石榴皮多糖硒酸酯制备工艺参数优化及其结构分析

以石榴皮多糖与亚硒酸钠为原料制备石榴皮多糖硒酸酯,以产物硒含量和收率为指标,原料配比、硝酸体积分数、反应温度和反应时间为单因素,通过单因素试验和Box-Behnken试验设计方法对工艺条件进行优化,并对产物结构进行分析。结果显示:石榴皮多糖硒酸酯最佳制备工艺条件为原料配比1:1.0(g/g)、硝酸体积分数0.61%、反应温度77.0℃、反应时间11.3 h,在该工艺条件下,制得石榴皮多糖硒酸酯中硒含量为4.48 mg/g,产物收率为41.87%;紫外光谱、红外光谱和热重分析充分证实石榴皮多糖硒酸酯中含有Se=O键、Se—O键和Se—C键。优化后的石榴皮多糖硒酸酯制备工艺条件实现了石榴皮多糖的硒化,为石榴皮资源的充分开发利用提供良好条件。

兰州百合多糖硒酸酯的合成及表征

用水提取兰州百合块茎粗多糖,经酶和savage联用法脱蛋白质,得兰州百合多糖(LP)。在HNO3-OBaCl2催化作用下,利用亚硒酸钠水解产生的HO SeOH对兰州百合多糖的—OH进行修饰,首次合成了兰州百合多糖硒酸酯(seleno-LP)。通过正交实验得出最佳反应条件是硝酸体积浓度0.5%,70℃反应10h,ICP测得此时硒含量为0.784mg/g,并通过紫外、拉曼光谱和热分析分别对合成产物进行表征,最后得出硒在合成产物中是以Se O的形式存在。

硒酸酯多糖Ⅱ期临床结果

目的：确定硒酸酯多糖（κ硒卡拉胶）临床应用价值。方法：采用多中心随机分组双盲临床试验，观察恢复期和化、放疗患者口服硒酸酯多糖（治疗组）与安慰剂（对照组）对免疫功能的影响。结果：在恢复期患者，治疗组Ｔ４细胞从疗前（３３．６９±９．８６）％升至（３９．７８±９．６６）％（Ｐ＜０．０５），Ｔ４／Ｔ８比值从１．１９±０．３７升至１．３９±０．３７（Ｐ＜０．０１）；而对照组Ｔ４、Ｔ８及Ｔ４／Ｔ８比值均无显著变化（Ｐ＞０．０５）。治疗组患者ＰＰＤ试验反应增强者为５１．０％，对照组仅为２３．１％（Ｐ＜０．０５）。在化、放疗患者，治疗组Ｔ４细胞从（３３．８１±７．３０）％升至（３５．４２±７．６６）％（Ｐ＜０．０５），Ｔ４／Ｔ８从１．２２±０．３２升至１．３６±０．３８（Ｐ＜０．０１），Ｔ８细胞则从（２９．０３±８．９０）％降至（２７．４７±７．６２）％（Ｐ＜０．０１）；对照组Ｔ４／Ｔ８比值从１．２５±０．５５降至１．１５±０．３６（Ｐ＜０．０５）。治疗组与对照组ＰＰＤ试验反应增强者分别为３５．６％与１５．７％（Ｐ＜０．００１）。另外，治疗组患者巨噬细胞吞噬率、血清ＩｇＧ、ＩｇＡ均明显上升，而对照组则明显下降。两组患者Ｎ?

