg/kg和3600mg/kg铁皮石斛叶组十二指肠白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-2α(IL-2α)、TOLL样受体-2(TLR2)、干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β3(TGF-β3)、抗肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因的mRNA表达量较对照组显著下调。本试验结果表明,在日粮中添加铁皮石斛叶干粉能增加盲肠菌群多样性,降低产硫菌和条件致病菌α-变形菌的丰度,并促进肠道屏障功能,降低肠道炎症,以添加量为3 600 mg/kg为宜。

基于灰色关联度的叠鞘石斛叶抗氧化部位的筛选

以不同浓度乙醇对叠鞘石斛[Dendrobium aurantiacum Rchb.f.var.denneanum(Kerr.)Z.H.Tsi.]叶进行提取,再用不同极性溶剂对抗氧化活性较高的60%乙醇粗提取物进行萃取,分别得到石油醚层、二氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层和水层,采用超高效液相色谱法(ultra performance liquid chromatography,UPLC)和紫外-分光光度法对各部位进行成分分析,以DPPH自由基清除活性为指标,利用灰色关联度进行相关性分析,筛选主要的抗氧化活性部位。其中,总黄酮在正丁醇层最高(24.89%);多糖在水层最高(0.23%);各萃取层均有抗氧化活性,DPPH自由基清除能力强弱顺序为水层>正丁醇层>乙酸乙酯层>二氯甲烷层>石油醚层。筛选出正丁醇层、水层为抗氧化主要活性部位,其抗氧化活性是黄酮类、多糖等成分协同作用的结果,为进一步提取抗氧化活性化合物,开发天然抗氧化剂提供一定的指导。

金钗石斛叶中总黄酮的提取分离及体外抗阿尔茨海默病活性研究

目的:对金钗石斛叶中总黄酮进行提取分离,并考察其体外抗阿尔茨海默病(AD)活性。方法:采用超声提取法提取金钗石斛叶中总黄酮,将所得浸膏用水分散后分别用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,采用显色反应和薄层色谱法对各极性提取物进行定性分析,硝酸铝-亚硝酸钠法定量分析各提取物中总黄酮含量。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除试验考察各提取物的体外抗氧化活性,硫黄素T法考察各提取物对Aβ_(42)蛋白聚集的抑制作用,紫外-可见光谱扫描法测定各提取物对金属离子(Cu^(2+),Fe^(3+)和Zn^(2+))的螯合能力,以考察其体外抗AD活性。结果:乙酸乙酯、正丁醇、水提取物中均含有黄酮成分,含量分别为0.03、0.12、0.05 mg/m L。3种提取液对DPPH自由基的半数清除浓度(IC_(50))分别为0.021、0.011、0.013 mg/m L,对Aβ_(42)蛋白聚集的抑制率分别为43.77%、52.28%、38.42%,对金属离子具有一定的螯合能力,其中尤以对Cu^(2+)的螯合作用最为明显。结论:金钗石斛叶中总黄酮具有较好的抗氧化、抑制Aβ_(42)蛋白聚集及螯合金属离子的能力,具有一定的体外抗AD活性,且以正丁醇提取物效果最明显。

铁皮石斛叶中黄酮碳苷类成分分离、鉴定及抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

目的分离、鉴定铁皮石斛叶中的黄酮碳苷类成分,并评价其体外抑制α-葡萄糖苷酶的活性。方法采用大孔吸附树脂和制备型高效液相色谱法对铁皮石斛叶中的黄酮碳苷类成分进行分离和纯化,通过紫外光谱、核磁共振、高分辨电喷雾离子化质谱等波谱方法对化合物进行推导和鉴定。考察黄酮碳苷类成分与阳性对照(阿卡波糖)的α-葡萄糖苷酶体外抑制活性。结果从铁皮石斛叶中分离得到5个芹菜素-6,8-C-二糖苷,鉴定为芹菜素-6-C-α-L-鼠李糖-8-C-β-D-异鼠李糖(1)、夏佛塔苷(2)、异夏佛塔苷(3)、异佛莱心苷(4)和佛莱心苷(5)。化合物1~5和阿卡波糖抑制α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度分别为(1.79±1.27)、(2.05±0.72)、(1.93±0.67)、(1.09±0.46)、(1.36±0.58)、(18.69±1.24)μmol/L。结论从铁皮石斛叶中分离得到5个具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的芹菜素-6,8-C-二糖苷类成分,其中化合物1为新化合物,化合物2首次从该植物中分离得到。

