鱼肉中硝基呋喃类药物残留的测定能力验证结果与分析

硝基呋喃类药物因具有良好的抑菌杀菌作用而广泛用于水产及畜禽等动物疾病的防治[1-3]。呋喃唑酮作为最典型的一种硝基呋喃类抗生素,其在动物体内代谢消除快,生物半衰期短,但其代谢产物3-氨基-2-噁唑烷酮(AOZ)具有很强的蛋白结合性[4],可长时间残存在动物内脏及肌肉等组织中,且AOZ有很强的毒副作用,长期摄入AOZ超标的食品可能会对人体胃肠道、肝脏等器官造成一定损伤[5-8]。出于安全性考虑,世界上大部分国家均严禁使用该类药物。早在2002年我国就已将硝基呋喃类药物列为禁用药物,并不得在动物性食品中检出,农业农村部250号公告也再次将呋喃唑酮列入食品动物禁用化合物名录[9]。但是,由于该类药物药效好、价格低廉,一些养殖户依然违规使用。

食品中硝基呋喃类药物残留检测技术研究进展

硝基呋喃类抗菌药因价格便宜、抗菌效果好,曾被广泛应用于畜禽水产等养殖行业。其代谢物可在动物体内长时间残留,对人体有强毒性和潜在的致畸致癌致突变风险,对此各国已出台限量标准和管控政策。本文概述了5种硝基呋喃类原药(含硝呋索尔)及其代谢物的理化性质;色谱技术、液相色谱-质谱法和免疫学技术等常用检测技术用于食品中硝基呋喃类药物残留检测的近3年研究进展,比较了各方法的前处理技术和检测技术的特点及检测效果;着重介绍了表面增强拉曼、电化学传感、基于金属有机框架的荧光传感等新型快速检测技术用于硝基呋喃类药物残留检测的发展,从材料设计和检测方法等方面归纳比较,并就硝基呋喃类药物残留的检测技术进行了展望,以期为硝基呋喃类药物及其代谢物的检测、监管等提供新思路。

动物源性食品中硝基呋喃类代谢物残留量检测方法的验证

本文对《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法 高效液相色谱/串联质谱法》(GB/T 21311—2007)进行方法验证。结果表明,1-氨基-乙内酰脲、5-吗啉甲基-3-氨基-2-噁唑烷基酮、3-氨基-2-噁唑酮、氨基脲这4种硝基呋喃类代谢物在0.50~20.00 ng·mL^(-1)浓度范围内(内标浓度10 ng·mL^(-1))有良好的线性关系,相关系数> 0.99,平均回收率在98.6%~102.0%,相对标准偏差在0%~1.140%。该方法的灵敏度均满足标准方法中规定的要求。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中硝基呋喃类代谢物、三苯甲烷类、磺胺类、喹诺酮类和酰胺醇类药物残留

研究建立一种超高效液相色谱-串联质谱法快速准确测定水产品中硝基呋喃类代谢物、三苯甲烷类、磺胺类、喹诺酮类和酰胺醇类等5类36种药物残留的方法。样品在酸性条件下水解、超声波辅助衍生后经乙腈提取,提取液经氯化钠脱水盐析后氮吹至近干,残留物用乙腈水溶液复溶,用BEH C18色谱柱洗脱分离,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定,基质匹配标准曲线内标法定量。结果显示,36种药物线性关系良好,相关系数均大于0.99,方法定量限为0.07~2.0μg/kg,在不同添加浓度水平下平均回收率为65.0%~120.0%,相对标准偏差为0.5%~12.0%;实际样品的检测结果与标准方法检测结果基本一致。该方法具有速度快、操作简单、定性定量结果准确性好、成本低等优点,适用于大批量水产品中5类药物残留的检测。

