破骨细胞抑制凝集素相关蛋白2对小鼠内毒素血症的保护作用

目的：研究重组破骨细胞抑制凝集素相关蛋白2胞外段蛋白（OCILRP2-Fc）阻断OCILRP2受体信号对LPS诱导的内毒素血症的影响，探讨OCILRP2受体在机体炎症反应中的作用。方法荧光定量RT-PCR检测LPS刺激前后OCILRP2在RAW264．7细胞的表达；小鼠腹腔注射20mg/kg体重的LPS诱导内毒素血症的发生，分析OCILRP2-Fc对内毒素血症小鼠存活率的影响；称量小鼠脾脏重量分析脾脏充血肿大情况；HE染色观察肺脏、肝脏组织病理损伤情况；ELISA检测小鼠血清中炎症性细胞因子的水平；Westernblot检测LPS刺激前后巨噬细胞中NF-κB的活化。结果荧光定量RT-PCR结果表明LPS刺激显著提高了OCILRP2在小鼠巨噬细胞的表达（P＜0．05）；与对照组相比，OCILRP2-Fc可以显著提高内毒素血症小鼠的存活率；减轻小鼠脾脏肿大程度和内毒素血症对肺脏和肝脏组织造成的病理损伤；降低血清中细胞因子IL-6、IL-12、TNF-α和IFN-γ的浓度（P＜0．05）。Westernblot结果表明OCILRP2-Fc抑制LPS诱导的RAW264．7细胞内IκB的降解和NF-κBp65的磷酸化。结论采用OCILRP2-Fc阻断OCILRP2受体信号，减轻了小鼠内毒素血症对机体造成的炎症性损伤，提示OCILRP2在LPS诱导的炎症反应发生过程中具有促进作用。

OCILRP2-Fc抑制小鼠骨髓来源的树突状细胞分化成熟

目的:采用OCILRP2胞外段蛋白OCILRP2-Fc阻断OCILRP2受体,探讨OCILRP2对小鼠树突状细胞发育成熟的影响及其机制。方法:分离培养小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC),荧光定量RT-PCR和流式细胞术分析OCILRP2在不成熟BMDC和LPS诱导的成熟BMDC的表达差异;流式细胞术分析OCILRP2-Fc对BMDC细胞表面标志分子的表达以及对BMDC抗原摄取能力的影响;ELISA检测培养上清中细胞因子的浓度,分析OCILRP2-Fc对BMDC分泌炎性细胞因子的影响;Western blot检测转录因子NF-κB的活化,分析OCILRP2-Fc影响BMDC分化成熟的分子机制。结果:荧光定量RT-PCR和流式细胞术结果均表明LPS可以显著上调OCILRP2在BMDC的表达(P<0.05);与对照组相比,OCILRP2-Fc可以明显抑制MHCⅡ类分子及共刺激分子CD80在LPS诱导的成熟BMDC的表达;和成熟BMDC相比,OCILRP2-Fc组BMDC经LPS诱导24 h后仍然具有较强的抗原吞噬能力;而且,OCILRP2-Fc组BMDC培养上清中炎性细胞因子IL-6、IL-12、TNF-α的浓度明显低于对照组(P<0.05)。Western blot结果表明OCILRP2-Fc抑制了LPS诱导的I-κB降解和NF-κB p65的磷酸化。结论:OCILRP2-Fc阻断OCILRP2受体信号,通过抑制LPS诱导的NF-κB活化影响小鼠BMDC分化成熟。提示OCILRP2受体在树突状细胞的分化成熟过程中具有促进作用。

老年高血压患者血清sST 2、Hcy、Gal-3水平与射血分数保留性心力衰竭发生的相关性

目的探讨老年高血压患者血清可溶性肿瘤发生抑制蛋白2(sST2)、同型半胱氨酸(Hcy)、半乳糖凝集素3(Gal-3)水平与射血分数保留性心力衰竭(EFpHF)发生的相关性,以期为临床早期诊断、制定治疗方案提供依据。方法选取2020年5月至2022年10月南阳市第一人民医院收治的83例老年高血压患者为研究对象,其中单纯高血压患者51例(对照组),高血压合并EFpHF患者32例(研究组)。比较两组入院时血清sST2、Hcy、Gal-3水平,比较两组入院时超声心动图指标[左心房内径(LAD)、右心房内径(RAD)、二尖瓣口舒张早期最大血流速度E峰与舒张晚期最大血流速度A峰的比值(E/A)、左心室质量指数(LVMI)],分析入院时血清sST2、Hcy、Gal-3水平与超声心动图指标及EFpHF发生的相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sST2、Hcy、Gal-3水平联合检测对老年高血压患者发生EFpHF的诊断价值。结果与对照组相比,入院时研究组血清sST2、Hcy、Gal-3水平较高(P<0.05);入院时与对照组相比,研究组LAD、RAD、LVMI指标明显升高,E/A指标明显降低(P<0.05);入院时血清sST2、Hcy、Gal-3水平与LAD、RAD、LVMI、EFpHF呈正相关,与E/A呈负相关(P<0.05);入院时血清sST2、Hcy、Gal-3水平联合检测诊断高血压患者发生EFpHF的曲线下面积(AUC)为0.841,大于各单一指标,最佳诊断敏感度为87.50%,特异度为80.39%。结论血清sST2、Hcy、Gal-3水平变化与老年高血压患者并发EFpHF密切相关,为临床早期诊断提供参考依据,以尽早制定相应干预方案,改善预后。