硒酸酯多糖诱导白血病多药耐药细胞凋亡的作用机制

目的:观察硒酸酯多糖(Kappaselenocarrageenan,KSC)对K562ADM耐药细胞的诱导凋亡效应,并探讨其作用机制。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法、WrightGiemsa染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术(Flowcytometry,FCM)观察K562ADM细胞凋亡;FCM测定K562ADM细胞Fas、P53和Bcl2蛋白表达水平;RTPCR检测Caspase3mRNA的表达。结果:50～500mg·L-1KSC抑制K562ADM细胞增殖,并诱导K562ADM细胞凋亡,细胞出现呈典型凋亡形态改变,DNA电泳可见DNA梯状条带(DNAladder);FCM分析出现亚G1期细胞群,S期细胞比例增高。Fas蛋白表达上调,Bcl2蛋白表达下调,Caspase3mRNA表达显著增强,但P53蛋白表达无明显改变。结论:KSC通过Fas依赖性Caspase3激活途径诱导K562ADM细胞凋亡。

硒酸酯多糖辅助癌症化疗的临床观察

对64例Ⅱ－Ⅳ癌症患者，采用随机对照分组（化疗＋硒组，单化组），观察硒酸酯多糖在化疗期间的辅助效应。结果：化疗加硒组，骨髓毒性低于单纯化疗组，化疗期间感染率低于单化组，但无统计学意义，免疫球蛋白、食欲均优于单化组（P＜0．01，P＜0．05）有统计学意义，说明硒酸酯多糖在化疗中对机体正常组织有保护作用。

硒酸酯多糖对癌症患者血清MDA含量及CuZn-SOD活性的影响

目的：了解硒酸酯多糖对肿瘤患者体内ＭＤＡ及ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活性的影响。方法：对６０例肿瘤病人随机分成３组：不服硒组，服硒４００μｇ／ｄ组及服８００μｇ／ｄ组并与１５名正常人对照比较。结果：癌症患者血清ＭＤＡ明显高于正常人（Ｐ＜０．０１），血清Ｓｅ及ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活性明显低于正常人（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）；服硒酸酯多糖者化疗后血清Ｓｅ较不服者明显升高（Ｐ＜０．０５），ＣｕＺｎ－ＳＯＤ也明显升高（Ｐ＜０．０１），ＭＤＡ含量显著下降（Ｐ＜０．０５）；服４００μｇ／ｄ组与服８００μｇ／ｄ组之间上述各指标均无明显差异。结论：肿瘤病人摄入适量（４００μｇ／ｄ）硒酸酯多糖可能增加体内ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活性，减轻了化疗药物对正常细胞的过氧化损伤。

硒酸酯多糖诱导人骨肉瘤细胞凋亡作用的有效成分

目的 探讨硒酸酯多糖诱导骨肉瘤细胞凋亡作用的有效成分。方法 MTT法检测细胞活力 ,荧光显微镜观察凋亡细胞形态 ,流式细胞仪分析凋亡峰及细胞周期 ,比较硒酸酯多糖和卡拉胶对骨肉瘤细胞的不同作用。结果 硒酸酯多糖组抑瘤率、癌细胞凋亡率明显强于卡拉胶组 ,且两者对细胞周期的调控不同。结论 硒酸酯多糖可诱导人骨肉瘤细胞凋亡 。

硒酸酯多糖正常人体药代动力学

目的：确定硒酸酯多糖（κ硒卡拉胶）胶囊在正常人体的药代动力学。方法：健康自愿者分为两组，一组餐前分别ｐｏ硒酸酯多糖１０，３０，５０和１００ｍｇ，另一组餐后ｐｏ５０ｍｇ，于服药前及服药后不同时间取血，用极谱法分别测定血硒含量。结果：血硒达峰时间（Ｔｐｅａｋ）４～５ｈ，消减半衰期约２１～２６ｈ。各剂量血药峰浓度（Ｃｍａｘ）及曲线下面积（ＡＵＣ）随剂量的递增而增加；而达峰时间及其他各常数Ｋｅ、Ｋａ、ｔ１／２（Ｋａ）、ｔ１／２（Ｋｅ）等均接近。进食对正常人体药代动力学无明显影响。给药剂量为１０，３０，５０，１００ｍｇ时，９６ｈ内药物随尿的总排泄率分别为４１．１０％，３７．４０％，３８．８４％和３４．７８％（Ｐ＞０．０５）。结论：药代动力学模型为一室模型。

