超高效液相色谱串联质谱法测定畜产品中硝基呋喃类抗生素代谢物残留的研究

建立和发展了畜产品4种硝基呋喃类抗生素代谢物残留的超高效液相色谱串联质谱法（UPLC—MS／MS）快速检测方法。样品中与蛋白结合的代谢物经0．125moL盐酸水解，2-硝基苯甲醛（2-NBA）37℃衍生16h。上清液调节pH=7．4，用乙酸乙酯提取，正己烷净化，流动相定容。采用电喷雾电离，正离子扫描，多反应检测模式（MRM）。外标法定量，在添加浓度为0．1～2．0μg／kg范围内，4种代谢物的平均回收率在67．3％～85．0％之间，10次测定结果的RSD平均值在2．0％～9．7％之间。最低检出限均达到0．15μg／kg，在0．10～20．00ng／mL的线性范围内，相关系数r均大于0．99，实现了样品检测的快速、高灵敏和高的选择性，适用于畜产品猪肉和猪肝中硝基呋喃类代谢物残留的检测。

液相色谱-串联质谱联用法测定蜂蜜及水产品中硝基呋喃类抗生素代谢物残留量

采用微量化样品前处理技术,以邻硝基苯甲醛为衍生剂,电喷雾正离子多反应监测方式建立了蜂蜜及水产品中四种硝基呋喃类抗生素代谢物残留量同时测定的液相色谱-串联质谱联用法.方法的检出限为0.02～0.3 ng/g,线性范围均＞102,线性方程的相关系数＞0.997,回收率为79.0%～95.6%.

高效液相色谱-串联质谱法测定动物肌肉中硝基呋喃类抗生素代谢物

用高效液相色谱 -串联质谱 (LC -MS -MS)同时测定动物肌肉中呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林和呋喃妥因的代谢物。盐酸水解组织中蛋白结合代谢物 ,同时加入 2 -硝基苯甲醛 (2 -NBA) ,37℃过夜衍生。上清液调pH值 7.0后 ,用OasisHLB固相萃取 (SPE)柱净化。采用电喷雾电离 (ESI) ,正离子 ,选择反应监测 (SRM)模式检测。三离子原则 ,外标法定量。定量限 (LOQ) 5 -甲基吗啉 - 3-氨基 - 2 -唑烷基酮(AMOZ)、3-氨基 - 2 -唑烷基酮 (AOZ)均为 0 .1ng/g,氨基脲(SEM)、1-氨基 -乙内酰脲 (AHD)均为 0 .5ng/g;检测限(LOD)AMOZ、AOZ均为 0 .0 5ng/g ,SEM、AHD均为 0 .1ng/g。在添加浓度 0 .5～ 10ng/g范围内 ,AMOZ回收率为 6 5 .4 %～91.3% ,SEM回收率为 6 2 .7%～ 94 .6 % ,AHD回收率为 6 3.9%～ 89.4 % ,AOZ回收率为 6 7.8%～ 90 .9%。相对标准偏差(RSD)均小于 4 .8%。

液相色谱-串联质谱法测定不同基质样品中硝基呋喃代谢物残留量

建立液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋、虾、鱼等农产品中硝基呋喃代谢物的残留量。样品中的硝基呋喃残留物经盐酸水解后,以2-硝基苯甲醛衍生,采用乙酸乙酯提取,浓缩,净化后再用C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液-乙腈溶液作为流动相梯度洗脱,电喷雾离子源(ESI)下以多反应监测(MRM)正离子模式扫描检测,内标法定量分析。呋喃它酮代谢物、呋喃西林代谢物、呋喃妥因代谢物、呋喃唑酮代谢物的质量浓度在0.5~50 ng/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均大于0.995,检出限分别为0.13、0.035、0.14、0.017μg/kg。在鸡蛋、虾、鱼中添加2、5、10μg/kg硝基呋喃代谢物时,平均回收率为88.71%~105.16%,测定结果的相对标准偏差为3.12%~9.08%(n=6)。该方法简便、快捷、准确度高,可用于测定鸡蛋、虾、鱼等农副产品中的硝基呋喃代谢物。

