超高效液相色谱串联质谱法测定海参中硝基呋喃类代谢物残留量

目的:建立一种快速、准确、高效的超高效液相色谱串联质谱检测海参中硝基呋喃类代谢物残留量的方法。方法:采用40℃水浴中超声1 h,45℃气浴中衍生5 h,pH值7.0~7.5条件进行样品前处理,以2 mmol·L^(-1)乙酸铵的0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,超高效液相色谱串联质谱测定。结果:4种硝基呋喃类代谢物在0.5~20.0 ng·mL^(-1)线性关系良好,加标平均回收率在97.3%~103.6%,方法检出限为0.5μg·kg^(-1),定量限为1.0μg·kg^(-1)。结论:该方法可用于市售海参中硝基呋喃类代谢物残留量的快速检测。

高效液相色谱-串联质谱法测定鲤鱼中硝基呋喃类代谢物的不确定度评估

为应对自治区水产品中硝基呋喃类代谢物残留检测的能力验证工作,保证基于国标方法的科学准确。通过建立数学模型对鲤鱼中硝基呋喃类代谢物含量进行检测,同时对不确定度进行评估。结果表明在6类主要不确定来源分量当中,随机效应、标准溶液配制和加标回收为本实验不确定度的主要来源。经评定在K=2情况下鲤鱼中硝基呋喃类代谢物检测含量为:AHD(5.157±0.6310μg/kg),AMOZ(4.813±0.4877μg/kg),AOZ(5.165±0.6159μg/kg),SEM(4.974±0.7616μg/kg)。

动物源性食品中硝基呋喃类代谢物残留量检测方法的验证

本文对《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法 高效液相色谱/串联质谱法》(GB/T 21311—2007)进行方法验证。结果表明,1-氨基-乙内酰脲、5-吗啉甲基-3-氨基-2-噁唑烷基酮、3-氨基-2-噁唑酮、氨基脲这4种硝基呋喃类代谢物在0.50~20.00 ng·mL^(-1)浓度范围内(内标浓度10 ng·mL^(-1))有良好的线性关系,相关系数> 0.99,平均回收率在98.6%~102.0%,相对标准偏差在0%~1.140%。该方法的灵敏度均满足标准方法中规定的要求。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定人血清中4种硝基呋喃类代谢物

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法,同时测定人血清中3-氨基-2-噁唑烷基酮(AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)、1-氨基-2-内酰脲(AHD)4种硝基呋喃类代谢物浓度。方法在酸性条件下,4种硝基呋喃类代谢物水解、衍生,经乙酸乙酯提取净化,在色谱柱Waters BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)上分离,以流动相甲醇-2mmol/L乙酸铵体系进行梯度洗脱。采用电喷雾离子源正离子扫描和多反应监测模式检测,定量方法为同位素内标法。结果AOZ在质量浓度范围2.8~84ng/mL、AMOZ在质量浓度范围2.4~72 ng/mL、AHD在质量浓度范围5.4~163 ng/mL、SEM在质量浓度范围2.2~66 ng/mL内线性关系良好,相关系数r均>0.998,检出限分别为0.5、0.5、2.7、1.1 ng/mL;低、中、高质量浓度的回收率为73.8%~106.7%,相对标准偏差(RSD)为2.7%~13.1%,精密度良好。血清样品短期稳定性良好。结论该方法灵敏、准确、稳定,可用于人血清中4种硝基呋喃代谢物AOZ、AMOZ、AHD、SEM的同时检测。

水产品中硝基呋喃类代谢物检测能力验证与质量控制

新疆维吾尔自治区水产科学研究所实验室多年参加农业农村部组织的水产品中硝基呋喃类代谢物检验检测能力验证。在多年的实验过程中,该实验室从人员、仪器、标准物质、方法和设施环境等方面着手,进行检验质量控制,抓好实验准备、实施实验、结果报送等关键环节,参加的能力验证考核检测结果均合格。结果表明,该实验室在水产品中硝基呋喃类代谢物残留检测能力验证实验过程中,质控有效,检测能力较好。