硒酸酯多糖通过下调mdr1/P-gp表达逆转K562/ADM细胞凋亡抑制

目的:研究硒酸酯多糖(Kappa-selenocarrageenan,KSC)对多药耐药K562/ADM细胞的诱导凋亡效应及其分子机制。方法:以白血病多药耐药细胞K562/ADM为KSC作用的靶细胞,用MTT比色法检测细胞增殖活性,形态学、DNA片段化和流式细胞术(FCM)观察细胞凋亡;RT-PCR检测mdr1基因和Caspase-3基因mRNA的表达;FCM测定P-gp蛋白表达水平和Caspase-3活性。结果:KSC显著抑制K562/ADM细胞增殖,KSC诱导后K562/ADM细胞出现典型的凋亡形态学变化、DNA片段化和亚G1期细胞群等特征性改变。KSC下调K562/ADM细胞mdr1基因表达、抑制P-gp合成,并上调caspase-3基因表达、增强caspase-3活性。结论:KSC通过下调mdr1/P-gp表达逆转K562/ADM多药耐药细胞的凋亡抑制。

硒酸酯多糖对化疗患者免疫功能调节作用的临床试验

目的：确定硒酸酯多糖对化疗患者免疫功能的调节作用。方法：采用随机分组双盲临床试验，观察化疗患者口服硒酸酯多糖（κ－ 硒卡拉胶）（治疗组）与安慰剂（对照组）对免疫功能的影响。结果：治疗组患者Ｔ４ 细胞百分比从疗前２７９±７４ 升至３８１ ±１０８（ Ｐ＜００５），Ｔ４／Ｔ８ 比值从０９２±０２３ 升至１２７±０５０（ Ｐ＜ ００１） ，而对照组Ｔ４ 、Ｔ８ 细胞及Ｔ４／Ｔ８ 比值无明显变化。治疗组患者巨噬细胞吞噬率从２４５ ±１９４ 升至３１９ ±１５３（ Ｐ＜ ００１） ，对照组则从２５４ ±１５４ 降至２１６±２２３（ Ｐ＜ ００１） 。两组患者ＮＫ 细胞活性、Ｉｇ 含量、近期疗效及毒性反应似无显著差异。结论：硒酸酯多糖是一种安全有效的免疫调节剂。

硒酸酯多糖增强荷瘤小鼠免疫功能和自身肿瘤杀伤活性的作用

本文研究了硒酸酯多糖(KSC)对荷S180肉瘤小鼠NK细胞活性、LAK细胞活性、IL-2分泌能力和自身肿瘤杀伤活性(ATK)的影响及抑癌效应.结果表明,KSC(40mg/kg·d×9d,ig)能增强荷瘤鼠NK细胞和LAK细胞活性,促进脾细胞产生IL-2,增强ATK活性;加强环磷酰胺(Cy,20mg/kg·d×9d,ip)的抑瘤作用,并能拮抗Cy对免疫活性细胞的抑制效应.体外用rIL-2激活荷瘤鼠脾淋巴细胞可诱生或增强ATK活性.本研究结果提示,KSC上调肿瘤宿主NK细胞和LAK细胞活性及IL-2的分泌水平,增强ATK活性,可作为生物反应调节剂(BRM)应用于肿瘤生物治疗.

