硒化羧甲基壳聚糖的合成及表征

以亚硒酸钠和羧甲基壳聚糖为原料,合成了硒化羰甲基壳聚糖,产率为44.78%,硒含量为20.50 mg/g。利用紫外-可见光谱、红外光谱两种表征手段,证实了硒化羧甲基壳聚糖的合成。为研究低毒性、有效的有机补硒产品奠定了基础。

甲基化硒酸对人前列腺癌DU145细胞增殖与凋亡的影响

目的:观察甲基化硒酸(MSA)对DU145前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用MTT比色法观察1.25、2.50和5.00μmol·L-1MSA对DU145细胞增殖活力的抑制作用;吖啶橙染色观察MSA诱导细胞凋亡情况;流式细胞术分析细胞周期及凋亡,并计算细胞平均凋亡指数;免疫细胞化学技术观察细胞内激活的caspase-3的表达情况。结果:经1.25、2.50和5.00μmol·L-1MSA处理48h后,DU145细胞生长抑制率分别为16.35%、38.10%和73.54%,3组间比较差异有显著性(P<0.01),随MSA浓度升高细胞生长抑制率增加,呈明显的剂量依赖性。吖啶橙荧光染色可见,经1.25、2.50和5.00μmol·L-1MSA处理后的细胞呈明显凋亡形态,并随药物剂量增加凋亡细胞数增多;流式细胞术结果显示,经1.25、2.50和5.00μmol·L-1MSA处理48h后,细胞凋亡率分别为5.34%、8.71%和13.60%,3组间比较差异有显著性(P<0.05),随MSA浓度升高细胞凋亡率升高,呈剂量依赖关系;免疫细胞化学染色结果显示,随着MSA剂量增加,细胞内激活的caspase-3表达上调。结论:MSA对DU145细胞具有明显的抗肿瘤作用,其机制可能与激活的caspase途径诱导细胞凋亡有关。

硒化羧甲基壳聚糖的抗氧化作用研究

采用邻二氮菲-Fe2+氧化法、邻苯三酚自氧化法以及总抗氧化能力试剂盒测定硒化羧甲基壳聚糖的抗氧化能力。结果表明,在实验设置的浓度范围内,硒化羧甲基壳聚糖的抗氧化能力随着浓度的增加而增加,且硒化羧甲基壳聚糖的抗氧化能力高于羧甲基壳聚糖。1 mg/mL的硒化羧甲基壳聚糖对羟自由基的清除率为42.68%,对超氧阴离子自由基的清除率为31.16%,总抗氧化能力为0.863单位/mL。为研究低毒性、有效的有机补硒产品提供了思路。

硒化壳寡糖和硒化羧甲基壳聚糖中硒含量的测定

分别以亚硒酸钠与壳寡糖、羧甲基壳聚糖为原料,合成硒化壳寡糖和硒化羧甲基壳聚糖。分别用邻苯二胺分光光度法和二氨基联苯胺分光光度法测定其中的硒含量,两种方法测定的结果较为一致,测得硒化壳寡糖中硒含量分别为9.02 mg/g、8.82 mg/g,测得硒化羧甲基壳聚糖中硒含量分别为20.50 mg/g、20.24 mg/g。

高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱法测定食品中多形态硒含量

研究基于高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱建立了一种适用于富硒蛋白粉、富硒大米、富硒香菇和富硒酵母等富硒食品中硒酸根、硒代胱氨酸、甲基硒代半胱氨酸、硒代蛋氨酸的检测方法。样品经Tris缓冲液提取,蛋白酶和胰蛋白酶酶解,以V(20 mmol/L磷酸氢二胺水溶液,pH=6.0)∶V(甲醇)=98∶2为流动相,经Hamilton PRP-X100阴离子交换色谱柱分离测定。结果表明,4种硒形态化合物在5~100μg/kg范围内线性良好(R2>0.999),方法检出限可达25~50μg/kg,平均加标回收率为81.37%~93.80%,且RSD为2.80%~7.22%。应用此方法对4种市售富硒食品(富硒蛋白粉、富硒大米、富硒香菇和富硒酵母)中4种硒形态化合物进行检测,前处理步骤简单,测定快速、准确度和灵敏度高,为食品中硒形态评价和质量控制提供了方法和依据。