超高效液相色谱串联质谱法测定海参中硝基呋喃类代谢物残留量

目的:建立一种快速、准确、高效的超高效液相色谱串联质谱检测海参中硝基呋喃类代谢物残留量的方法。方法:采用40℃水浴中超声1 h,45℃气浴中衍生5 h,pH值7.0~7.5条件进行样品前处理,以2 mmol·L^(-1)乙酸铵的0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,超高效液相色谱串联质谱测定。结果:4种硝基呋喃类代谢物在0.5~20.0 ng·mL^(-1)线性关系良好,加标平均回收率在97.3%~103.6%,方法检出限为0.5μg·kg^(-1),定量限为1.0μg·kg^(-1)。结论:该方法可用于市售海参中硝基呋喃类代谢物残留量的快速检测。

草鱼中兽药残留硝基呋喃代谢物检测的研究

本研究创建了液质联用检测方法,检测了草鱼中呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林4种硝基呋喃代谢物。结果显示,该检测方法准确度较高、简单、可靠,能满足草鱼中不科学应用硝基呋喃类药物的检测监控要求。

高效液相色谱-串联质谱法测定鲤鱼中硝基呋喃类代谢物的不确定度评估

为应对自治区水产品中硝基呋喃类代谢物残留检测的能力验证工作,保证基于国标方法的科学准确。通过建立数学模型对鲤鱼中硝基呋喃类代谢物含量进行检测,同时对不确定度进行评估。结果表明在6类主要不确定来源分量当中,随机效应、标准溶液配制和加标回收为本实验不确定度的主要来源。经评定在K=2情况下鲤鱼中硝基呋喃类代谢物检测含量为:AHD(5.157±0.6310μg/kg),AMOZ(4.813±0.4877μg/kg),AOZ(5.165±0.6159μg/kg),SEM(4.974±0.7616μg/kg)。

动物源性食品中硝基呋喃类代谢物残留量检测方法的验证

本文对《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法 高效液相色谱/串联质谱法》(GB/T 21311—2007)进行方法验证。结果表明,1-氨基-乙内酰脲、5-吗啉甲基-3-氨基-2-噁唑烷基酮、3-氨基-2-噁唑酮、氨基脲这4种硝基呋喃类代谢物在0.50~20.00 ng·mL^(-1)浓度范围内(内标浓度10 ng·mL^(-1))有良好的线性关系,相关系数> 0.99,平均回收率在98.6%~102.0%,相对标准偏差在0%~1.140%。该方法的灵敏度均满足标准方法中规定的要求。

高效液相色谱/串联质谱法测定奶粉中的硝基呋喃代谢物

用高效液相色谱/串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定奶粉中呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林和呋喃妥因的代谢物.盐酸水解奶粉中蛋白结合的代谢物,同时加入2-硝基苯甲醛(2-NBA),37℃过夜衍生化.加入硫酸锌,调pH值至7.0后,再加入亚铁氰化钾去除蛋白.后用乙酸乙酯提取,正己烷净化,分析物采用电喷雾电离正离子(ESI+)、多反应监测(MRM)模式检测,内标法定量.在添加浓度0.5～2 μg/kg范围内,内标法回收率为89.5%～110.3%;相对标准偏差(RSD)小于11.3%.5-马啉代甲基-3-氨基-2-恶唑酮(5-methylmorpholino-3-amino-2-oxazolidinone, AMOZ)、3-氨基-2-恶唑酮(3-amino-2-oxazolidinone, AOZ)方法检出限为0.05 μg/kg,氨基脲(semicarbazide, SEM)、1-氨基-乙内酰胺(1-amino-hydantoin, AHD)为0.1 μg/kg.

液相色谱-串联质谱法检测水产品中残留的硝基呋喃类药物的代谢物

建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法用于同时测定水产品中硝基呋喃类药物的代谢物3-氨基-2-唑烷基酮(AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)、1-氨基-2-内酰脲(AHD)和3,5-二硝基水杨酸肼(DNSH)。样品经盐酸水解、2-硝基苯甲醛衍生、乙酸乙酯提取净化。氮吹至干后,用1 mL乙腈-0.1%甲酸水(20∶80,v/v)定容。经Aquasil C18色谱柱分离,用液相色谱-三重四极杆串联质谱以多反应监测模式(MRM)进行检测分析,内标法定量。结果表明,该方法的线性范围为0.5～10μg/kg,5种代谢物的线性相关系数均不小于0.997 6,定量限为0.5μg/kg。在0.5、1.0、2.0和4.0μg/kg的添加水平下,加标回收率为81.3%～100.5%,RSD为3.4%～10.0%。本法可作为水产品中5种硝基呋喃类药物的代谢物残留量同时分析的有效手段。

