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人源抗破伤风毒素单链二硫键稳定抗体的重组设计与表达
被引量:
3
1
作者
王晗
于蕊
+7 位作者
张晓鹏
任军
谢娜
樊红艳
张金龙
房婷
于长明
陈薇
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期60-64,共5页
目的构建人源抗破伤风毒素重链C端单链二硫键稳定抗体原核表达载体,并进行原核表达和生物学特性鉴定。方法采用PCR定点突变的方法,获得二硫键稳定的抗破伤风毒素重链C端(TeNT-Hc)单链抗体基因(27G-scdsFv)。连接pET22b(+)载体,转化大肠...
目的构建人源抗破伤风毒素重链C端单链二硫键稳定抗体原核表达载体,并进行原核表达和生物学特性鉴定。方法采用PCR定点突变的方法,获得二硫键稳定的抗破伤风毒素重链C端(TeNT-Hc)单链抗体基因(27G-scdsFv)。连接pET22b(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)工程菌,IPTG诱导表达,SDS-PAGE、Western blot法鉴定表达产物。ELISA检测27G-scdsFv体外抗原特异结合活性和抗体相对稳定性;非竞争酶免法检测抗体亲和力。采用免疫荧光法检测27G-scdsFv体外中和活性。结果测序结果显示获得正确的27G-scdsFv基因。原核表达scdsFv以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的50%。复性后的27G-scdsFv保持了与TeNT-Hc的特异结合活性,亲和力较其scFv形式略有提升,KD=0.93×10-7mol/L,1 L培养物可获得5 mg scdsFv蛋白。27G-scdsFv的稳定性较scFv形式明显增强。27G-scdsFv在体外可以明显抑制TeNT-Hc与神经元细胞的结合。结论成功构建人源抗破伤风毒素重链C端单链二硫键稳定抗体原核表达载体,并获得有活性的目的蛋白,为27G-scdsFv的进一步生物学功能研究奠定基础。
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关键词
单链二硫键稳定抗体
亲和力
原核表达
破伤风痉挛毒素
C端
下载PDF
职称材料
新生儿破伤风痉挛期43例护理
2
作者
陈小平
《中国乡村医药》
2009年第10期75-76,共2页
我院2001年1月至2008年12月共接收新生儿破伤风43例,均为采用土法接生所致。本病是由破伤风梭状杆菌侵入脐部产生破伤风痉挛毒素,导致肌肉痉挛,临床上以全身骨骼肌强直性痉挛和牙关紧闭为特征。此病发作越早,发作期越短,预后越差...
我院2001年1月至2008年12月共接收新生儿破伤风43例,均为采用土法接生所致。本病是由破伤风梭状杆菌侵入脐部产生破伤风痉挛毒素,导致肌肉痉挛,临床上以全身骨骼肌强直性痉挛和牙关紧闭为特征。此病发作越早,发作期越短,预后越差。控制破伤风的痉挛是治疗本病的关键所在,因此,痉挛期的护理尤为重要。
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关键词
新生儿
破伤风
痉挛
期
护理
破伤风痉挛毒素
强直性
痉挛
肌肉
痉挛
牙关紧闭
发作期
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职称材料
重症破伤风气管切开的整体护理
3
作者
刘洪杰
邵希芝
《工企医刊》
2003年第1期99-100,共2页
我院从1999年7月~2002年3月共收治破伤风16例,其中男9例,女7例,年龄26岁~78岁,平均年龄53.7岁.治疗过程中行气管切开的7例,均治愈出院.现将整体护理报告如下.
关键词
重症
破伤风
气管切开术
整体护理
破伤风痉挛毒素
呼吸护理
抗生素
心理护理
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职称材料
新生儿破伤风1例
4
作者
陈晓绒
《健康研究》
CAS
1999年第3期28-28,共1页
关键词
新生儿
破伤风
破伤风
杆菌
破伤风痉挛毒素
中枢神经系统
新生儿脐炎
氧化还原
县妇幼保健院
贫困山区
妇幼保健工作
脐带残端
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职称材料
以胸闷伴右上腹痛为突出表现的破伤风1例
5
作者
李电申
徐红梅
《邯郸医学高等专科学校学报》
1997年第3期72-72,共1页
1、病历介绍 男患,39岁,病历号63917。因阵发性胸闷伴右上腹痛2天入院。自诉2天前突然出现胸闷、右上腹痛、出汗,呈阵发性,约持续5—30分钟不等而自行缓解,曾在院外按心绞痛予以冠心苏合丸、速效救心丸等药治疗效果不佳。因发作频繁、...