基于信息熵理论的超高效液相色谱-串联质谱法测定淡水鱼肉中4种硝基呋喃类代谢物的残留量

基于信息熵理论,以5-吗啉甲基-3-氨基-2-口恶唑烷基酮(AMOZ)、3-氨基-2-口恶唑烷基酮(AOZ)、1-氨基-2-乙内酰(AHD)和氨基脲(SEM)等4种硝基呋喃类代谢物回收率综合评分M为评价指标,采用单因素和响应面试验优化了淡水鱼中硝基呋喃类代谢物残留检测的衍生条件。淡水鱼样品用盐酸溶液水解后加入适量内标溶液,用350μL 0.05 mol·L^(-1)邻硝基苯甲醛(衍生试剂)溶液(介质为甲醇)于46℃避光振荡衍生2.5 h。将所得溶液酸度调节至pH 7.4±0.2,用乙酸乙酯提取2次。收集提取液,氮吹至干,加入正己烷用于除杂,50%(体积分数)乙腈溶液用于复溶残渣,离心,取下层相过滤,滤液用超高效液相色谱-串联质谱法分析。在色谱分析中,以Agilent Zorbax RRHD Eclipse Plus C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)分离,体积比1∶1的0.1%(体积分数)甲酸溶液和乙腈的混合溶液等度洗脱。在质谱分析中,以大气压电喷雾离子源电离,多反应监测(MRM)模式检测。在定量分析时,以基质匹配法以及内标法降低基质干扰和提高方法的灵敏度。结果显示:因素衍生试剂体积、衍生温度和衍生时间以及交互因素衍生试剂体积与衍生温度对回收率综合评分M的影响极显著(p<0.01),最优衍生条件下二次多项式模型的预测值(M预测=1.0204)和试验值(M试验=0.9992)基本一致;4种硝基呋喃类代谢物工作曲线的线性范围均为0.02~50.00μg·L^(-1),检出限(3S/N)为0.02~0.19μg·kg-1。按照标准加入法进行回收试验,回收率为85.1%~116%,测定值的相对标准偏差(n=5)为0.64%~9.8%。方法用于55批实际样品的分析,AOZ、AMOZ和SEM检出率分别为1.82%,1.82%和3.64%,其中AOZ和AMOZ的最高检出量分别为0.24,0.13μg·kg-1,SEM的检出量在测定下限以下。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中硝基呋喃类代谢物、三苯甲烷类、磺胺类、喹诺酮类和酰胺醇类药物残留

研究建立一种超高效液相色谱-串联质谱法快速准确测定水产品中硝基呋喃类代谢物、三苯甲烷类、磺胺类、喹诺酮类和酰胺醇类等5类36种药物残留的方法。样品在酸性条件下水解、超声波辅助衍生后经乙腈提取,提取液经氯化钠脱水盐析后氮吹至近干,残留物用乙腈水溶液复溶,用BEH C18色谱柱洗脱分离,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定,基质匹配标准曲线内标法定量。结果显示,36种药物线性关系良好,相关系数均大于0.99,方法定量限为0.07~2.0μg/kg,在不同添加浓度水平下平均回收率为65.0%~120.0%,相对标准偏差为0.5%~12.0%;实际样品的检测结果与标准方法检测结果基本一致。该方法具有速度快、操作简单、定性定量结果准确性好、成本低等优点,适用于大批量水产品中5类药物残留的检测。

液相色谱-串联质谱法测定小龙虾中硝基呋喃类代谢物残留量的不确定度评定

文章根据《测量不确定度评定与表示》(JJF 1059.1—2012),探讨采用《食品安全国家标准水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定液相色谱-串联质谱法》(GB 31656.13—2021)测定小龙虾中硝基呋喃代谢物残留量的不确定度,建立相应数学模型,评估不确定度的测定结果。检测结果为c_(AOZ)=2.29μg/kg,U=0.33,k=2;c_(AMOZ)=2.41μg/kg,U=0.27,k=2;c_(AHD)=2.45μg/kg,U=0.31,k=2;c_(SEM)=2.37μg/kg,U=0.27,k=2。

液相色谱-串联质谱法快速检测刺参中硝基呋喃类代谢物方法

硝基呋喃类药物是一种人工合成的具有5-硝基呋喃基本结构的广谱抗生素,常见有呋喃唑酮(FZD)、呋喃西林(NFZ)、呋喃妥因(NFT)和呋喃它酮(FTD)。经研究发现,该类药物在动物体内快速分解产生的代谢物可与动物体内蛋白质结合而长时间稳定存在,对人体产生“三致”潜在危害(肖曼等,2020)。随着刺参大规模人工养殖的发展,粗放的养殖管理以及高密度养殖等原因导致病害等问题接踵而至。