高效液相色谱法检测水产品中硝基呋喃类代谢物残留量

建立了水产品中硝基呋喃类代谢物残留量测定的样品处理方法和高效液相色谱分析方法。样品经酸解、2-氯苯甲醛衍生后用乙酸乙酯萃取、SPE柱净化,经高效液相-紫外检测器测定。本方法4种硝基呋喃类代谢物的定量限均为1.0μg/kg,在5.0～500μg/L质量浓度范围内,4种硝基呋喃类代谢物的工作曲线均呈良好线性,在2个添加浓度水平的平均回收率为76%～102%,相对标准偏差均小于10%(n=6)。该方法适用于定性定量水产品中硝基呋喃类代谢物的残留分析。

高效液相色谱-串联质谱联用测定蜂王浆中的四种硝基呋喃类药物的代谢物

报道了高效液相色谱-串联质谱联用测定蜂王浆中呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮4种硝基呋喃类药物的代谢物残留的方法。以三氯乙酸作为蜂王浆的蛋白质沉淀剂，同时提供衍生化反应所需的酸性环境；使用4种同位素内标，补偿了衍生化效率、衍生后样品溶液的pH值及光照对定量结果所产生的影响，极大地提高了定量的准确性。实验结果表明，呋喃它酮代谢物的检测下限可以达到0．03μg／kg，其他3种硝基呋喃类药物的代谢物的检测下限可以达到0．05μg／kg（S／N大于5）；呋喃它酮代谢物的定量下限可以达到0．20μg／kg，其他3种硝基呋喃类药物的代谢物的定量下限可以达到0．25μg／kg（S／N大于10）；线性范围为0．4～20ng／mL，添加回收率为97．7％～104．8％（内标校正），相对标准偏差（RSD）为2．7％～9．7％。

液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法快速测定水产品中硝基呋喃类代谢物

硝基呋喃类药物是人工合成的具有5-硝基呋喃基本结构的广谱抗菌药物,对光敏感,代谢快速,原药及其在动物体内残留的代谢产物有致畸、致突变和致癌的危险.出于安全性考虑,欧美等发达国家及我国先后颁布了禁止使用该类兽药的禁令.目前对硝基呋喃类代谢物的检测,

高效液相色谱-串联质谱法检测水产品中硝基呋喃类代谢物的优化研究

研究了利用高效液相色谱-串联质谱法（LC—MS／MS）检测水产品中残留的5-吗啉甲基-3-氨基-2-嗯唑烷基酮（AMOZ）、氨基脲（SEM）、1-氨基-2-内酸脲（AHD）和3-氨基-2-噁唑烷基酮（AOZ）等4种硝基呋喃类代谢物，优化了前处理方法及液相色谱条件。硝基呋喃类代谢物经衍生化后，调节样品pH至7．0～7．5，加入8mL乙酸乙酯，离心并转移上清液，氮气吹干后，用乙腈-0．1％的甲酸水（5／95，V/V）溶液定容，4℃高速离心后上机测定。采用梯度洗脱法，4种代谢物在C18柱中分离良好。该法有效地提高硝基呋喃类代谢物的检测效率，且检测结果准确，适用于批量水产品的检测。

免疫胶体金法快速检测水产品中硝基呋喃类代谢物的研究

对水产品中硝基呋喃类代谢物(AOZ,SEM,AMOZ,AHD)快速衍生化方法的研究发现:理想的衍生化条件是在酸性条件下,加入4-羰基苯甲醛(4-CBA)或2-硝基苯甲醛(2-NBA)经60℃恒温水浴60 min;进一步对样品的洗涤、提取和净化方法进行了优化,在此基础上建立了水产品中硝基呋喃类代谢物免疫胶体金快速检测方法,研制出免疫胶体金快速检测试剂盒,对AOZ最低检出限为0.5μg.kg-1,对SEM,AMOZ和AHD最低检出限均为1.0μg.kg-1,最短检测时间约为90 min.个-1样品。胶体金法与液相—串联质谱法的检测结果进行对比,两者的符合率约为98%。胶体金法快速、简便、成本低,有很好的应用价值。