超高效液相色谱-串联质谱法测定乳制品中3种硝基咪唑类药物及其代谢物

建立超高效液相色谱-串联质谱法测定乳制品中3种硝基咪唑类药物及其代谢物的检测方法。牛奶和奶粉样品经乙酸沉淀蛋白质后高速离心分层,取适量中间层清液过0.22μm滤膜,超高效液相色谱-串联质谱测定,内标法定量。羟基甲硝唑在0.20~100.0 ng/mL浓度范围内线性良好,r为0.9997;洛硝哒唑和二甲硝唑在0.50~100.0 ng/mL浓度范围内线性良好,r分别为0.9997和0.9999;甲硝唑和羟甲基甲硝咪唑在1.00~100.0 ng/mL浓度范围内线性良好,r分别为0.9999和0.9993。牛奶中5种目标化合物的检出限为0.15~0.50μg/kg,定量限为0.20~1.00μg/kg,5个浓度添加水平回收率为88%~109%,RSD在2.0%~12.7%之间;奶粉中5种目标化合物的检出限为1.00~2.50μg/kg,定量限为2.50~5.00μg/kg,5个浓度添加水平回收率为84%~113%,RSD在1.8%~12.4%之间。本方法使用有机试剂沉淀蛋白,较国标方法操作简单,经济便利,避免使用大量有机试剂,且具有较高的准确度,可应用于牛奶和奶粉中硝基咪唑类药物以及代谢产物残留的定量检测。

液相色谱-串联质谱法测定不同基质样品中硝基呋喃代谢物残留量

建立液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋、虾、鱼等农产品中硝基呋喃代谢物的残留量。样品中的硝基呋喃残留物经盐酸水解后,以2-硝基苯甲醛衍生,采用乙酸乙酯提取,浓缩,净化后再用C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液-乙腈溶液作为流动相梯度洗脱,电喷雾离子源(ESI)下以多反应监测(MRM)正离子模式扫描检测,内标法定量分析。呋喃它酮代谢物、呋喃西林代谢物、呋喃妥因代谢物、呋喃唑酮代谢物的质量浓度在0.5~50 ng/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均大于0.995,检出限分别为0.13、0.035、0.14、0.017μg/kg。在鸡蛋、虾、鱼中添加2、5、10μg/kg硝基呋喃代谢物时,平均回收率为88.71%~105.16%,测定结果的相对标准偏差为3.12%~9.08%(n=6)。该方法简便、快捷、准确度高,可用于测定鸡蛋、虾、鱼等农副产品中的硝基呋喃代谢物。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定人血清中4种硝基呋喃类代谢物

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法,同时测定人血清中3-氨基-2-噁唑烷基酮(AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)、1-氨基-2-内酰脲(AHD)4种硝基呋喃类代谢物浓度。方法在酸性条件下,4种硝基呋喃类代谢物水解、衍生,经乙酸乙酯提取净化,在色谱柱Waters BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)上分离,以流动相甲醇-2mmol/L乙酸铵体系进行梯度洗脱。采用电喷雾离子源正离子扫描和多反应监测模式检测,定量方法为同位素内标法。结果AOZ在质量浓度范围2.8~84ng/mL、AMOZ在质量浓度范围2.4~72 ng/mL、AHD在质量浓度范围5.4~163 ng/mL、SEM在质量浓度范围2.2~66 ng/mL内线性关系良好,相关系数r均>0.998,检出限分别为0.5、0.5、2.7、1.1 ng/mL;低、中、高质量浓度的回收率为73.8%~106.7%,相对标准偏差(RSD)为2.7%~13.1%,精密度良好。血清样品短期稳定性良好。结论该方法灵敏、准确、稳定,可用于人血清中4种硝基呋喃代谢物AOZ、AMOZ、AHD、SEM的同时检测。