1、病历介绍 男患,39岁,病历号63917。因阵发性胸闷伴右上腹痛2天入院。自诉2天前突然出现胸闷、右上腹痛、出汗,呈阵发性,约持续5—30分钟不等而自行缓解,曾在院外按心绞痛予以冠心苏合丸、速效救心丸等药治疗效果不佳。因发作频繁、病情加重来我院急诊。查体:急性痛苦病容,颈软。双肺呼吸音清晰。心率70次/分,心音低,右上腹肌紧张,压痛明显,莫非氏征阳性,无反跳痛。四肢肌张力正常。神经系统正常。同时检查胸片、心电图、B超肝胆均正常。按以绞痛、胆囊炎收住院。予以抗菌、扩冠、解痉治疗。经过2天治疗,病情加重,
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关键词
破伤风
抗
毒素
右上腹痛
突出表现
胸闷
阵发性
破伤风痉挛毒素
莫非氏征
心绞痛
速效救心丸
病情加重
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职称材料
炭肾清除血液中破伤风毒素效能的实验探讨
被引量:
4
6
作者
马昌义
彭克军
+1 位作者
杜一平
王树人
《中华肾脏病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第12期751-751,共1页
我们在临床上利用炭肾(廊坊爱尔)血液灌流对重型破伤风患者行血液净化,发现效果良好,提示炭肾可能清除了这些游离的痉挛毒素.但炭肾对破伤风的治疗作用是否确与痉挛毒素的清除有关,尚需确切的实验证据;且血液中痉挛毒素的检测也无现成...
我们在临床上利用炭肾(廊坊爱尔)血液灌流对重型破伤风患者行血液净化,发现效果良好,提示炭肾可能清除了这些游离的痉挛毒素.但炭肾对破伤风的治疗作用是否确与痉挛毒素的清除有关,尚需确切的实验证据;且血液中痉挛毒素的检测也无现成检查方法可依.因此,我们首先建立起血浆中破伤风痉挛毒素的检测方法,并对破伤风动物模型行炭肾血液净化,探讨炭肾对痉挛毒素的清除效能,为临床治疗重型破伤风提供一条新途径及其科学依据.
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关键词
破伤风
毒素
血液净化
炭肾
破伤风痉挛毒素
实验
重型
破伤风
临床治疗
血液灌流
治疗作用
动物模型
原文传递
安定、维生素B6、东莨菪碱佐治新生儿破伤风(附24例报告)
被引量:
1
7
作者
李继顺
《中国新生儿科杂志》
CAS
1989年第5期211-,210,共2页
新生儿破伤风是危及新生儿生命的严重疾病之一,病死率高。痉挛、窒息是本病早期死亡的主要原因。有效地控制惊厥、防止和抢救窒息及呼吸衰竭是降低病死率的关键。1988年8月至1989年3月我院用安定、维生素B<sub>6</sub>、东...
新生儿破伤风是危及新生儿生命的严重疾病之一,病死率高。痉挛、窒息是本病早期死亡的主要原因。有效地控制惊厥、防止和抢救窒息及呼吸衰竭是降低病死率的关键。1988年8月至1989年3月我院用安定、维生素B<sub>6</sub>、东莨菪硷联合治疗本病,取得了较好疗效,现报道如下。临床资料 1.一般资料:男16例,女8例,男女之比为2:1。入院日龄最小5天,最大16天,平均9.87天,潜伏期最短4天。最长13天,平均7.54天。24例全部来自农村。
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关键词
新生儿
破伤风
入院日龄
新生儿生命
呼吸衰竭
窒息发生率
脑组织缺氧
破伤风痉挛毒素
临床资料
止惊
硬肿症
原文传递
破伤风疫苗
8
作者
马丽莉
《中国计划免疫》
2007年第2期164-164,191,共2页
关键词
破伤风
疫苗
破伤风痉挛毒素
中枢神经系统
公共卫生问题
感染性疾病
破伤风
杆菌
发展中国家
厌氧环境
原文传递
题名
人源抗破伤风毒素单链二硫键稳定抗体的重组设计与表达
被引量:
3
1
作者
王晗
于蕊
张晓鹏
任军
谢娜
樊红艳
张金龙
房婷
于长明
陈薇
机构
军事医学科学院生物工程研究所疫苗与抗体工程研究室
解放军第
解放军第
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期60-64,共5页
基金
国家杰出青年科学基金(81025018)
国家自然科学基金青年基金(81102360
81172980)
文摘
