基于响应曲面法优化硒化猴头菇多糖纳米微粒的制备工艺及其对脾淋巴细胞的影响

本试验旨在利用响应曲面法优化硒化猴头菇多糖纳米微粒的制备工艺条件,研究其对脾淋巴细胞免疫活性的影响。在单因素试验的基础上,采用响应曲面法研究有机相(O)和内水相(W1)之比、外水相(W2)和初乳(PE)之比以及PLGA浓度对硒化猴头菇多糖纳米微粒包封率的影响,并通过透射电镜以及粒径与Zeta电位的表征,检测模拟最优工艺条件制备硒化猴头菇多糖纳米微粒,并通过鸡脾淋巴细胞增殖和细胞因子IFN-γ、IL-4分泌量的检测,探究其免疫效果。结果显示,硒化猴头菇多糖纳米微粒的最佳制备工艺:有机相和内水相之比为4.66,外水相与初乳之比为7.23,PLGA浓度为21.19 mg/mL,在此条件下硒化猴头菇多糖纳米微粒包封率的实测值为(90.21±0.01)%,接近于预测值91.48%。纳米微粒的粒径小,表面光滑,粒子间有明显的界限,无黏连现象。硒化猴头菇多糖纳米微粒浓度为0.49μg/mL时,与硒化猴头菇多糖相比,更能促进鸡脾淋巴细胞增殖(P<0.05)。浓度为0.25μg/mL~0.98μg/mL时,与硒化猴头菇多糖相比,硒化猴头菇多糖纳米微粒更能促进鸡脾淋巴细胞分泌IFN-γ(P<0.05)。结果表明,采用响应曲面法优化硒化猴头菇多糖纳米微粒制备条件是合理可行的,且硒化猴头菇多糖纳米微粒具有免疫增强活性。