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱同时测定乳制品中的苯并咪唑类药物及其代谢物残留量

建立了乳制品中苯并咪唑类药物及其代谢物固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱的分析方法。样品经含0.2%甲酸的乙腈提取后离心,上清液使用固相萃取柱进行净化,UPLC HSS T_(3)色谱柱分离,电喷雾正离子模式下多反应监测(Multiple Reaction Monitoring,MRM)测定。结果显示,在1.0~50μg/L范围内的线性相关系数r≥0.995(除三氯苯达唑为0.9578),方法检出限(Limit of Detection,LOD)(S/N=3)为0.002 mg/kg(除阿苯达唑-2-氨基砜、噻苯达唑和噻苯咪唑-5-羟基为0.003 mg/kg),方法定量限(Limit of Quantitation,LOQ)(S/N=10)为0.005 mg/kg(除阿苯达唑-2-氨基砜、噻苯达唑和噻苯咪唑-5-羟基为0.010 mg/kg)。在0.005、0.01、0.05 mg/kg三个加标水平下回收率在62.5%~117.6%之间,相对标准偏差RSD在1.92%~12.17%之间。该方法操作简单、灵敏度高,适用于乳制品中苯并咪唑类药物及其代谢物的定量分析。

超高效液相色谱串联质谱法测定动物源食品中4种硝基呋喃代谢物

本研究建立了超高效液相色谱串联质谱法同时检测动物源食品中3-氨基-2-噁唑烷基酮(3-Amino-2-Oxazolidinone,AOZ)、5-吗啉甲基-3-氨基-2-噁唑烷基酮(3-Amino-5-Morpholinomethyl-2-Oxazolidinone,AMOZ)、氨基脲(Semicarbazide,SEM)、1-氨基-2-内酰脲(1-Aminohydantoin,AHD)残留量的分析方法。样品以0.2 mol·L^(-1)盐酸水为提取剂,加入2-硝基苯甲醛为衍生剂,37℃水浴振荡4 h,调节pH值为7.4±0.2,HLB固相萃取柱净化,氮气吹干,用0.1%甲酸(含有50%甲醇)水溶液复溶,采用0.1%甲酸水-10 mmol·L^(-1)乙酸铵和甲醇为流动相梯度洗脱,经C_(18)柱分离,电喷雾正离子模式扫描,多反应监测模式,内标法定量。结果表明,4种硝基呋喃药物线性良好,相关系数(R^(2))均大于0.999,动物源食品中AOZ、AMOZ、SEM、AHD的检出限均为0.2μg·kg^(-1),定量限为0.4μg·kg^(-1)。低、中、高浓度加标水平下,4种化合物在畜肉产品中的回收率为87.42%~102.26%,相对标准偏差为0.80%~5.93%;在禽肉产品中的回收率为89.76%~104.94%,相对标准偏差为0.62%~5.83%;在禽蛋产品中的回收率为90.30%~106.82%,相对标准偏差为0.85%~7.93%;在水产品中的回收率为86.95%~107.36%,相对标准偏差为0.20%~5.02%。该方法灵敏度高、重复性好,可为实验室大批量检测动物源食品中硝基呋喃类药物提供技术参考。

水产品中硝基呋喃类代谢物检测能力验证与质量控制

新疆维吾尔自治区水产科学研究所实验室多年参加农业农村部组织的水产品中硝基呋喃类代谢物检验检测能力验证。在多年的实验过程中,该实验室从人员、仪器、标准物质、方法和设施环境等方面着手,进行检验质量控制,抓好实验准备、实施实验、结果报送等关键环节,参加的能力验证考核检测结果均合格。结果表明,该实验室在水产品中硝基呋喃类代谢物残留检测能力验证实验过程中,质控有效,检测能力较好。

草鱼中兽药残留硝基呋喃代谢物检测的研究

本研究创建了液质联用检测方法,检测了草鱼中呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林4种硝基呋喃代谢物。结果显示,该检测方法准确度较高、简单、可靠,能满足草鱼中不科学应用硝基呋喃类药物的检测监控要求。

硝基呋喃类药物及其代谢物检测方法的研究进展

本文介绍了硝基呋喃类药物种类、理化性质及其危害,总结了胶体金免疫、酶联免疫、高效液相色谱和液相色谱串联质谱等目前检测硝基呋喃类药物及其代谢物残留的常用方法研究进展,并对该类药物检测方法的应用提出了相关建议。