2013～2015年湖北地区虾中硝基呋喃代谢物残留的监测分析

目的分析2013~2015年湖北地区虾产品中硝基呋喃类药物的残留情况,以期为硝基呋喃代谢物的来源和危害分析提供科学依据。方法采用超高效液相色谱串联质谱法检测湖北虾产品中呋喃它酮(furaltadone)、呋喃西林(nitrofurazone)、呋喃妥因(nitrofurantoin)和呋喃唑酮(furazolidone)4种硝基呋喃类代谢物的残留量,并用Excel和SPSS 16.0对实验数据进行统计学分析。结果硝基呋喃类药物的代谢产物总体检出率为27.09%,检出的代谢物均为氨基脲(semi carbazide,SEM),河虾的检出率最高,为61.54%;其次是基围虾为6.78%;最低是小龙虾为1.38%;对于整体匀浆的带壳河虾样品,检出率高达91.67%;而去壳的河虾虾肉样品没有检出SEM。结论湖北地区的虾产品中存在不同程度的硝基呋喃污染情况,同时发现河虾中有内源性SEM的存在。结合湖北地区居民的膳食消费情况分析,虾中SEM暴露对人类健康危害较小。

同位素稀释质谱法测定蜂蜜中4种硝基呋喃代谢物

研究了蜂蜜中4种硝基呋喃代谢物：呋喃唑酮代谢物（AOZ）、呋喃它酮代谢物（AMOZ）、呋喃妥因代谢物（AHD）、呋喃西林代谢物（SEM）的同位素稀释HPLC-MS／MS分析方法，以邻硝基苯甲醛作为衍生化试剂，AOZ-d4、AMOZ-d5、AHD-^13C3SEM·HCl-（^13C，^15N2）作内标，并将超声波衍生化法应用到实际样品的分析测试当中，以乙腈-0．1％甲酸为流动相，采用梯度洗脱，15min可将4种代谢物完全分离，再以MS，MS进行定性和定量分析。加标回收率为82％-112％；定量限（LOQ）为0．05—1ug／kg；检出限（IDD）为0．01～0．25ug／kg。该方法满足欧盟（EU）对进出口蜂蜜中硝基呋喃代谢物的检测要求。

水产品中硝基呋喃代谢物残留快速检测新方法的研究

采用超高效液相色谱-串联质谱检测系统(UPLC-MS/MS)研究了2种衍生剂、2种衍生时间对水产品中4种硝基呋喃代谢物3-氨基-2-唑烷基酮(AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)、1-氨基-乙丙酰脲(AHD)的衍生化反应机理、衍生产物的检测灵敏度及其稳定性。质谱扫描结果表明,衍生剂2-氯苯甲醛和2-硝基苯甲醛对4种硝基呋喃代谢物的衍生化反应遵循相同的亲核加成反应机理;方差分析结果表明,同一衍生剂和同一代谢物,快速衍生化2 h和连续衍生化16 h获得的衍生产物的检测灵敏度没有显著差别;所有快速衍生物检测灵敏度连续4 d保持相对稳定。初步研究了快速水解对阳性样品的有效性。

食品中硝基呋喃类药物及其代谢物残留检测的研究进展

硝基呋喃类药物是一类人工合成的广谱抗菌药物,主要包括呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林等。因其价格相对低廉,曾大量应用于家禽、家畜和水产品动物的细菌性疾病的预防和治疗。原药在动物体内代谢速度快,半衰期短,其代谢物与蛋白组织结合紧密,残留时间长。研究发现原药及代谢物对人体有潜在的致癌致畸等作用,世界各国在动物源性食品生产过程中已全面禁止此类药物的使用,并规定了检测标准,但动物养殖者们违法使用硝基呋喃类药物的现象仍有发生。硝基呋喃类药物的检测方法繁多,主要有色谱分析法、免疫学方法等,各类方法均有其优点与局限性。本文综述了近年来对食品中硝基呋喃类药物及代谢物的残留检测方法,并对硝基呋喃类代谢物残留的检测方法的趋势进行展望。