石斛散对人视网膜神经细胞凋亡的影响

目的探讨石斛散治疗视网膜变性类疾病方面的作用及机制,为临床治疗同类疾病提供药理学依据。方法以人视网膜神经细胞为研究对象,用AnnexinV+PI为染料标记的凋亡试剂盒,利用流式细胞仪分析药物干预后不同组别中各类凋亡细胞及活细胞的比例。结果正常情况下,对照组活细胞占61·32%,石斛散组为73·8%,两组比较有显著统计学差异。用1mmol/L的谷氨酸干预细胞2h后,活细胞比例降为44·23%,而晚期凋亡细胞和死亡细胞分别增为24·90%和21·63%。预先给予石斛散干预的中药组,活细胞明显多于对照组,其他各类细胞少于对照组。结论石斛散具有抵抗谷氨酸损伤,延缓视网膜神经细胞凋亡过程的作用。

石斛散对体外培养人视网膜细胞的作用

目的观察中药方剂石斛散及单味药对人视网膜细胞的增生以及谷氨酸损伤的保护作用,探讨其在视网膜细胞损伤或变性类疾病方面的作用及机理,为临床治疗同类疾病提供依据。方法体外培养人视网膜细胞,通过四甲基偶氮唑盐实验观察石斛散复方以及各单味药对视网膜细胞增生的影响。另用Rhodamine123标记培养的视网膜细胞,通过激光共聚焦扫描显微镜动态观察和记录不同药物作用下细胞的线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)变化。结果体外培养人视网膜细胞贴壁、伸展以及生长良好。四甲基偶氮唑盐实验:石斛散组1.58g·L-1和0.50g·L-1以及石斛组5.00g·L-1对人视网膜细胞活性分别增加21.8%、14.2%和13.4%。MMP实验:石斛散轻度升高MMP,增加约13.5%,同时它可以抵抗谷氨酸损伤细胞后引起的MMP下降,由降低46.4%减少为16.2%。结论石斛散能够影响人视网膜细胞线粒体功能、促进细胞活性、抵抗谷氨酸对人视网膜细胞损伤作用。可作为临床治疗视网膜变性类疾病的一种选择。

石斛散对人视网膜神经细胞钙离子变化的影响

目的通过观察石斛散对人视网膜神经细胞内钙离子持续升高导致的细胞凋亡的保护作用,探讨其在治疗视网膜变性类疾病方面的作用及机制,为临床治疗同类疾病提供药理学依据。设计实验性研究。研究对象体外培养的人眼视网膜神经细胞。方法利用体外培养的贴壁、伸展以及生长良好人视网膜神经细胞,用Fluo3／AM标记,通过激光共焦扫描显微镜动态观察和记录石斛散和维拉帕米对细胞内钙离子水平以及谷氨酸引起的钙超载的影响。主要指标细胞内钙离子水平(荧光强度)。结果加入谷氨酸后,荧光强度较原基础值增加88％;而石斛散可使荧光强度降低14．8％;维拉帕米降低幅度为57．3％。对先用谷氨酸干预的细胞,石斛散不能降低胞内钙离子水平,但预先用石斛散干预的细胞,谷氨酸升高胞内钙离子30％,与未干预组比较有统计学差异(P=O．000)。结论石斛散具有降低体外培养人视网膜神经细胞内钙离子的作用,同时可以抵抗谷氨酸损伤细胞后引起的胞内钙离子升高,提示其具有抵抗钙超载,抑制视网膜细胞凋亡的作用。

正交设计联用Box-Behnken效应面法优选复方石斛清肺散提取工艺

目的采用正交设计和Box-Behnken响应曲面法优选复方石斛清肺散最佳提取工艺。方法出膏率、橙皮苷含有量为评价指标,通过正交设计初步优选提取工艺,Box-Behnken效应面法进一步优化工艺,从可行性和经济性确定最终提取工艺条件。结果正交设计优选的最佳工艺为12倍量50%乙醇,回流提取3次,每次1.5 h;效应面法优化工艺为14倍量32%乙醇,回流提取3次,每次1.5 h。结论对比验证试验表明,Box-Behnken效应面法优化后提取溶剂用量稍增加,但乙醇体积分数显著降低,经济成本将大幅降低。

正交设计优选复方石斛清肺散的煎煮工艺研究

目的利用正交设计优选复方石斛清肺散处方中药材的最佳工艺条件。方法以出膏率和橙皮苷含量为指标,采用HPLC法检测复方石斛清肺散中橙皮苷含量。并以L9(33)正交设计试验,对药材煎煮的水用量、煎煮次数和煎煮时间进行正交优选。结果最佳煎煮工艺为:10倍量水,浸泡35 min煎煮3次,每次煎煮1 h。方法学考察表明,橙皮苷在66.93~334.67 mg/L内线性关系良好;精密度试验、稳定性试验、重复性试验均良好。结论该含量测定方法与优选的煎煮工艺条件,操作简单,稳定,可靠,可为药品实际生产提供参考。