高效液相色谱-串联质谱联用测定蜂王浆中的四种硝基呋喃类药物的代谢物

报道了高效液相色谱-串联质谱联用测定蜂王浆中呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮4种硝基呋喃类药物的代谢物残留的方法。以三氯乙酸作为蜂王浆的蛋白质沉淀剂，同时提供衍生化反应所需的酸性环境；使用4种同位素内标，补偿了衍生化效率、衍生后样品溶液的pH值及光照对定量结果所产生的影响，极大地提高了定量的准确性。实验结果表明，呋喃它酮代谢物的检测下限可以达到0．03μg／kg，其他3种硝基呋喃类药物的代谢物的检测下限可以达到0．05μg／kg（S／N大于5）；呋喃它酮代谢物的定量下限可以达到0．20μg／kg，其他3种硝基呋喃类药物的代谢物的定量下限可以达到0．25μg／kg（S／N大于10）；线性范围为0．4～20ng／mL，添加回收率为97．7％～104．8％（内标校正），相对标准偏差（RSD）为2．7％～9．7％。

基于信息熵理论的超高效液相色谱-串联质谱法测定淡水鱼肉中4种硝基呋喃类代谢物的残留量

基于信息熵理论,以5-吗啉甲基-3-氨基-2-口恶唑烷基酮(AMOZ)、3-氨基-2-口恶唑烷基酮(AOZ)、1-氨基-2-乙内酰(AHD)和氨基脲(SEM)等4种硝基呋喃类代谢物回收率综合评分M为评价指标,采用单因素和响应面试验优化了淡水鱼中硝基呋喃类代谢物残留检测的衍生条件。淡水鱼样品用盐酸溶液水解后加入适量内标溶液,用350μL 0.05 mol·L^(-1)邻硝基苯甲醛(衍生试剂)溶液(介质为甲醇)于46℃避光振荡衍生2.5 h。将所得溶液酸度调节至pH 7.4±0.2,用乙酸乙酯提取2次。收集提取液,氮吹至干,加入正己烷用于除杂,50%(体积分数)乙腈溶液用于复溶残渣,离心,取下层相过滤,滤液用超高效液相色谱-串联质谱法分析。在色谱分析中,以Agilent Zorbax RRHD Eclipse Plus C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)分离,体积比1∶1的0.1%(体积分数)甲酸溶液和乙腈的混合溶液等度洗脱。在质谱分析中,以大气压电喷雾离子源电离,多反应监测(MRM)模式检测。在定量分析时,以基质匹配法以及内标法降低基质干扰和提高方法的灵敏度。结果显示:因素衍生试剂体积、衍生温度和衍生时间以及交互因素衍生试剂体积与衍生温度对回收率综合评分M的影响极显著(p<0.01),最优衍生条件下二次多项式模型的预测值(M预测=1.0204)和试验值(M试验=0.9992)基本一致;4种硝基呋喃类代谢物工作曲线的线性范围均为0.02~50.00μg·L^(-1),检出限(3S/N)为0.02~0.19μg·kg-1。按照标准加入法进行回收试验,回收率为85.1%~116%,测定值的相对标准偏差(n=5)为0.64%~9.8%。方法用于55批实际样品的分析,AOZ、AMOZ和SEM检出率分别为1.82%,1.82%和3.64%,其中AOZ和AMOZ的最高检出量分别为0.24,0.13μg·kg-1,SEM的检出量在测定下限以下。

液相色谱-串联质谱法检测水产品中残留的硝基呋喃类药物的代谢物

建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法用于同时测定水产品中硝基呋喃类药物的代谢物3-氨基-2-唑烷基酮(AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)、1-氨基-2-内酰脲(AHD)和3,5-二硝基水杨酸肼(DNSH)。样品经盐酸水解、2-硝基苯甲醛衍生、乙酸乙酯提取净化。氮吹至干后,用1 mL乙腈-0.1%甲酸水(20∶80,v/v)定容。经Aquasil C18色谱柱分离,用液相色谱-三重四极杆串联质谱以多反应监测模式(MRM)进行检测分析,内标法定量。结果表明,该方法的线性范围为0.5～10μg/kg,5种代谢物的线性相关系数均不小于0.997 6,定量限为0.5μg/kg。在0.5、1.0、2.0和4.0μg/kg的添加水平下,加标回收率为81.3%～100.5%,RSD为3.4%～10.0%。本法可作为水产品中5种硝基呋喃类药物的代谢物残留量同时分析的有效手段。

