b型流感嗜血杆菌-破伤风类毒素结合疫苗与国产DTPw疫苗婴儿同时接种后的反应观察

目的观察婴儿同时接种b型流感嗜血杆菌-破伤风类毒素(Hib-TT)结合疫苗与国产DTPw疫苗后的反应。方法按照开放、随机的原则,将472名11～17周龄的健康男女婴儿分为2组,即DTPw组(234名)和DTPw+Hib组(238名)。DTPw组接种0.5mlDTPw疫苗,DTPw+Hib组同时在不同部位接种0.5mlHib结合疫苗,2组分别于3、4、5月龄各接种1针。在免疫接种后4d内,观察2组接种对象所有症状(征集与非征集的)的发生情况,对接种当日和随后30d报告的非征集性不良反应进行记录,并进行统计学分析。结果在接种疫苗后4d内,DTPw+Hib组与DTPw组所有症状的发生率相似,分别为49.1%和46.0%;在31d内,2组中出现非征集症状的比例分别为9.9%和9.8%,其中上呼吸道感染和咽喉炎是最常见的非征集性症状;未报告严重不良反应。结论婴儿同时接种DTPw疫苗和Hib结合疫苗具有良好的安全性和耐受性。

14型肺炎球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗的研制

将14型肺炎球菌的荚膜多糖(PS)与破伤风类毒素(TT)通过化学方法结合,制备成多糖-蛋白结合疫苗(PS14-TT)。用该结合疫苗免疫小鼠,在小鼠体内产生了高滴度的PS-IgG抗体和TT-IgG抗体,且再次注射后有加强应答效应,表明制备的结合疫苗保留了完好的抗原性,具有胸腺依赖性抗原的特性。

福氏2a痢疾杆菌O-特异性多糖与破伤风类毒素结合疫苗的制备及其免疫学特性

通过己二酸二肼 (ADH)将福氏 2a痢疾杆菌脂多糖 (LPS)经酸水解脱毒纯化后得到的O SP和破伤风类毒素 (TT)蛋白共价结合 ,制备了福氏 2a痢疾杆菌结合物。以 2 5 μg多糖或含 2 5 μg多糖的结合物经皮下注射免疫NIH品系雌性小鼠 ,同时以 2 5 μg多糖或含 2 5 μg多糖的结合物经耳缘静脉注射家兔。用ELISA方法分别检测小鼠和家兔血清中抗脂多糖抗体水平及抗TT水平 ,并用豚鼠血清补体介导进行了体外杀菌实验。结果显示 :用本实验方法提取的多糖 ,合成的多糖衍生物 ,多糖 蛋白结合物都具有福氏 2a痢疾杆菌O 抗原特异性 ,其化学组成及结构特异性和国外文献报道基本一致。单独用多糖免疫小鼠和家兔未能诱导LPS抗体 ,而结合物免疫小鼠和家兔的血清诱导出了较高的抗LPSIgG抗体及抗TT抗体 ,并有较强的体外杀菌活性。产生的抗体存在着免疫记忆性 。

肺炎链球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗两种免疫途径对小鼠抗体应答的比较

目的比较肺炎链球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗两种免疫途径对小鼠的抗体应答。方法选NIH小鼠,分别经皮下和腹腔途径免疫3次同等剂量的结合疫苗,每次间隔2周,用ELISA方法检测两种途径免疫小鼠的血清抗体滴度。结果结合疫苗经腹腔免疫后的抗体滴度优于皮下免疫。小鼠经腹腔免疫3次后,血清抗体的几何平均滴度分别是第1次免疫的6·6倍和3·5倍。结论结合疫苗经腹腔免疫较皮下免疫获得的抗体应答水平高。

6B型肺炎球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗的制备及其免疫原性

目的 制备6B型肺炎球菌荚膜多糖(6B-PNCPS)-破伤风类毒素蛋白(TT)结合疫苗,并研究其免疫原性。方法6B-PNCPS用溴化氰活化后与己二酰肼形成多糖-酰肼基衍生物,然后在蛋白活化剂碳二亚胺作用下将6B-PNCPS与TT进行共价结合。分别将其结合物及多糖免疫NIH小鼠,用ELISA检测小鼠血清中抗6B-PNCPS抗体。结果6B-PNCPS-TT结合物经凝胶色谱分析显示具有较6B-PNCPS更大的相对分子质量,多糖/蛋白比为1.42-1.66。结合物具有6B-PNCPS的血清学特异性,所诱生的抗6B-PNCPS特异性IgG抗体滴度与6B-PNCPS差异有显著意义。结论 用该法制备6B-PNCPS-TT结合疫苗,具有良好的免疫原性。