目的构建人源抗破伤风毒素重链C端单链二硫键稳定抗体原核表达载体,并进行原核表达和生物学特性鉴定。方法采用PCR定点突变的方法,获得二硫键稳定的抗破伤风毒素重链C端(TeNT-Hc)单链抗体基因(27G-scdsFv)。连接pET22b(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)工程菌,IPTG诱导表达,SDS-PAGE、Western blot法鉴定表达产物。ELISA检测27G-scdsFv体外抗原特异结合活性和抗体相对稳定性;非竞争酶免法检测抗体亲和力。采用免疫荧光法检测27G-scdsFv体外中和活性。结果测序结果显示获得正确的27G-scdsFv基因。原核表达scdsFv以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的50%。复性后的27G-scdsFv保持了与TeNT-Hc的特异结合活性,亲和力较其scFv形式略有提升,KD=0.93×10-7mol/L,1 L培养物可获得5 mg scdsFv蛋白。27G-scdsFv的稳定性较scFv形式明显增强。27G-scdsFv在体外可以明显抑制TeNT-Hc与神经元细胞的结合。结论成功构建人源抗破伤风毒素重链C端单链二硫键稳定抗体原核表达载体,并获得有活性的目的蛋白,为27G-scdsFv的进一步生物学功能研究奠定基础。
关键词
单链二硫键稳定抗体
亲和力
原核表达
破伤风痉挛毒素
C端
Keywords
disulfide-stabilized single-chain Fv antibody
affinity
prokaryotic expression
tetanus toxin Hc fragment
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
R965.3 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
新生儿破伤风痉挛期43例护理
2
作者
陈小平
机构
浙江省绍兴县齐贤人民医院
出处
《中国乡村医药》
2009年第10期75-76,共2页
文摘
我院2001年1月至2008年12月共接收新生儿破伤风43例,均为采用土法接生所致。本病是由破伤风梭状杆菌侵入脐部产生破伤风痉挛毒素,导致肌肉痉挛,临床上以全身骨骼肌强直性痉挛和牙关紧闭为特征。此病发作越早,发作期越短,预后越差。控制破伤风的痉挛是治疗本病的关键所在,因此,痉挛期的护理尤为重要。
关键词
新生儿
破伤风
痉挛
期
护理
破伤风痉挛毒素
强直性
痉挛
肌肉
痉挛
牙关紧闭
发作期
分类号
R473.72 [医药卫生—护理学]
下载PDF
职称材料
题名
重症破伤风气管切开的整体护理
3
作者
刘洪杰
邵希芝
机构
山东省莱州市人民医院
出处
《工企医刊》
2003年第1期99-100,共2页
文摘
我院从1999年7月~2002年3月共收治破伤风16例,其中男9例,女7例,年龄26岁~78岁,平均年龄53.7岁.治疗过程中行气管切开的7例,均治愈出院.现将整体护理报告如下.
关键词
重症
破伤风
气管切开术
整体护理
破伤风痉挛毒素
呼吸护理
抗生素
心理护理
分类号
R473.6 [医药卫生—护理学]
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职称材料
题名
新生儿破伤风1例
4
作者
陈晓绒
机构
浙江省宁海县妇幼保健院
出处
《健康研究》
CAS
1999年第3期28-28,共1页
关键词
新生儿
破伤风
破伤风
杆菌
破伤风痉挛毒素
中枢神经系统
新生儿脐炎
氧化还原
县妇幼保健院
贫困山区
妇幼保健工作
脐带残端
分类号
R726.1 [医药卫生—儿科]
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职称材料
题名
以胸闷伴右上腹痛为突出表现的破伤风1例
5
作者
李电申
徐红梅
机构
鸡泽县医院
鸡泽县计生委技术站
出处
《邯郸医学高等专科学校学报》
1997年第3期72-72,共1页
文摘
1、病历介绍 男患,39岁,病历号63917。因阵发性胸闷伴右上腹痛2天入院。自诉2天前突然出现胸闷、右上腹痛、出汗,呈阵发性,约持续5—30分钟不等而自行缓解,曾在院外按心绞痛予以冠心苏合丸、速效救心丸等药治疗效果不佳。因发作频繁、病情加重来我院急诊。查体:急性痛苦病容,颈软。双肺呼吸音清晰。心率70次/分,心音低,右上腹肌紧张,压痛明显,莫非氏征阳性,无反跳痛。四肢肌张力正常。神经系统正常。同时检查胸片、心电图、B超肝胆均正常。按以绞痛、胆囊炎收住院。予以抗菌、扩冠、解痉治疗。经过2天治疗,病情加重,
