基于P53/Bax/Caspase3信号通路的石萆汤对少弱精子症大鼠的疗效机制研究

目的通过观察石萆汤干预CTX诱导的少弱精子症大鼠模型的治疗效果,分析其对生精细胞凋亡及P53/Bax/Caspase3信号通路的蛋白表达的影响。方法采用复制CTX诱导的少弱精子症大鼠模型,通过给予石萆汤干预,观察了大鼠体重变化和精子质量。研究还采用了HE染色、TUNEL染色法、免疫组织化学法、qPCR法以及Western blotting法来评估睾丸组织的形态学和分子生物学特征。结果(1)精子质量:与正常对照组相比较,模型组的精子密度、精子活力均下降(P<0.05),精子活率低于正常对照组,但不具有差异(P>0.05);而与模型组相比,石萆汤中、低剂量组的精子密度显著高于模型组(P<0.05),但活力与活率与模型组无差异(P>0.05)。(2)HE染色:正常组大鼠睾丸组织中可见各级生精细胞排列整齐,形态规则,染色均匀,生精小管管腔饱满,存在较多精子细胞。与对照组相比,模型组小鼠生精细胞排列不整齐,层次减少,精子细胞明显减少。与模型组相比,石萆汤组的上述病理状态有所改善,生精细胞形态及排列较为正常,与正常组接近。(3)TUNEL染色:正常对照组大鼠睾丸组织形态正常、排列整齐,仅有少量凋亡细胞;与正常组比较,模型组大鼠细胞凋亡数量明显增多(P<0.05);与模型组相比,石萆汤高、低剂量组细胞凋亡数有下降的趋势,但不具有差异性(P>0.05);石萆汤中剂量组细胞凋亡数降低,且差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)免疫组化:在模型组中,细胞质中P53、Bax、Cytc的表达增多(P<0.05),而石萆汤处理组中这些蛋白的表达相对减少(P<0.05)。(5)qPCR:与正常对照组比较,模型组大鼠p53、Bax mRNA含量升高(P<0.05),而Bcl-2 mRNA含量降低(P<0.05)。与模型组比较,石萆汤组Bax mRNA含量明显降低(P<0.05),而p53、Bcl-2 mRNA含量降低(P<0.05);(6)Western Blot法:与正常对照组比较,模型组大鼠睾丸组织的P53、Bax、Cytc、Apaf-1、Pro-caspase-9、Cleaved-caspase-9、Pro-caspase-3、Cleaved-caspase-3蛋白质相对表达量显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白质表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,石萆汤组的P53、Bax、Cytc、Apaf-1、Pro-caspase-9、Cleaved-caspase-9、Pro-caspase-3、Cleaved-caspase-3蛋白质相对表达量明显减少(P<0.05),Bcl-2蛋白质表达显著增高(P<0.05);结论石萆汤对CTX诱导的少弱精子症大鼠的精子质量有改善作用,其机制可能与P53/Bax/Caspase-3信号通路蛋白的表达有关。这一研究为深入理解石萆汤在治疗少弱精子症中的作用机制提供了实验证据。

石萆汤对肾虚夹湿型弱精子症患者精子线粒体酶及精浆锌的影响

目的:探讨石萆汤对肾虚夹湿型弱精子症患者精子活力、精子线粒体酶活性及精浆锌含量的影响。方法:选取符合纳入标准的病例76例,随机分为石萆汤治疗组38例;天然维生素E软胶囊+葡萄糖酸锌片对照组38例,检测两组治疗前后精液常规参数;精子线粒体呼吸链相关酶活性:琥珀酸脱氢酶(SDH)和细胞色素C氧化酶(COX)的水平;全自动精浆生化仪测定精浆锌含量的变化;评估治疗前后中医证候评分。结果:两组治疗后各项精液参数比较,治疗组优于对照组(P<0.05);两组治疗后精子线粒体呼吸链相关酶活性值均有升高,治疗组优于对照组(P<0.05);两组治疗后精浆锌含量升高,治疗组升高幅度高于对照组(P<0.05);两组治疗后中医证候评分,治疗组改善程度明显优于对照组(P<0.01)。治疗16周后再随访12周,治疗组9例夫妇受孕成功,总有效率为86.11%;对照组仅4例夫妇受孕成功,总有效率为72.22%,两组比较有统计学差异(P<0.05)。结论:石萆汤对改善肾虚夹湿证弱精子症患者的精液常规中的活力参数有明显作用,应与其激发精子线粒体酶活性和提高精浆锌含量以及治疗肾虚夹湿证临床症状有关,进而提升不育患者夫妇受孕能力,值得进一步深入研究。

石萆汤治疗肾虚夹湿型弱精子症49例临床观察

目的观察石萆汤治疗肾虚夹湿型弱精子症的疗效。方法将145例符合诊断标准的门诊患者随机分为中药治疗组(A组)49例、西药治疗组(B组)46例、中西医结合治疗组(C组)50例,分别给予石萆汤、左卡尼汀口服液、石萆汤合左卡尼汀口服液治疗,观察3组治疗前与治疗8周后的中医症状评分、精子运动分析活力参数、治疗前后精浆a-葡糖苷酶水平及前列腺液的变化。结果总有效率A组73.46%,B组56.52%,C组88.00%,治疗后在改善中医症状、降低前列腺液白细胞水平上,A组、C组优于B组(P<0.05)。结论石萆汤治疗肾虚夹湿型弱精子症疗效较好。

