高效液相色谱法测定番石榴叶提取物中的游离鞣花酸

研究高效液相色谱法测定番石榴叶中鞣花酸的方法。以甲醇(含0.01%HCl)作为提取液,70℃加热回流;色谱条件为:Intersil ODS-SP色谱柱(250mm×4.5mm,5μm),柱温35℃,进样体积10μL,紫外检测波长254nm;流动相为3%冰乙酸(A)-纯甲醇(B);梯度洗脱程序:0～4min B由20%至45%,保持6min,10～15min由45%至70%,15～20min由70%至100%,保持1min。结果表明:本方法的相对标准偏差为0.6%,鞣花酸在0.5～200mg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.9998,加标回收率为95.86%～98.31%。本方法用于测定鞣花酸是切实可行的;番石榴叶片中鞣花酸含量高低与叶片的成熟度有关,其中幼嫩叶含量为0.814mg/g、成熟叶含量为0.023mg/g,而老叶中未检出。

番石榴叶提取物对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎结肠组织的保护作用

目的:研究番石榴叶提取物对大鼠结肠炎组织损伤的保护作用及其机制.方法:用健康Wistar大鼠建立大鼠结肠炎模型,灌胃用药2wk后,评价大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI),检测结肠组织髓过氧化物酶(MPO)及超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和细胞肿瘤因子(TNF)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)水平.结果:不同剂量番石榴叶提取物(200,500,800mg/kg)灌胃均能不同程度降低模型大鼠CMDI(2.62±0.47,2.06±0.54,1.83±0.43vs3.15±0.39,P<0.05,P<0.01,P<0.01),MPO活性(2240.78±479.26,2078.42±377.91,1748.85±236.71nkat/gvs2695.37±624.79nkat/gP<0.05,P<0.01,P<0.01),减少MDA含量(2.16±0.41,1.97±0.35,1.96±0.30,P<0.05,P<0.01,P<0.01),提高SOD活性(3618.06±538.44,3756.92±577.45,4197.51±375.74nkat/gvs2663.37±603.79,P<0.05,P<0.01,P<0.01),降低TNF(2.65±0.40,2.51±0.47,2.21±0.41μg/Lvs3.30±0.63μg/L,P<0.05,P<0.01,P<0.01)、IL-8(1.20±0.33,1.05±0.24,0.92±0.13μg/Lvs1.53±0.38μg/L,P<0.05,P<0.01,P<0.01)、IL-10(39.36±9.65,50.26±11.32,59.68±13.65ng/Lvs30.74±12.91ng/L,P<0.05,P<0.01,P<0.01)水平,且与用药剂量呈一定量效关系.结论:番石榴叶提取物通过拮抗氧化、免疫调节、损伤修复作用缓解结肠炎大鼠炎症反应,减轻结肠损伤.

番石榴叶提取物体外抗轮状病毒的实验研究

轮状病毒是全世界病毒性胃肠炎的主要致病因素之一.初步估计全球每年大约有八十万人死于轮状病毒性腹泻.无论在发达国家或是发展中国家,3岁前的婴儿约90%都要受轮状病毒感染[1].但轮状病毒感染,目前尚无特异的治疗方法,临床多以对症治疗为主.

石榴叶提取物中鞣花酸在大鼠体内药物动力学研究

目的通过大鼠口服石榴叶提取物,研究其中活性成分鞣花酸的药动学特征。方法采用反相HPLC法,紫外检测,应用药动学软件3p87拟合大鼠体内鞣花酸的药动学模型。结果鞣花酸在大鼠体内呈二室模型分布,主要药动学参数为:α=1.07h-1,β=0.12h-1,Ka=5.67h-1,t1/2α=0.65h;t1/2β=5.94h;t1/2Ka=0.12h;K21=0.36h-1;K10=0.35h-1;K12=0.48h-1;AUC=0.85g·h·L-1。结论鞣花酸药动学特征为口服血药浓度低,大部分经胃吸收,达峰时间短,快速吸收、快速分布消除。石榴叶中鞣花酸的吸收大于鞣花酸单体的吸收。

