基于砷和汞离子标记SiO_2@Au纳米探针的超敏多元免疫分析方法研究

构建了一种基于As^3＋和Hg^2＋标记SiO2@Au复合纳米探针（NPs）,以及氢化物发生-原子荧光（HGAFS）同时检测癌胚抗原（CEA）和糖蛋白19-9（CA19-9）的超灵敏多元免疫分析方法。采用氨基化SiO2（核）@AuNPs（壳）分别吸附As^3＋和Hg^2＋,并标记CEA和CA19-9的第二抗体（Ab2）,由此获得了富As（或Hg）型信号探针（As（Hg）-SiO2@Au-Ab2）。基于夹心免疫分析方法,将两种信号探针和对应的抗原以及96孔板上一抗,在板底形成两种免疫复合物（Ab1/Ag/As（Hg）-SiO2@Au-Ab2）,利用HG-AFS同时检测As^3＋和Hg^2＋,其与CEA和CA19-9的含量对数值成正比,可用于定量分析。此类探针不仅具有良好的分散性、还具有出色的信号放大效果。优化了探针合成和最佳反应条件,并对探针制备过程进行了表征。本方法与CEA和CA19-9分别在0.001-100μg/L和0.01-80 U/mL范围内呈线性关系,检出限分别为0.5 ng/L和0.005 U/mL（3σ）,低于标准ELISA方法3个数量级。用于血清样品中CEA和CA19-9同时检测,并与标准ELISA方法对照,结果一致。此免疫分析方法灵敏、简便、一次可实现多个肿瘤标志物检测,适合于基层卫生部门进行恶性肿瘤早期筛查。