甲型副伤寒多糖-破伤风类毒素结合疫苗的制备及安全性和免疫原性

目的 制备甲型副伤寒多糖-破伤风类毒素结合疫苗，并检测其安全性与免疫原性。方法 副甲O-SP溶液加入CDAP活化，己二酰肼（ADH）衍化，在碳二亚胺（EDAC）作用下与破伤风类毒素（TT）偶联，反应物经柱层析纯化，制得多糖蛋白结合物，经质量检测后，进行安全性及免疫原性试验。结果 所制备的结合物多糖蛋白比稳定在0．6～0．8之间，CL-4B检测Kd≤0．2时的回收率大于75％，高相对分子质量结合物含量不低于90％。免疫双扩散试验显示结合物与副甲家兔超免血清和TT抗血清均产生可见沉淀线。动物安全试验均合格。结合物免疫小鼠后，其血清副甲LPS抗体滴度显著增长。阳转率达到100％。结论 用CDAP活化多糖制备的甲型副伤寒-破伤风类毒素结合疫苗质量稳定，安全可靠，且具有良好的免疫原性。

四价脑膜炎球菌ACWY群破伤风类毒素结合疫苗单独或与13价肺炎球菌结合疫苗联合接种对学步儿童的免疫原性和安全性:Ⅲ期临床试验

作者在学步儿童中评估了1剂和2剂量的四价脑膜炎球菌血清组A、C、W、Y群破伤风类毒素结合疫苗(MenACWY-TT)单独或与13价肺炎球菌结合疫苗(PCV13)联合接种的免疫原性和安全性。

乙型肝炎表面抗原-破伤风类毒素结合疫苗的制备及免疫学特性

目的制备乙型肝炎（乙肝）表面抗原（HBsAg）与破伤风类毒素（TT）结合疫苗，并研究其免疫学特性。方法TT经溴化氢活化后与己二酰肼形成TT-酰肼基衍生物，在碳二亚胺作用下与HBsAg共价结合。将结合物、HBsAg及乙肝疫苗免疫小鼠，并设生理盐水对照组，分别于7、14、21、28d取血，应用化学发光法检测小鼠血清抗-HBs，于第7、28天应用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测脾单个核细胞（mononuclear cells，MNC）分泌HBsAg特异性IFN-γ和IL-2能力。结果成功制备了HBsAg—TT结合物，该结合物诱导抗-HBs阳转率及抗体滴度均较单独免疫HBsAg及乙肝疫苗组高，主要以IgG2a抗体为主，且分泌IFN-γ和IL-2的淋巴细胞数也显著增加。结论用该方法制备的HBsAg-TT结合疫苗，不仅可诱导较强的体液免疫，还可诱导以TH1应答为主的细胞免疫。

2型肺炎链球菌多糖-破伤风类毒素结合疫苗的制备及免疫原性研究

目的制备2型肺炎链球菌多糖（Streptococcus pneumoniae type2 polysaccharide，SPNPS2）-破伤风类毒素（tetanus toxoid，TF）结合疫苗（SPNPS2-TY），并研究其免疫原性。方法采用溴化氰活化SPNPS2，已二酰肼作连接剂，碳二亚胺为耦联剂，将活化的SPNPS2与TT耦联制成SPNPS2-TT.以SPNPS2-TT或单纯SPNPS2免疫Balb／c小鼠，用ELISA检测小鼠血清抗SPNPS2 IgG水平.结果SPNPS2-TT的各项指标均达到质控标准。SPNPS2-TT免疫小鼠产生的特异性抗SPNPS2 IgG水平显著高于单纯SPNPS2免疫小鼠，且SPNPS2-TT诱生了免疫记忆应答。结论采用此项技术制备SPNPS2-TT疫苗是可行的。

14型肺炎球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗研究

目的 探讨制备肺炎球菌荚膜多糖 (PNCPS) 蛋白结合疫苗的适宜条件。方法 采用碳二亚胺法将 14型PNCPS与破伤风类毒素 (TT)结合 ,将结合物免疫NIH小鼠 ,用ELISA法检测小鼠血清中抗 14型PNCPS的IgG抗体滴度。结果 结合反应产率和结合物中多糖、蛋白含量的测定显示试验成功合成了 14型PNCPS TT结合物 ,该结合物具有 14型PNCPS的血清学特异性 ,将之免疫小鼠诱生的抗 14型PNCPS特异性IgG抗体水平显著高于单纯 14型PNCPS。结论 试验成功地合成了 14型PNCPS TT结合物 。