石榴叶提取物清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成的研究

[目的]探讨石榴叶提取物对亚硝酸盐的清除和亚硝胺合成的阻断能力。[方法]在体外模拟胃酸条件下测定石榴叶提取物对亚硝酸盐的清除率以及对亚硝胺合成的阻断率,用盐酸萘乙二胺法测定石榴叶提取物对亚硝酸钠的清除率,用α-萘胺法测定石榴叶提取物对亚硝胺合成的阻断率,并与Vc的作用效果作比较。考察石榴叶提取物的浓度、反应时间以及反应温度对石榴叶提取物清除亚硝酸盐效果的影响。[结果]结果表明,随着石榴叶提取物浓度的增加、反应时间的延长以及反应温度的升高,石榴叶提取物对亚硝酸盐的清除能力以及对亚硝胺的阻断能力均有所提高。[结论]研究结果为进一步开发利用石榴叶提供了理论参考依据。

DPPH自由基比色法测定番石榴叶提取物抗氧化活性的研究(英文)

本文用2,2-联苯-1-三硝基苯肼(DPPH·)比色法测定了番石榴叶(PsidiumguajavaL.)的抗氧化活性,并使用了三个不同参数抑制率、EC50和AE来评价其抗氧化活性。结果表明,浓度越高,番石榴叶提取物清除自由基的能力越强,其中AE是表示抗氧化活性的最有效的能数。本研究表明番石榴叶提取物是一种有效的、有开发价值的天然抗氧化剂。

番石榴叶提取物体外抑菌和抗氧化作用的研究

为了研究番石榴叶提取物的体外抑菌和抗氧化作用,试验采用试管倍比稀释法测定番石榴叶提取物对猪大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果,采用总抗氧化检测试剂盒和紫外-可见分光光度法分别测定番石榴叶提取物的抗氧化效果及其总黄酮和总酚的含量。结果表明:番石榴叶不同极性提取物对猪大肠杆菌的抑菌效果差异不明显,番石榴叶石油醚提取物对猪金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好(0.195 mg/mL);总抗氧化活性由大到小依次是番石榴叶正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物和石油醚提取物。番石榴叶正丁醇提取物总酚含量最高,为215.55 mg/g;番石榴叶乙酸乙酯提取物总黄酮含量最高,为42.59 mg/g。说明番石榴叶提取物具有抑菌作用,提取物中总酚含量越高其抗氧化效果越好。

番石榴叶提取物调节白色脂肪组织棕色化作用机制研究

目的:探究番石榴叶提取物调节脂肪细胞分化的作用机制。方法:6周龄雄性SPF级db/db小鼠24只、同龄C57BL/6J正常组小鼠6只,将符合纳入标准的db/db小鼠根据体重、血糖随机分为模型组和番石榴叶提取物高剂量组、番石榴叶提取物中剂量组、番石榴叶提取物低剂量组,并将番石榴叶提取物按高、中、低剂量进行灌胃,于4周后空腹脱臼处死所有小鼠,分别取后腿腓肠肌组织、皮下脂肪组织进行原代成肌细胞、原代脂肪组织SVF细胞的培养、接种和传代。培养48 h后收集细胞并提取蛋白,Western blot法检测各组成肌细胞PGC-1α、FNDC5蛋白和各组脂肪组织SVF细胞Prdm16蛋白的表达。结果:第4周时,与模型组小鼠相比,番石榴叶提取物高剂量组小鼠体重、血糖、低密度脂蛋白降低(均P<0.05)。番石榴叶提取物高剂量组小鼠成肌细胞PGC-1α、FNDC5蛋白表达升高,脂肪组织SVF细胞Prdm16蛋白表达较模型组升高(均P<0.05)。结论:番石榴叶提取物高剂量可通过促进白色脂肪细胞向棕色脂肪细胞分化,提高棕色脂肪水平,从而通过增加机体的能量代谢来调节脂质代谢。

