应用石蜡包埋肝组织HBV tDNA和cccDNA定量优化法检测乙型肝炎相关肝癌患者

目的对石蜡包埋肝组织核酸提取法进行优化,提高石蜡包埋肝组织乙型肝炎病毒总的去氧核糖核酸(HBV tDNA)、共价闭合环状去氧核糖核酸(cccDNA)定量检测的灵敏度,检测乙型肝炎(乙肝)相关肝癌患者的癌和癌旁组织中HBV tDNA、cccDNA。方法优化石蜡包埋肝组织核酸提取方法,采用荧光定量PCR法检测37例HBV感染相关肝细胞癌(HCC)患者石蜡包埋肝癌和癌旁组织中HBV tDNA、cccDNA。结果通过优化石蜡包埋肝组织核酸提取方法,核酸得量提高126.3%。HBV tDNA和cccDNA检出率在石蜡包埋肝癌组织中分别为100.0%(37/37)和97.3%(36/37),癌旁组织中均为100.0%(37/37)。HBV tDNA、cccDNA含量以及HBV cccDNA占tDNA的比例在肝癌组织与癌旁组织之间差异无统计学意义(P>0.05)。癌旁组织HBV tDNA与血清HBV DNA呈弱相关(r=0.380,P=0.020)。结论石蜡包埋肝组织核酸提取方法的优化可显著提高HBV相关的HCC患者癌和癌旁组织中HBV tDNA、cccDNA检出率。在癌旁组织中可100.0%检出HBV tDNA和cccDNA,建议对HCC切除术后的患者进行抗病毒治疗,以预防HBV感染相关HCC的复发。

石蜡包埋肝组织乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的检测及临床意义研究进展

目前全世界约有3.5亿慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者[1],每年有约100万人死于乙型肝炎(乙肝)相关肝硬化或肝癌[2]。HBV感染者的临床表现多样化,病毒和疾病活动程度不一,但持续感染的主要原因是肝细胞核内HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)的存在。HBV cccDNA是HBV复制过程中的重要中间体,是HBV mRNA和前基因组RNA(pgRNA)的合成模板及病毒持续感染的关键因素[3-7]。HBV cccDNA半衰期长,不易降解。