水产品中硝基呋喃类代谢物两种检测方法的比较

通过加标回收实验比较了水产品中硝基呋喃类代谢物检测方法GB 31656.13-2021和农业部783号公告-1-2006公告的差异。实验发现:GB 31656.13-2021中衍生时用0.5 mol/L盐酸,虾蟹样品的AHD有干扰,造成AHD回收率偏高;农业部783号公告-1-2006方法衍生时用0.2 mol/L盐酸,检测结果无干扰,四种硝基呋喃类代谢产物回收率均在正常范围,但对于虾蟹类产品需在加入0.2 mol/L盐酸的基础上再加入盐酸调节溶液pH值1~2才能保证好的衍生效果。

pH值对水产品中硝基呋喃类代谢物提取效率的影响

为探究水产品中硝基呋喃类代谢物提取过程中,pH值对其回收率和离子信号强度的影响,衍生化后进行了5种不同梯度pH值调节,并测定加标回收率和离子信号强度。结果表明,衍生化反应后,将pH值调至6.0~7.5时,4种硝基呋喃类代谢物离子响应值较高,加标试验中添加的4种硝基呋喃类代谢物标准物质(5.00μg/kg)回收率为98.14%~100.73%,连续测定相对标准偏差(RSD)为0.23%~2.48%,平行样RSD为1.13%~2.90%。指出,在硝基呋喃类代谢物提取过程中,将衍生化反应后的pH值调至6.0~7.5时,4种硝基呋喃类代谢物离子响应值较高,回收率、精密度和重复性较好。

高效液相色谱法检测水产品中硝基呋喃类代谢物残留量

建立了水产品中硝基呋喃类代谢物残留量测定的样品处理方法和高效液相色谱分析方法。样品经酸解、2-氯苯甲醛衍生后用乙酸乙酯萃取、SPE柱净化,经高效液相-紫外检测器测定。本方法4种硝基呋喃类代谢物的定量限均为1.0μg/kg,在5.0～500μg/L质量浓度范围内,4种硝基呋喃类代谢物的工作曲线均呈良好线性,在2个添加浓度水平的平均回收率为76%～102%,相对标准偏差均小于10%(n=6)。该方法适用于定性定量水产品中硝基呋喃类代谢物的残留分析。

高效液相色谱-串联质谱法检测水产品中硝基呋喃类代谢物的优化研究

研究了利用高效液相色谱-串联质谱法（LC—MS／MS）检测水产品中残留的5-吗啉甲基-3-氨基-2-嗯唑烷基酮（AMOZ）、氨基脲（SEM）、1-氨基-2-内酸脲（AHD）和3-氨基-2-噁唑烷基酮（AOZ）等4种硝基呋喃类代谢物，优化了前处理方法及液相色谱条件。硝基呋喃类代谢物经衍生化后，调节样品pH至7．0～7．5，加入8mL乙酸乙酯，离心并转移上清液，氮气吹干后，用乙腈-0．1％的甲酸水（5／95，V/V）溶液定容，4℃高速离心后上机测定。采用梯度洗脱法，4种代谢物在C18柱中分离良好。该法有效地提高硝基呋喃类代谢物的检测效率，且检测结果准确，适用于批量水产品的检测。

液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法快速测定水产品中硝基呋喃类代谢物

硝基呋喃类药物是人工合成的具有5-硝基呋喃基本结构的广谱抗菌药物,对光敏感,代谢快速,原药及其在动物体内残留的代谢产物有致畸、致突变和致癌的危险.出于安全性考虑,欧美等发达国家及我国先后颁布了禁止使用该类兽药的禁令.目前对硝基呋喃类代谢物的检测,

液相色谱串联电喷雾质谱检测中溶剂对硝基呋喃类代谢物响应的影响

通过对比不同溶剂对液相色谱串联电喷雾质谱检测硝基呋喃类代谢物灵敏度的影响,以筛选最佳的流动相和上机溶液。Q1扫描时,AHD在负离子模式下有最高的响应强度。正离子模式检测时,甲醇中添加0.1%的氨水,4种化合物均能获得令人满意的灵敏度。用液相色谱串联正电离电喷雾质谱检测时,以甲醇和0.1%的氨水作为流动相,上机溶液中也添加0.1%的氨水,灵敏度高,杂质干扰少,准确度好,能够较好地满足鱼、虾、蟹等复杂样品基质中痕量硝基呋喃类代谢物残留检测的需要。