番石榴叶提取物对抵抗素诱导的人膝关节软骨细胞炎症的缓解作用及机制研究

目的:探讨番石榴叶提取物(GLE)对抵抗素诱导的人膝关节软骨细胞炎症的缓解作用及机制。方法:对人膝关节软骨细胞进行培养,并将其分为对照组、抵抗素组及不同浓度(30、60、120μg/ml)GLE组。使用500 ng/ml抵抗素诱导分离的软骨细胞。通过实时荧光定量(RT-qPCR)检测细胞微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)表达水平。通过CCK-8实验检测各组细胞增殖情况。通过流式细胞术和Western blot检测各组细胞凋亡率及凋亡蛋白表达情况。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和TNF-β1表达情况。结果:与对照组比较,抵抗素组软骨细胞miR-181a-5p表达水平升高(P<0.05)。与抵抗素组比较,60、120μg/ml GLE组软骨细胞miR-181a-5p表达水平降低(均P<0.05)。与对照组比较,抵抗素组细胞OD值降低(P<0.05)。与抵抗素组比较,GLE组细胞OD值升高(P<0.05)。与对照组比较,抵抗素组细胞凋亡率、裂解形式的半胱氨酸蛋白酶蛋白-3(Cl-caspase-3)及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)关联X蛋白(Bax)表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低(均P<0.05)。与抵抗素组比较,GLE组细胞凋亡率、Cl-caspase-3及Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(均P<0.05)。与对照组比较,抵抗素组IL-6、TNF-α及TNF-β1水平升高(均P<0.05)。与抵抗素组比较,GLE组IL-6、TNF-α及TNF-β1炎症因子水平降低(均P<0.05)。结论:番石榴叶提取物可缓解抵抗素诱导的人膝关节软骨细胞炎症,其机制可能与降低miR-181a-5p表达有关。

番石榴叶提取物-槲皮素的抑菌效果

研究番石榴叶提取物-槲皮素对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌的抑制作用。采用滤纸圆片法,进行抑菌药效试验。结果表明:番石榴叶提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌的抑制作用很明显。其中对大肠杆菌、沙门氏菌抑制能力最强,MIC=1.25%,抑菌圈直径为13.5 mm、18.7 mm,对金黄色葡萄球菌的抑制作用较弱,MIC=5%,抑菌圈直径为10.5 mm。

番石榴叶提取物对大鼠糖脂代谢和关节软骨的影响

本研究旨在探讨番石榴叶提取物对2型糖尿病(T2DM)大鼠的影响及其在膝关节液中MMP-3水平的调节作用。实验采用高强度跳跃运动作为干预措施,观察大鼠在番石榴叶提取物干预下的糖脂代谢、关节软骨损伤和炎症反应指标的变化。结果显示,番石榴叶提取物可显著改善T2DM大鼠的糖脂代谢和胰岛素敏感性,降低血清中氧化促炎因子的水平,并减轻膝关节软骨损伤程度。研究表明,番石榴叶提取物可能通过调节胰岛素抵抗、抗氧化和抑制炎症反应的机制发挥其保护作用。这些发现为番石榴叶提取物在T2DM相关关节损伤的预防和治疗中提供了科学依据。

番石榴叶提取物调节小鼠脂肪组织TNF-α、PPAR-γ基因表达改善肝脏糖调节机制研究

目的:观察番石榴叶提取物对肥胖KKay小鼠脂肪组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)基因表达的影响,探讨其调控肝脏糖代谢AKT信号通路的机制。方法:6周龄雄性肥胖KKay小鼠16只,适应性喂养2周后,随机分为对照组和番石榴叶水提物组,所有动物给予高脂饲料喂养,番石榴叶水提物组按0.11g/kg灌胃(相当于生药材2g/kg),对照组给予同体积蒸馏水灌胃,疗程为4周。每周监测进食量、饮水量、体质量;入组时、第2周、第4周时分别进行2h口服葡萄糖耐量实验(OGTT),第29天空腹眼眶取血处死小鼠,分别检测血浆胰岛素、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)水平,计算HOMA-IR指数,留取肝脏组织、附睾上脂肪-80℃备用,RT-PCR法检测脂肪组织TNF-α、PPAR-γ基因表达,Western Blot法检测肝脏组织AKT蛋白表达。结果:与对照组比较,治疗4周后,番石榴叶提取物显著降低KKay小鼠胰岛素水平、改善糖耐量及HOMA-IR指数(P<0.05),下调脂肪组织TNF-α基因表达(P<0.05),上调脂肪组织PPAR-γ基因表达(P<0.05),上调肝脏AKT蛋白表达(P<0.05),对小鼠体质量、血清TG、TC、LDL-C及FFA无显著影响。结论:番石榴叶提取物通过对脂肪组织TNF-α、PPAR-γ基因表达的调节,影响肝脏糖代谢AKT蛋白表达,改善糖耐量和胰岛素抵抗。