复方石斛清肺散干燥工艺研究

目的:研究考察复方石斛清肺散的干燥工艺,旨在确定散剂处方部分药材提取液的干燥工艺,为产品实际生产和应用提供参考依据。方法:以橙皮苷的含量及转移率为指标,评价比较不同干燥工艺测定结果。结果:复方石斛清肺散的最佳干燥条件为减压干燥,即-0.07MPa、60℃条件干燥。结论 :该方法确定了复方石斛清肺散的干燥工艺,更高效、稳定、可靠,保证产品质量,可为实际生产应用提供依据。

复方石斛清肺散清咽功能研究

目的:考察复方石斛清肺散的清咽功能。方法:将96只健康雄性大鼠随机分为六组(受试药物高、中、低组,中药阳性对照组,西药阳性对照组和空白对照组),每组8只,分别给予不同浓度的受试药物、相应的阳性药物和蒸馏水,连续灌胃32天,每天1次。实验结束当天再给予1次药物,进行棉球植入实验及足趾肿胀实验。将40只小鼠按体重随机分为五组(受试药物高、中、低组,阳性对照组和空白对照组),分别给予不同浓度的受试药物、相应的阳性药物和蒸馏水,连续灌胃14天,每天1次。实验结束当天再给予1次药物,进行耳肿胀实验。结果:高、中剂量组1、2、4、6h足趾肿胀率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。棉球肉芽肿与耳肿胀实验的高剂量组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:复方石斛清肺散清咽功能的动物实验结果为阳性,即其具有清咽功能。

复方石斛清肺散的成型工艺研究

目的对复方石斛清肺散的成型工艺进行考察研究,旨在确定散剂处方的处理最佳条件及成型工艺路线,为产品实际生产和应用提供可靠依据。方法通过测定休止角α、相对临界湿度CRH、粒度等,对比复方石斛清肺散的各工艺路线优选和产品的性质参数,基于相关性原理对数据分析,优选最佳工艺路线。结果复方石斛清肺散的最佳工艺路线是半提微粉工艺路线,成型的散剂为黄暗棕褐色细粉,干燥后含水量2%~3%,规定含水量≤6%;4种散剂的CRH≥60%,休止角α处于40~45°;散剂的主要细圆颗粒粒径为15~30μm,部分棒状微粒粒径为100μm,均符合相关要求。结论该复方石斛清肺散的半提取微粉成型工艺,更稳定、可靠,提高了该中药制剂产品质量,可为产品实际生产应用提供可靠保证。

石斛三七降糖散对KK-Ay小鼠的降糖降脂作用研究

目的:研究石斛三七降糖散对KK-Ay小鼠的降糖降脂作用,为评价石斛三七降糖散治疗Ⅱ型糖尿病的作用提供参考。方法:将KK-Ay糖尿病小鼠根据随机血糖水平均分为模型组、石斛三七降糖散1.5、3、6g/kg/d剂量组、二甲双胍组(0.26g/kg/d),每组20只,雌雄各半;另设20只C_(57)BL/6J小鼠作为正常组,每日给药2次,连续给药4周。每周观察记录摄食量、体重、随机血糖、空腹4h血糖等指标,给药4周后采血检测血脂、糖化血红蛋白水平和胰岛素敏感指数。结果:与模型组比较,给药2周、3周、4周,雌性KK-Ay小鼠石斛三七降糖散6g/kg剂量组随机血糖、空腹4h血糖、体重均显著降低,雌性KK-Ay小鼠石斛三七降糖散3g/kg剂量和雄性KK-Ay石斛三七降糖散6g/kg剂量组的随机血糖显著降低;给药2周时石斛三七降糖散6g/kg剂量组随机血糖降糖率最高,雌性为53.73%,雄性为41.71%;给药4周后,雌性和雄性KK-Ay小鼠石斛三七降糖散6g/kg剂量组总胆固醇(CHO)和甘油三酯(TG)显著低于模型组;雌性和雄性KK-Ay小鼠石斛三七降糖散6g/kg剂量组的胰岛素敏感指数(ISI)显著高于模型组。结论:石斛三七降糖散有改善Ⅱ型糖尿病KK-Ay小鼠高血糖、肥胖和脂质代谢紊乱的作用,对雌性KK-Ay小鼠的降糖效果优于雄性。

石斛二参散治疗原发性干燥综合征疗效观察

目的:通过与羟氯喹治疗方案对比,评价中药自拟方石斛二参散对缓解干燥综合征患者口干症状的疗效和安全性。方法:39例干燥综合征患者随机分成治疗组(20例)和对照组(19例),治疗组给予益气养阴生津中药石斛二参散,对照组给予羟氯喹治疗。治疗前和治疗3个月后分别观察临床疗效,测定静态唾液流量,同时选20名健康人为正常组测定静态唾液流量。结果:治疗前两组患者静态唾液流量均低于正常组。治疗3个月后,两组患者静态唾液流量都升至正常范围(P<0.05)。治疗组总有效率(70%),对照组总有效率(63.16%),两者无明显统计学差异(P>0.05)。治疗组在缓解口干及口腔烧灼感症状方面疗效显著(P<0.05)。结论:中药石斛二参散能够改善干燥综合征患者的自觉症状,并在改善口干、口腔烧灼感症状方面疗效显著。