食品中硝基呋喃类药物及其代谢物残留检测的研究进展

硝基呋喃类药物是一类人工合成的广谱抗菌药物,主要包括呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林等。因其价格相对低廉,曾大量应用于家禽、家畜和水产品动物的细菌性疾病的预防和治疗。原药在动物体内代谢速度快,半衰期短,其代谢物与蛋白组织结合紧密,残留时间长。研究发现原药及代谢物对人体有潜在的致癌致畸等作用,世界各国在动物源性食品生产过程中已全面禁止此类药物的使用,并规定了检测标准,但动物养殖者们违法使用硝基呋喃类药物的现象仍有发生。硝基呋喃类药物的检测方法繁多,主要有色谱分析法、免疫学方法等,各类方法均有其优点与局限性。本文综述了近年来对食品中硝基呋喃类药物及代谢物的残留检测方法,并对硝基呋喃类代谢物残留的检测方法的趋势进行展望。

硝基呋喃类药物及其代谢产物残留检测技术研究进展

介绍了硝基呋喃类抗生素原药及代谢产物的相关性质,详细阐述了其在食源性动物组织中残留的各类检测技术的原理、特点及研究进展,旨在促进硝基呋喃类药物及其代谢产物常规检测技术的发展。

动物性食品中硝基呋喃类药物及其代谢物残留检测技术的研究进展

硝基呋喃类药物及其代谢产物因具有强毒性和致癌等副作用,引起了国际社会的高度重视。本文综述了硝基呋喃类药物及其代谢物的种类及其危害,对该类药物及其代谢物的检测方法的最新研究进展进行了归纳和总结,分析了硝基呋喃类药物及其代谢物残留的检测方法优缺点,并对该类药物的代谢产物检测方法进行了展望。

酰腙键聚合物凝胶的制备及其在硝基呋喃类药物分析中的应用

以1,3,5-苯三甲酰肼和间苯二甲醛为有机单体,利用席夫碱反应原理和酰腙共价键为交联点,通过一步交联聚合法研制了一种新型酰腙键聚合物凝胶。采用扫描电子显微镜、红外光谱、固体核磁和热重分析对所制备的聚合物凝胶进行结构和形貌表征,结果表明材料具有良好的物化性能。将其作为固相萃取吸附剂,结合高效液相色谱-二极管阵列检测器检测,建立了饲料中4种硝基呋喃类药物的分析方法。通过单因素实验,系统考察了吸附剂用量、上样体积、洗脱溶剂和洗脱体积对方法回收率的影响。在最优实验条件下,呋喃它酮(FTD)、呋喃西林(NFZ)、呋喃妥因(NFT)和呋喃唑酮(FZD)在1.0~200μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.9990,方法的检出限以信噪比(S/N=3)计算为0.1~0.5μg/L,定量限(S/N=10)为1.0~5.0μg/L,在3个浓度水平(10、50和100μg/L)加标下样品的回收率在78.5%~96.8%之间,相对标准偏差(RSD)为2.1%~9.3%。该方法的检出限低、灵敏高,可用于饲料样品中硝基呋喃类药物的灵敏准确分析。

液相色谱-串联质谱法测定鳗鱼肉中硝基呋喃类药物代谢物残留量不确定度分析

对液相色谱-串联质谱法测定鳗鱼肉中硝基呋喃类药物代谢物残留的不确定度进行分析,找出影响不确定度的因素,给出不确定度。应用测量不确定度理论,分析评估液相色谱-串联质谱法测定鳗鱼肉中硝基呋喃类药物代谢物残留的不确定度,得出鳗鱼肉中硝基呋喃类药物代谢物残留扩展不确度:U=1.8μg/kg(k=2)。