攀枝花地区野生番石榴叶不同提取物降血糖作用研究

目的研究攀枝花地区野生番石榴叶的水提取物、650 m l/L和950 m l/L食用乙醇提取物的降血糖作用。方法雄性昆明种小鼠,诱导葡萄糖性、肾上腺素性和链脲佐菌素性高血糖小鼠模型,比较三种提取物对血糖水平的影响;观察脏器变化,比较体重及肝脏、肾脏、脾脏和胰腺的脏器指数的变化。结果三种提取物能不同程度降低小鼠外源性高血糖、拮抗应激性血糖升高;三种提取物可明显降低糖尿病小鼠血糖水平,水提物、650 m l/L和950m l/L食用乙醇提取物,降糖效率分别为36.3%、33.5%和31.3%。三种提取物中,水提物对小鼠的生长影响较小。结论攀枝花地区野生番石榴叶的水提取物、650 m l/L和950 m l/L食用乙醇提取物具有不同程度的降血糖作用。

石榴叶提取物诱导前列腺癌细胞凋亡并抑制其增殖转移的研究

目的研究石榴叶提取物(pomegranate leaves extract,PLE)对前列腺癌细胞增殖、凋亡及转移能力的影响。方法采用MTT法检测不同质量浓度PLE(终质量浓度分别为12.5、25、50、100、200μg/mL)干预作用不同时间(24、48、72h)对前列腺癌细胞TRAMP-C1、DU145、PC3增殖的影响,克隆形成实验验证PLE对DU145、PC3细胞增殖的长期影响。PLE干预PC3细胞48h后,Hoechst-33258染色观察细胞核内染色质变化,流式细胞术检测细胞凋亡率变化,细胞划痕实验测试细胞迁移运动能力的变化。结果与对照组比较,PLE在12.5~200μg/mL范围内对TRAMP-C1、DU145、PC3细胞增殖具有抑制作用(P<0.05);PLE在6.25~100μg/mL范围内使DU145和PC3集落形成数明显减少(P<0.01)。PLE干预48h后,PC3出现细胞核断裂、产生凋亡小体的现象,随着PLE质量浓度增大,凋亡率逐渐上升(P<0.05),同时PC3细胞向划痕区域迁移生长的能力比对照组低(P<0.01)。结论 PLE能抑制前列腺癌细胞增殖,同时促进PC3细胞凋亡,减弱其迁移能力。

番石榴叶止泻机制的初步研究

用80%酒精提取番石榴叶中的有效成分, 观察提取物对细菌和离体小肠的作用。结果表明: 提取物能抑制大肠杆菌等6种病原菌生长; 降低家兔十二指肠、空肠、回肠等三肠段收缩张力。

槲皮素止泻机制研究

目的研究番石榴叶提取物槲皮素止泻的作用机制。方法观察槲皮素对豚鼠离体回肠收缩活动的影响和对小鼠小肠推进功能的影响,记录其收缩力和推进距离;观察槲皮素对腹腔毛细血管通透性的抑制作用。结果槲皮素抑制离体回肠的收缩,抑制小肠的推进功能,抑制毛细血管的通透性。结论槲皮素能通过抑制肠道的蠕动、抑制肠道毛细血管的通透性来发挥其止泻作用,这也是番石榴叶止泻机制之一。