前列腺素E2调节大鼠成骨细胞OCIL基因表达的信号通路研究

探讨前列腺素E2（PGE2）对大鼠成骨细胞破骨细胞抑制性凝集素（osteoclast inhibitory lectin OCIL）mRNA表达的调节及其信号转导机制。培养大鼠原代成骨细胞和UMR106成骨细胞样细胞，采用不同浓度的PGE2和不同的信号通路调节剂干预细胞后，提取细胞总RNA，采用实时荧光定量PCR检测OCIL mRNA的表达水平。PGE2、蛋白激酶A（PKA）激动剂福司可林、db—cAMP和钙离子载体A23187均促进OCIL mRNA表达，OCIL mRNA最大上调幅度分别为对照组的2．38倍、4．2倍、4．5倍和5．1倍（均P〈0．01）。蛋白激酶c（PKC）激动剂PMA下调OCIL mRNA表达约50％（P〈0．01）。PKA抑制剂KT-5720、钙通道阻断剂维拉帕米、钙调蛋白抑制剂W7和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）阻断剂PD98059分别下调PGE，诱导的OCIL mRNA表达约56％、40％、65％和60％（均P〈0．01）。PKC抑制剂白屈菜红碱促进PGE2诱导的OCIL mRNA表达约30％（P〈0．05）。PKA、MAPK和Ca^2＋／钙调蛋白信号通路介导了PGE2诱导的大鼠成骨细胞OCIL基因表达。

血清Omentin-1、SF、ODF及OCIF在骨质疏松性椎体骨折中的表达及与骨密度的相关性分析

目的探讨血清网膜素-1(Omentin-1)、铁蛋白(SF)、破骨细胞分化因子(ODF)及破骨细胞生成抑制因子(OCIF)在骨质疏松性椎体骨折中的表达及与骨密度的相关性。方法选择2017年3月至2018年3月该院接诊的130例骨质疏松性椎体骨折患者作为观察组,并选择同期体检健康者100例作为对照组,分析血清Omentin-1、SF、ODF、OCIF、腰椎正位骨密度、股骨颈骨密度的表达及其相关性。结果观察组患者血清Omentin-1水平低于对照组,SF、ODF、OCIF水平高于对照组(P<0.05)。观察组患者血清腰椎正位骨密度、股骨颈骨密度水平低于对照组(P<0.05)。低骨量患者Omentin-1水平高于骨质疏松、严重骨质疏松患者,SF、ODF、OCIF水平低于骨质疏松、严重骨质疏松患者(P<0.05)。相关性分析结果中显示,血清Omentin-1与腰椎正位骨密度、股骨颈骨密度均呈正相关(r=0.920、0.883,P<0.05),血清SF、ODF、OCIF与腰椎正位骨密度(r=-0.904、-0.768、-0.725,P<0.05)、股骨颈骨密度均呈负相关(r=-0.872、-0.740、-0.695,P<0.05)。结论在骨质疏松性椎体骨折患者中血清Omentin-1、SF、ODF、OCIF的表达和骨密度密切相关。

维生素D调控OC形成的差异蛋白表达及生物信息学分析

旨在研究维生素D对破骨细胞(osteoclast,OC)形成中蛋白表达的影响。本试验利用差异蛋白组学检测1α,25-(OH)2D3处理后蛋白表达的变化,并对差异表达蛋白进行生物信息学分析。结果表明,质谱鉴定获得23个差异表达蛋白点,除去蛋白亚型,实际为19种蛋白。主要涉及氧化还原、结合与能量代谢等分子功能,参与细胞凋亡、蛋白折叠调控等生物学过程。其中,巨噬细胞游走抑制因子(MIF)、半乳糖凝集素-3(Gal-3)、膜联蛋白A2(Anxa2)、原肌球蛋白α-3链亚型X6(Tpm3)及SH3域结合谷氨酸富含样蛋白3(Sh3bgrl3)与OC形成密切相关。本试验为动物钙磷代谢紊乱性疾病研究奠定了基础。