石萆汤对弱精子症患者精子线粒体膜蛋白PHB及超微结构的影响

目的:探讨石萆汤对肾虚夹湿型弱精子症患者精子线粒体膜蛋白PHB及超微结构的影响。方法:选取福建中医药大学附属人民医院男科门诊就诊的肾虚夹湿型弱精子症患者(60例)和生殖体检者(60例)为研究对象。将生殖体检正常者纳入正常精液组(N组,n=30),检测为弱精子者纳入弱精子组(A组,n=30);确诊为肾虚夹湿型弱精子症的60例患者纳为石萆汤治疗组(T组,n=60)。A组暂未接受相关治疗措施,T组连续口服石萆汤16周。三组受试者均禁欲7d后经手淫方式采集精液,用计算机辅助精液质量分析仪(CASA)分析精液质量;采用荧光探针MitoTracker,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察精子细胞的荧光强度,分析精子细胞线粒体膜蛋白PHB阳性细胞的比例;用透射电镜观察精子细胞线粒体超微结构的变化。结果:三组受试者除精液量比较无统计学意义(P> 0. 05)外,N组受试者部分精子质量指标[精子(a+b)级活动力及精子成活率]、精子线粒体膜蛋白PHB水平均明显高于A、T两组,且T组上述指标检测结果明显高于A组,差异均具有统计学意义(P <0. 05)。MitoTracker荧光探针检测,LSCM观察显示N组可见精子中段结构,类似棒状; T组可见精子中段结构,但较短或弯曲状; A组的精子结构变形;荧光强度A、T组精子弱于N组,但T组优于A组(P <0. 05)。透射电镜观察显示N组精子线粒体鞘完整; A组精子出现水肿、呈现空腔,线粒体肿胀; A组精子线粒体鞘较完整、线粒体肿胀明显减轻、结构较完整、整齐。结论:石萆汤能够改善肾虚夹湿型弱精子症患者精子质量,可通过上调精子线粒体膜蛋白PHB表达阻滞精细胞凋亡,保护精子线粒体超微结构的完整性,来达到治疗弱精子症的目的。

石萆汤治疗肾虚夹湿型少弱精子症不育的疗效及对精液参数、性激素的影响

目的:探讨石萆汤治疗肾虚夹湿型少弱精子症不育的临床效果以及对精液参数、性激素的影响。方法:选取93例肾虚夹湿型少弱精子症不育患者,随机分为研究组48例与对照组45例。对照组给予西医常规治疗,研究组在常规治疗基础上加用石萆汤。对比治疗前后中医症状积分、精液质量[精液量、精子密度、精子活动率、精子活力(a级、a+b级)]以及临床疗效,比较治疗前后性激素水平指标睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)。结果:两组治疗后中医症状积分均较治疗前降低,研究组治疗后低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);两组治疗后精液量、精子密度、精子活动率、a级精子活力及(a+b)级精子活力均较治疗前增高,研究组治疗后均高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);研究组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后血清T均较治疗前升高,LH、FSH水平均较治疗前降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);研究组治疗后血清T高于对照组,LH、FSH水平低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:石萆汤治疗肾虚夹湿型少弱精子症不育患者,可显著减轻患者中医症状,提高精液质量,改善性激素水平,提升临床疗效。

石萆汤对肾虚夹湿型男性不育患者精子DNA完整性的影响

近些年来,随着国家计划生育政策的调整,门诊中就诊的男性不育症比例大幅增加,据统计有15%的夫妇在1年内不能受孕而寻求药物治疗,不育的夫妇中至少50%存在男性精子异常的因素[1]。另外,有较多男性不育症病因不明确,精液常规检查无异常,给临床医生的诊断和治疗带来了困惑。随着人们对男性不育相关因素深入研究,精子DNA损伤作为一项新的评价精子功能的指标,逐渐受到临床的重视。传统的精液常规检查,易受时间和外界环境的干扰,易于波动,已不能对精子的受精能力及男性的生育能力进行准确的评价[2]。中医药在改善精子功能方面有较好的优势,本研究旨在观察石萆汤对肾虚夹湿型男性不育患者精子DNA完整性的影响。

石萆汤对30例肾虚夹湿型弱精子症精浆果糖的影响

目的观察石萆汤对肾虚夹湿型弱精子症合并精浆果糖偏低患者的果糖影响,进一步推测石萆汤治疗肾虚夹湿型弱精子症的可能作用机制。方法将60例肾虚夹湿型弱精子症患者随机分为治疗组(石萆汤口服)和对照组(五子衍宗丸口服)各30例,8周为1个疗程。观察治疗前和治疗8周后精浆果糖的含量以及治疗前后a级精子数量、(a+b)级精子活率的改善情况。结果治疗后2组总有效率分别为85.71%和65.52%,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);治疗后在改善精浆果糖含量、a级精子数量和(a+b)级精子活率水平方面,治疗组明显优于对照组(P<0.05);(a+b)级精子活率与精浆果糖之间存在线性相关性,并且成正相关(P<0.05)。结论石萆汤能有效提高肾虚夹湿型弱精子症合并精浆果糖偏低患者精浆果糖的含量,从而改善精子活动质量。