硒是双刃剑?——谈微生物中的硒代谢

硒位于元素周期表第Ⅵ主族,是一种生命必需的微量元素,是第21位氨基酸硒代半胱氨酸、硒代甲硫氨酸和含硒酶的必需组分。硒在人体免疫系统、抗癌、抗氧化等方面发挥重要作用,缺硒会导致40种以上的疾病。硒以Se(-Ⅱ)、Se(0)、Se(+Ⅳ)和Se(+Ⅵ)4种价态存在,所有价态间的转化都有微生物的参与。本文主要综述最近几年国内外微生物代谢硒的研究进展,包括硒对生命体的重要作用与机制,硒的化学性质与生物地球化学循环,硒的氧化、还原和甲基化等多样的代谢硒的微生物类群,微生物代谢硒的分子机制;并探讨了微生物代谢硒在未来的关注点和实际应用。阐明微生物代谢硒在生物地球化学循环、生物多样性、植物富硒、人类健康和环境污染治理等方面都发挥着重要作用。

外源硫输入对稻田土壤硒流失的影响

土壤中硒的甲基化可能会导致硒的挥发,加剧土壤硒的流失,而农田土壤硒的缺乏会造成农作物中硒含量偏低。施用硫肥是保障作物增产、增收的一种重要农艺措施,外源硫输入对土壤硒的含量可能产生重要的调控作用。本研究模拟稻田淹水环境,通过添加典型有机硫(甲硫氨酸)和无机硫(硫酸钠),测定硒的挥发量以及土壤中残留的硒含量,以揭示外源硫输入对土壤硒流失的影响机制。结果显示,外源性有机硫和无机硫的输入均会促进土壤中硒的流失。其中,甲硫氨酸的输入会导致土壤总硒含量下降了15.9%-35.7%,这可能是由于甲硫氨酸向土壤提供甲基供体并促进硒的甲基化(土壤硒挥发量增加88.4%-308%);而添加硫酸盐可能会促进土壤亚硒酸盐的溶出,进而导致土壤总硒含量下降了4.67%−25.5%。以上结果表明农田土壤播撒硫肥所引起的“硒流失”应予以重视。

有机硒通过下调AR及PSA抑制激素非依赖性前列腺癌细胞生长

目的:探讨甲基化硒酸(MSA)对人前列腺癌LNCaP细胞生长的抑制作用和甲基硒代半胱氨酸(MSC)延缓裸鼠去势后激素非依赖性前列腺癌的效应及相关机制。方法:将体外培养的LNCaP细胞与不同浓度的MSA共培养,磺酰罗丹明B(SRB)法检测MSA对细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,半定量RT-PCR及Western blot法检测雄激素受体(AR)及前列腺特异性抗原(PSA)的表达,免疫荧光和细胞化学染色法检测信号转导及转录激活因子3(STAT3)的表达。用BALB/c-nu/nu雄性裸鼠构建LNCaP细胞源性前列腺癌皮下移植瘤模型,待移植瘤直径达5 mm时,动物手术去势。将动物分为对照(mock)组(给予生理盐水200μL)和MSC组(给予5μg/gMSC),灌胃治疗,连续给药16周,监测肿瘤生长情况,ELISA法检测PSA的分泌规律,RT-PCR及Western blot检测肿瘤组织AR、PSA和STAT3的表达,TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果:与mock组比较,MSA呈时间及剂量依赖性抑制LNCaP细胞生长,其抑制率可达65.32%±12.11%。MSA促进癌细胞凋亡,最大凋亡率为52.80%±2.87%,同时下调AR、PSA及STAT3的表达(P<0.05)。去势后MSC组的肿瘤复发时间延后,肿瘤生长速度减慢,同时下调前列腺癌移植瘤AR、PSA及STAT3表达(P<0.05)。结论:MSA呈时间及剂量依赖性抑制人前列腺癌LNCaP细胞生长,MSC延缓激素非依赖性前列腺癌发生,其机制与下调AR、PSA及STAT3表达有关。

Mechanism of exogenous selenium alleviates cadmium induced toxicity in Bechmeria nivea(L.) Gaud(Ramie)

The protective role of exogenously supplied selenium （Se^6＋） on Bechmeria nivea （L.） Gaud （Ramie） subjected to cadmium （Cd） stress was studied in vitro, and the mechanism was discussed by investigating plant growth, malondialdehyde （MDA）, activity of antioxidative enzymes and DNA methylation pattern. Plants grown in hydroponic culture were supplied with spraying Se （selenate, 1.2μmol/L） and cadmium （Cd（NO3）2, 0, 3, 6 and 9 mg/L）, individually or simultaneously. At low Se spraying levels, SOD activity was increased by 35.34%, 43.18%, 3.63%under 3, 6 or 9 mg/L cadmium contents, POD was increased by 12.45%, 14.14%, 3.27%, and the level of DNA methylation was decreased by 10.70%, 18.18%and 15.59%, respectively. The results confirmed that spraying low Se on ramie leaves could enhance the activity of SOD and POD, and regulate DNA methylation in ramie leaves.