P53介导的活性氧通路对硒酸酯多糖诱导骨肉瘤细胞凋亡的作用

目的探讨P53介导的活性氧(ROS)通路在硒酸酯多糖诱导骨肉瘤细胞凋亡中的作用。方法采用不同质量浓度硒酸酯多糖处理OS-732细胞,分析各组细胞的增殖、凋亡情况、ROS水平及凋亡相关蛋白的表达水平。结果硒酸酯多糖处理后,OS-732细胞生长受到不同程度抑制,呈现出时间和浓度依赖性,60 g/L质量浓度处理48 h时OS-732细胞抑制率最高;20,40,60μg/m L质量浓度处理24 h后,ROS水平显著增加(P<0.05),OS-732细胞凋亡率显著升高,其中早期凋亡细胞及晚期凋亡细胞百分比与0μg/m L相比均有显著性差异(P<0.05);P53,Caspase-9及Bax表达随着药物质量浓度的增加而升高,而Bcl-2的表达显著降低(P<0.05)。结论硒酸酯多糖处理骨肉瘤细胞能显著抑制OS-732细胞的增殖活性,促进凋亡,细胞内高水平的ROS状态可能在此过程中有重要作用。

MTT法检测多种肿瘤细胞对硒酸酯多糖的敏感性研究

目的:采用MTT法检测多种肿瘤细胞对硒酸酯多糖(KSC)的敏感性。方法:以30、60、120mg/L3种不同浓度的KSC分别处理HepG-2、Bel-7402、MCF-7、SGC-7901、A5495种肿瘤细胞,采用MTT法检测KSC对5种肿瘤细胞的抑制率。结果:KSC对多种肿瘤细胞都有明显的抑制增殖作用,KSC120mg/L作用72h后,对上述5种细胞株的抑制率分别为69.31%、62.24%、53.29%、52.03%、33.62%。结论:KSC对多种肿瘤细胞都有抑制作用,尤其是对肝癌细胞的抑制作用最强,具有治疗肝癌潜在的应用价值。

硒酸酯多糖和亚硒酸钠抗白血病效应的实验研究

应用ＭＴＴ比色分析法和细胞克隆形成法比较研究了有机硒化物－硒酸酯多糖和无机硒物－亚硒酸钠对白血病Ｋ５６２细胞的作用。结果表明：ＫＳＣ和Ｎａ２ＳｅＯ３体外在实验浓度范围内均对Ｋ５６２细胞的增殖具有显著的抑制作用，并有剂量反应；Ｋ５６２细胞具有我更新能力的细胞群体对硒的抑制作用更敏感；ＫＳＣ的抗白血病效应明显高于含同样硒量的Ｎａ２ＳｅＯ３，ＫＳＣ的作用约为Ｎａ２ＳｅＯ３的５倍。

硒酸酯多糖对癌症患者红细胞免疫黏附肿瘤细胞功能及其调节功能的影响

目的探讨硒酸脂多糖对癌症患者红细胞免疫黏附肿瘤细胞功能及其调节功能的影响。方法总结了98例癌症病人服用硒酸脂多糖治疗前后对照。结果红细胞C3b受体花环率、红细胞Ic花环率、自然肿瘤红细胞花环率、协同肿瘤红细胞花环率、直向肿瘤红细胞花环率均有显著性差异(P<0.01);红细胞调节因子促进率、红细胞调节因子抑制率、促进肿瘤红细胞花环率,相差显著(P<0.05)。结论硒酸酯多糖增强了肿瘤患者红细胞免疫黏附肿瘤的能力。

硒酸酯多糖对人食管鳞癌Eca109细胞增殖及凋亡的影响

目的研究硒酸酯多糖(KSC)对人食管鳞癌Eca109细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度KSC对Eca109细胞增殖的影响;流式细胞术观察KSC对Eca109细胞凋亡的影响;Westernblot技术检测KSC对Eca109细胞核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达水平的影响。结果 KSC可明显抑制Eca109的增殖(P<0.05),并呈时间及浓度依赖性;经KSC作用后,Eca109细胞的凋亡率随KSC作用时间的延长(24、48、72h)及KSC浓度的增加(30、60、120μg/mL)而明显升高(P<0.01);KSC(60、120μg/mL)显著下调Eca109细胞核中NF-κB蛋白水平(P<0.01)。结论 KSC对Eca109细胞具有抑制增殖、诱导凋亡作用,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。