高效液相色谱-串联质谱法测定动物源性食品中硝基呋喃类代谢物残留量

依次用甲醇、乙醇和乙醚溶剂提取,使动物源性样品中呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃它酮、呋喃妥因等4种硝基呋喃类游离态代谢物进入提取液,而结合态代谢物保留在残渣中。在酸性条件下用2硝基苯甲醛分别衍生游离态和结合态代谢物,经乙酸乙酯提取浓缩后,用液相色谱-四极杆串联质谱仪定性,用同位素内标法定量。检出限均为0.3μg/kg。在0.3、1.0和5.0μg/kg3个浓度水平上进行加标回收试验,回收率为85.2%～112.5%,相对标准偏差均不大于6.3%(n=6)。

分散固相萃取净化-液相色谱-质谱联用测定水产苗种中硝基呋喃类代谢物残留量

建立分散固相萃取净化-液相色谱-质谱法测定水产苗种中氨基脲、5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮、3-氨基-2-噁唑烷基酮、1-氨基-2-内酰脲,4种硝基呋喃类代谢物残留量的方法。样品经甲醇-水(8:1,v/v)溶液洗涤后,盐酸溶液水解,以2-硝基苯甲醛作为衍生化试剂,乙酸乙酯萃取,浓缩,分散固相萃取净化,采用液相色谱-质谱仪、多反应监测扫描模式检测和同位素内标定量。4种硝基呋喃类代谢物在0.5~20 μg/L范围内线性相关系数大于0.997,检出限0.1 μg/kg,回收率90.5%~104.5%,相对标准偏差1.56%~8.08%。本方法灵敏、高效、简单、重复性好,满足硝基呋喃类代谢物的检测要求。

液相色谱-串联质谱法测定贝类组织中硝基呋喃类代谢物残留量

建立了液相色谱-串联质谱法测定贝类产品中硝基呋喃类代谢物残留量的分析方法.贝类组织中残留的硝基呋喃类蛋白结合态代谢物在酸性条件下水解,用2-硝基苯甲醛衍生化,经乙酸乙酯液-液萃取、浓缩及基质分散固相萃取和超滤净化后,采用液相色谱串联质谱仪测定,以电喷雾离子源正离子扫描模式进行质谱分析,内标法定量.硝基呋喃类代谢物在0.5—20μg·L^(-1)范围内线性关系良好,相关系数R2>0.999.4种硝基呋喃类代谢物添加水平为1.00,2.50、10.0μg·kg^(-1)时,平均回收率在90.1%—99.5%之间,批内和批间变异系数均<15%.4种硝基呋喃类代谢物的检出限均为0.50μg·kg^(-1).本方法灵敏、高效、简单、重现性好,满足贝类产品中硝基呋喃类代谢物残留量的检测要求.

LC-MS-MS检测蜂花粉中硝基呋喃类代谢物

建立蜂花粉中硝基呋喃类代谢物液相色谱-串联质谱检测方法。样品经高氯酸酸化后,固相萃取净化、衍生、乙酸乙酯提取,串联质谱进样分析。在1.0、2.0、5.0μg/kg这3个添加水平下,硝基呋喃类代谢物的平均回收率范围为89.5%～100.9%,日内相对标准偏差小于10%,日间相对标准偏差小于15%。在0.5～20ng/mL范围内呈良好的线性(r>0.99),检测限为0.25μg/kg,定量限为1.0μg/kg。该检测方法简单,选择性好,抗干扰能力强,适用于蜂花粉中硝基呋喃类代谢物的分析确证。

HPLC-MS/MS技术在中华绒螯蟹硝基呋喃类代谢物残留量检测中的应用

建立了中华绒螯蟹中硝基呋喃类代谢物残留量的液相色谱—串联质谱检测方法.取均质后的中华绒螯蟹可食部分样品,用盐酸水解组织中蛋白结合代谢物,经2-硝基苯甲醛37℃过夜衍生化,调节pH值至约7.0～7.4后,用乙酸乙酯提取,正己烷净化.选用电喷雾离子源,在正离子、多反应监测方式模式下进行定性,以同位素内标法进行定量.方法的检出限为0.5μg.kg-1,工作曲线的线性范围为1.25～50.0μg.L-1.在添加浓度为0.5～10.0μg.kg-1的范围内,AMOZ、SEM、AHD和AOZ的回收率分别在92.8%～106%、84.5%～94.6%、80.6%～98.6%和88.4%～105%之间,相对标准偏差均小于10%.