铁皮石斛叶多糖对秀丽隐杆线虫体内抗衰老作用

目的:基于模式生物秀丽隐杆线虫(以下简称线虫)探究铁皮石斛叶多糖的抗衰老能力。方法:采用含不同质量浓度(0.5、1.0、2.0 mg/mL)铁皮石斛叶多糖的大肠埃希氏菌OP50菌液每天饲喂线虫,以饲喂大肠埃希氏菌OP50菌液组作为空白对照,观察铁皮石斛叶多糖对线虫寿命、生殖能力、运动能力和应激能力的影响,同时测定线虫体内活性氧水平及抗氧化酶的酶活力,分析铁皮石斛叶多糖对线虫体内抗氧化能力的影响。结果:与空白对照组线虫相比,在本实验考察的质量浓度范围内,铁皮石斛叶多糖均可延长线虫的寿命,提高其运动、应激能力,同时不会损害线虫的生殖能力,并且能有效提高过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活力,显著降低线虫体内丙二醛含量(P<0.05)。结论:铁皮石斛叶多糖可能通过提高线虫抗氧化酶活力及提高线虫抗应激能力,降低线虫体内活性氧水平并减缓细胞氧化损伤,进而发挥延长线虫寿命的功效。

铁皮石斛叶和黄精单用及配伍对自发性高血压大鼠降压作用的研究

目的:研究铁皮石斛叶、黄精单用及配伍对自发性高血压(SHR)大鼠的降压作用。方法:将SHR大鼠随机分为铁皮石斛叶单用组(0.5g/kg·d)、黄精单用组(0.5g/kg·d)、低、中、高剂量合用组(0.5、1.0、3.0g/kg·d)、模型组,每组8只,治疗2周,每周测量1次给药后2小时和24小时血压。结果:在整个治疗周期中,所有治疗组收缩压(SBP)和舒张压(DBP)均显著低于同期模型组(P<0.01或P<0.05),且高剂量合用组SBP和DBP均显著低于中剂量合用组(P<0.01或P<0.05),低剂量合用组DBP显著高于中剂量合用组(P<0.01或P<0.05)。在第1次给药2小时及给药2周2小时,铁皮石斛叶组、黄精组SBP和DBP均显著高于同期中剂量合用组(P<0.01或P<0.05)。结论:铁皮石斛叶与黄精配伍用于降血压具有显著的协同增效作用,且低、中、高剂量合用组对SHR大鼠的降压作用存在明显的量效递增关系。

烘干温度对铁皮石斛叶多糖抗氧化活性影响的研究

本论文主要探讨不同烘干温度对铁皮石斛叶多糖得率和抗氧化活性的影响。结果表明:不同实验温度下,40℃烘箱烘干后铁皮石斛叶多糖得率最高,达到26.93%且抗氧化能力最强。该条件下多糖提取液浓度为2.5 mg/mL时,对羟自由基消除率、超氧自由基消除率、DPPH自由基消除率分别为48.9%、21.9%、35.9%。说明烘干温度会显著影响铁皮石斛叶多糖的得率和抗氧化活性,随着烘干温度的升高,多糖的得率和抗氧化活性均会随之降低。研究结果可为铁皮石斛叶进一步开发利用提供参考依据。

苦荞石斛叶复合发酵酒的工艺优化

以苦荞和铁皮石斛叶为主要原料,以酒精度和总酸含量为指标,通过单因素试验及正交试验优化苦荞石斛叶发酵酒的生产工艺。结果表明,其最优发酵条件为发酵时间9 d,接种量1.5%,发酵温度32℃,白砂糖添加量18%。在此工艺条件下制得的苦荞石斛叶复合发酵酒香气宜人,酸度适中,总酸为8.8%,酒精度为7.8%Vol。

铁皮石斛叶总黄酮的大孔树脂纯化工艺及抗氧化活性

研究铁皮石斛叶总黄酮(Total flavonoids of Dendrobium officinal leaf, TFDL)的D101型大孔吸附树脂纯化工艺及其抗氧化活性。以动态吸附率、解吸率和总黄酮含量为指标,对影响大孔吸附树脂纯化效果的因素进行分析,确定最优的吸附-解吸附工艺条件;以抗坏血酸(Vc)和乙二胺四乙酸(EDTA)为阳性对照,采用1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH)法、2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基(ABTS^+)法和菲洛嗪(Ferrozine)法测定TFDL对DPPH和ABTS^+的抗氧化活性以及对金属离子(Fe^(2+))的螯合能力。结果表明:总黄酮的最佳纯化工艺为上样液浓度2.2 mg/mL、上样液体积16倍床体积(Bed volume, BV)、上样液pH值2.4、洗脱液80%乙醇、洗脱体积3.25 BV(解吸率达到90.83%),室温,总黄酮含量可达到193.95 mg/g;在DPPH和ABTS^+自由基清除以及Fe^(2+)的螯合3种抗氧化体系中,TFDL抗氧化活性具有浓度依赖性,清除DPPH、ABTS^+和Fe^(2+)的半数抑制浓度(IC_(50))分别为0.1123、0.7845 mg/mL和0.6434 mg/mL,其中对DPPH的清除能力最强,即TFDL具有较强的提供氢原子的能力。D101大孔吸附树脂适用于对TFDL的分离纯化,铁皮石斛叶总黄酮类化合物具有较强的抗氧化活性,有进一步开发的价值。