石萆汤对环磷酰胺干预后大鼠精子DNA碎片率及性激素的影响

目的研究石萆汤对环磷酰胺干预后大鼠精子的DNA碎片率及性激素的影响。方法随机选取8只大鼠为正常组,其余32只大鼠为造模组,造模组连续14 d腹腔注射环磷酰胺(20 mg·kg^(-1)·d^(-1))制备大鼠少弱精子症模型,然后将造模组随机分为模型组、石萆汤低、中、高剂量(6.5625 g/kg、13.125 g/kg、26.25 g/kg)组,每组8只。正常组和模型组给予生理盐水灌胃,石萆汤低、中、高剂量组分别给予相对应的中药剂量灌胃,中药干预35 d后,采用流式细胞仪检测大鼠精子DNA碎片率(DFI);酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、泌乳素(PRL)、雌激素(E_(2))的水平。结果与正常组比,模型组大鼠精子DFI显著增高(P<0.01);与模型组相比,治疗后石萆汤低、中、高剂量组的大鼠精子DFI显著下降(P<0.01);血清性激素水平检测结果显示,模型组T、FSH和LH含量显著降低(P<0.01);E2和PRL含量显著升高(P<0.01);石萆汤低、中、高剂量组均能改善大鼠血清性激素水平,以中剂量最为明显,尤其是提高T的水平(P<0.01)。结论石萆汤能平衡环磷酰胺干预后大鼠的性激素水平,降低大鼠的精子DFI,为临床研究提供实验依据和基础。

石萆汤通过调节线粒体膜蛋白PHB保护线粒体膜电位增强精子功能的探究

目的通过对90例男性不育弱精子症患者及30例正常男性进行分组处理观察石萆汤治疗弱精子症的可能靶点,探究石萆汤治疗肾虚夹湿型弱精子症的分子生物学机制。方法选择2016年8月~2018年6月在福建中医药大学附属人民医院男科门诊就诊的男性不育弱精子症患者和生殖体检者共120例,其中30例正常组与30例弱精子症组患者暂时未接受治疗,60例治疗组患者给予石萆汤治疗16周。治疗前后采用Western blot检测患者精子线粒体膜蛋白PHB及JC-1流式细胞仪检测线粒体膜电位。结果由Western blot结果,我们可以看到弱精子症组的患者精子线粒体膜蛋白PHB表达量明显低于正常组(P<0.05);在给予石萆汤治疗16周后,治疗组患者精子线粒体膜蛋白PHB蛋白表达量显著高于弱精子症组(P<0.05)。通过对3组患者精子JC-1染色后进行流式细胞仪检测发现弱精子症组患者精子线粒体膜电位(红色荧光散点)与正常组和治疗组相比偏向下移,提示弱精子组患者精子症线粒体膜电位降低。而经过石萆汤治疗16周后流式红色荧光散点上移差异具有统计学意义(P<0.05)。结论石萆汤治疗肾虚夹湿型弱精子症可能是通过调控精子线粒体膜蛋白PHB表达进而改变精子线粒体膜电位,最终提高精子活力,增强精子功能,值得在今后临床中应用,同时线粒体膜蛋白PHB可对精子功能进行衡量,可在今后的临床检验中进行检测反映精子功能与状态。

萆薢石莲汤治疗乳糜尿

萆薢石莲汤治疗乳糜尿刘以智（福建省老年医院３５００００）关键词乳糜尿，中医药疗法，萆石莲汤乳糜尿多由湿热为患，其症为小便混浊、乳白如泔浆，排尿时无疼痛。笔者采用自拟萆石莲汤（基本方）治疗，现报告如下。１临床资料２０例中，年龄最小２０岁，最大４５岁；女...

基于“谱效”关系探究石萆汤治疗少弱精子症的药效机制

目的拟揭示少弱精子症验方石萆汤“特征峰成分药效”的谱效关系和药效物质基础。方法采用大鼠实验,其中石萆汤组以2倍人体等效剂量灌胃,空白对照组干预等体积生理盐水,持续给药7 d。使用UHPLC-QE-MS技术对石萆汤口服吸收后进入血液中的成分进行鉴定;通过网络药理学分析获得石萆汤的关键成分、关键靶点和富集通路;对关键入血成分与核心靶点分子予以对接,分析其“谱效”关系。结果在石萆汤中鉴定出异野樱素等41个化合物,并发现11个入血成分。石萆汤可能通过雌激素信号通路等通路来调节性激素水平,以及抗炎、抗氧化的作用,其中异野樱素、藏红花酸等6个成分可与核心靶点形成可视化分子对接。结论石萆汤可通过调节脂质代谢与内分泌失调治疗少弱精子症,其中异野樱素等黄酮类成分可能是石萆汤关键药效成分。