关键词
破伤风
抗
毒素
右上腹痛
突出表现
胸闷
阵发性
破伤风痉挛毒素
莫非氏征
心绞痛
速效救心丸
病情加重
分类号
R [医药卫生]
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职称材料
题名
炭肾清除血液中破伤风毒素效能的实验探讨
被引量:
4
6
作者
马昌义
彭克军
杜一平
王树人
机构
四川省宜宾市第二人民医院外科
四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室
出处
《中华肾脏病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第12期751-751,共1页
文摘
我们在临床上利用炭肾(廊坊爱尔)血液灌流对重型破伤风患者行血液净化,发现效果良好,提示炭肾可能清除了这些游离的痉挛毒素.但炭肾对破伤风的治疗作用是否确与痉挛毒素的清除有关,尚需确切的实验证据;且血液中痉挛毒素的检测也无现成检查方法可依.因此,我们首先建立起血浆中破伤风痉挛毒素的检测方法,并对破伤风动物模型行炭肾血液净化,探讨炭肾对痉挛毒素的清除效能,为临床治疗重型破伤风提供一条新途径及其科学依据.
关键词
破伤风
毒素
血液净化
炭肾
破伤风痉挛毒素
实验
重型
破伤风
临床治疗
血液灌流
治疗作用
动物模型
分类号
R633.1 [医药卫生—外科学]
原文传递
题名
安定、维生素B6、东莨菪碱佐治新生儿破伤风(附24例报告)
被引量:
1
7
作者
李继顺
机构
山东金乡县人民医院
出处
《中国新生儿科杂志》
CAS
1989年第5期211-,210,共2页
文摘
新生儿破伤风是危及新生儿生命的严重疾病之一,病死率高。痉挛、窒息是本病早期死亡的主要原因。有效地控制惊厥、防止和抢救窒息及呼吸衰竭是降低病死率的关键。1988年8月至1989年3月我院用安定、维生素B<sub>6</sub>、东莨菪硷联合治疗本病,取得了较好疗效,现报道如下。临床资料 1.一般资料:男16例,女8例,男女之比为2:1。入院日龄最小5天,最大16天,平均9.87天,潜伏期最短4天。最长13天,平均7.54天。24例全部来自农村。
关键词
新生儿
破伤风
入院日龄
新生儿生命
呼吸衰竭
窒息发生率
脑组织缺氧
破伤风痉挛毒素
临床资料
止惊
硬肿症
分类号
R72 [医药卫生—儿科]
原文传递
题名
破伤风疫苗
8
作者
马丽莉
出处
《中国计划免疫》
2007年第2期164-164,191,共2页
关键词
破伤风
疫苗
破伤风痉挛毒素
中枢神经系统
公共卫生问题
感染性疾病
破伤风
杆菌
发展中国家
厌氧环境
分类号
R517.3 [医药卫生—内科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人源抗破伤风毒素单链二硫键稳定抗体的重组设计与表达
王晗
于蕊
张晓鹏
任军
谢娜
樊红艳
张金龙
房婷
于长明
陈薇
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
3
下载PDF
职称材料
2
新生儿破伤风痉挛期43例护理
陈小平
《中国乡村医药》
2009
0
下载PDF
职称材料
3
重症破伤风气管切开的整体护理
刘洪杰
邵希芝
《工企医刊》
2003
0
下载PDF
职称材料
4
新生儿破伤风1例
陈晓绒
《健康研究》
CAS
1999
0
下载PDF
职称材料
5
以胸闷伴右上腹痛为突出表现的破伤风1例
李电申
徐红梅
《邯郸医学高等专科学校学报》
1997
0
下载PDF
职称材料
6
炭肾清除血液中破伤风毒素效能的实验探讨
马昌义
彭克军
杜一平
王树人
《中华肾脏病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
4
原文传递
7
安定、维生素B6、东莨菪碱佐治新生儿破伤风(附24例报告)
李继顺
《中国新生儿科杂志》
CAS
1989
1
原文传递
8
破伤风疫苗
马丽莉
《中国计划免疫》
2007
0
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