铜绿假单胞菌3型O-特异性多糖-破伤风类毒素结合疫苗的制备及其免疫特性分析

目的研制铜绿假单胞菌3型O-特异性多糖(O-specific polysaccharide,O-SP)-破伤风类毒素(Tetanus toxoid,TT)结合疫苗,并分析其免疫特性。方法采用热酚水法提取铜绿假单胞菌国际抗原分型系统(International Antigen Typing System,IATS)3型菌株的脂多糖(Lipopolysacchride,LPS),去除类脂A后纯化O-SP,用1-氰基-4-二甲胺基吡啶四氟硼酸盐(CDAP)活化O-SP,己二酸二肼(ADH)作为连接臂,在碳二亚胺(EDAC)作用下,与TT结合制备O-SP-TT结合疫苗,检测其理化性质,并分析结合疫苗的免疫原性和免疫保护性。结果 O-SP收获量相当于水解LPS量的30%,其蛋白质和核酸含量均低于1.0%,O-SP衍化度为3.83%,O-SP与TT的结合率约为40%,多糖蛋白质比(w/w)为1∶2.18。O-SP-TT结合疫苗可刺激小鼠产生高效价的IgG抗体,与O-SP组相比,差异有统计学意义(P<0.05);结合疫苗免疫小鼠能保护5 LD50和10 LD50活菌的攻击,小鼠免疫O-SP-TT后兔抗血清对3 LD50和5 LD50活菌攻击具有良好的保护作用。结论制备的铜绿假单胞菌3型O-SP-TT结合疫苗具有良好的免疫原性和免疫保护性,该疫苗有望成为防治IATS 3型铜绿假单胞菌感染的有效疫苗。

CDAP活化多糖制备5型肺炎链球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗

目的用1-氰基-4-二甲氨基-吡啶四氟硼酸(CDAP)代替溴化氰(CNBr)活化5型肺炎链球菌荚膜多糖,制备5型肺炎链球菌荚膜多糖-破伤风类毒素(TT)结合疫苗。方法将5型肺炎链球菌荚膜多糖溶液加CDAP活化,经ADH和缩合剂EDAC与破伤风类毒素进行偶联,经凝胶过滤柱层析纯化,得到5型肺炎链球菌多糖-TT结合物,并对其生化指标、血清学特异性、安全性及免疫原性进行检测。结果多糖-TT结合物的游离多糖含量与多糖的衍化率成反比;血清学特异性良好;经动物实验证明其安全性合格;具有良好的免疫原性,且游离多糖含量越低,免疫原性越强。结论用CDAP活化工艺制备的5型肺炎链球菌荚膜多糖-TT结合物适宜制备疫苗。

A群脑膜炎球菌多糖-破伤风类毒素结合物中游离多糖测定方法的建立

本文建立一种测定A群脑膜炎球菌多糖 破伤风类毒素 (PS TT)结合物中游离多糖的方法。用 80 %乙醇使PS TT结合物沉淀 ,再用 6 0 %乙醇洗涤沉淀使未结合多糖溶解 ,使与TT结合的和未结合的多糖分离并分别测定。该方法可有效分离结合的与未结合的多糖并分别测定 ,结合物中外加多糖可定量回收。本方法适用于测定A群脑膜炎球菌多糖

破伤风类毒素减量的DTaP与Hib结合苗的联合疫苗免疫婴儿后的Hib抗体应答

虽然联合疫苗有助于提高儿童对疫苗吸收率,但研究证明一些疫苗成分的免疫原性改变了。作者研究了改变DTaP和Hib联合疫苗中破伤风类毒素(TT)的量,是否会导致与分开而同时给药相似的免疫原性。

破伤风类毒素的发展历史、现状和新型破伤风疫苗的研究进展

简要回顾了破伤风类毒素主要的发展历程；概述了目前国内外精制破伤风类毒素的两种生产工艺各自的优缺点，并且肯定了吸附精制破伤风类毒素几十年实际应用的效果，同时指出了在大规模人群接种时可能出现为数不多的各种不良反应，以及引起不良反应的可能的原因。对国内外破伤风疫苗研究进展和主要发展方向，如亚单位疫苗和新型破伤风类毒素的研究概况和前景也作了介绍。

破伤风类毒素CD4^+ T细胞表位P2增强重组轮状病毒ΔVP8*亚单位疫苗的免疫原性

目前市面上的口服活轮状病毒疫苗Rotarix 和RotaTeq 疫苗，在发达国家非常有效。然而，此类疫苗的免疫原性和疗效在一些发展中国家较低。我们以前报道，在肌注免疫动物中细菌表达轮状病毒ΔVP8＊亚单位疫苗候选物，具P［8］、P［4］或P［6］，能特异性引发高滴度的病毒中和抗体。值得注意的是，发现P［8］ΔVP8＊疫苗诱导产生的抗体既中和同型P［8］又中和异型P［4］轮状病毒毒株。