泡菜中具有亚硝酸盐降解功能益生菌的筛选研究

从泡菜中筛选出5株菌株,对其做生理生化、亚硝酸钠降解、耐胆盐性、抑菌性、抗氧化性实验。经初步判定所筛选菌株均为乳杆菌属(Lactobacillus),都具有亚硝酸盐降解性,其中N2菌株降解性最好,其降解率在72h达到85.12%,N2耐酸能力也最强,且对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌具有较强的抑制作用,对DPPH自由基清除率达到33.88%,可将其作为发酵剂,为益生菌功能食品开发提供基础。

腌渍食品亚硝酸盐降解菌的分离、鉴定及其降解特性

从腌渍豆酱、香肠、腌渍萝卜中分离到5株乳酸菌,根据形态和生理生化特征等对分离到的菌株进行初步鉴定,并研究了分离菌株的生理学性质和降解特性.初步鉴定表明,L1,L3,L4和L5菌株为明串珠菌,L2菌株为链球菌.L2菌株最适生长温度为30℃,L1,L3,L4和L5菌株最适生长温度为25℃,5个菌株的最适生长pH值均为6.5,在4%～6%NaC l溶液中均能正常生长繁殖.L2菌株在30℃时对亚硝酸钠的降解率最高,其他菌株在25℃时最高;5个菌株均在pH=3.5时对亚硝酸钠的降解率最高.在适宜pH值和培养温度下,L3和L5菌株对亚硝酸钠的降解率超过93%,具有较大的应用价值.

亚硝酸盐降解菌N419的培养基优化

为了规模化生产和实际应用亚硝酸盐降解菌N-419,对其发酵培养基进行了优化,选出由单因素试验确定的营养物质(玉米淀粉、工业蛋白胨)以及Ca Cl2和Mn SO4,进行4因素3水平的正交试验。结果表明:N-419菌株的最佳培养基配方为玉米淀粉20 g/L、工业蛋白胨10 g/L、Ca Cl20.3 g/L、Mn SO40.2 g/L、K2HPO4 0.12 g/L、KH2PO4 0.25 g/L,其芽孢数可达1.44×1010 CFU/m L。

耐高温亚硝酸盐降解菌的分离、鉴定及降低雪茄烟叶亚硝胺的应用

【背景】烟草特有亚硝胺(tobacco-specific nitrosamines,TSNAs)是烟草于调制和发酵阶段产生的一类致癌物质,由烟草生物碱与氮氧化物发生亚硝化反应生成,生物碱和亚硝酸盐是TSNAs的直接前体物质。【目的】发掘适用雪茄高温发酵且显著降低TSNAs形成与积累的微生物。【方法】以TSNAs前体物质亚硝酸盐的高效降解为目标,对从雪茄烟叶分离得到的烟草源微生物菌株进行高温培养、亚硝酸盐降解及亚硝酸盐耐受能力研究,得到可于50℃高效降解亚硝酸盐及耐受高浓度亚硝酸盐的微生物菌株,将菌株应用于雪茄烟叶高温发酵35 d,对发酵前后亚硝酸盐、TSNAs、常规化学成分和中性香味成分含量进行测定,分析菌株在雪茄烟叶发酵中对TSNAs含量及烟叶品质的影响。【结果】获得了3株于50℃高效降解亚硝酸盐的菌株NY7、NY8和NY9,分别鉴定为莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)NY7、耐盐芽孢杆菌(Bacillus halotolerans)NY8和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)NY9,其中B.halotolerans NY8亚硝酸盐降解能力最为显著。添加了菌株NY8的雪茄烟叶发酵过程中亚硝酸盐和TSNAs含量均显著降低,亚硝酸盐含量减少96.86%,TSNAs总量减少67.14%,烟碱的下降幅度明显高于空白组。中性香味成分总量(除新植二烯外)略有升高。【结论】该菌株适用于雪茄烟叶高温发酵,并高效降解亚硝酸盐,有效减少TSNAs的形成和积累,对雪茄烟叶减害具有重要的科学价值和应用潜力。

贵州酸肉中具有高亚硝酸盐降解和耐受能力乳酸菌的筛选与鉴定

从贵州自然发酵的酸肉中分离出19株乳酸菌,选择在MRS培养基中培养24 h的降亚硝酸盐能力最强的3株乳酸菌,经16S r DNA分子鉴定为植物乳杆菌CMRC 3、戊糖片球菌CMRC 7和植物乳杆菌CMRC 19。在模拟肉类发酵的条件下,研究其降解、耐受亚硝酸盐和硝酸盐的能力。3株乳酸菌都具有较好的亚硝酸盐降解能力,发酵120 h后分别降解了65.7%~86.3%的亚硝酸盐;然而它们的硝酸盐降解能力都不显著。CMRC 7和CMRC 19耐受亚硝酸盐的性能最强,最高活菌数分别为8.20lg(CFU/m L)和8.11lg(CFU/m L);这3株菌都具有较好的硝酸盐耐受性,最高活菌数分别为8.21,7.93lg(CFU/m L)和8.20lg(CFU/m L)。试验结果表明,从酸肉中筛选出的这3株乳酸菌都有较强的亚硝酸盐降解能力,同时也有较好的硝酸盐和亚硝酸盐耐受性能,可开发成肉类专用发酵剂。

三江镇腌菜中降解亚硝酸盐乳酸菌的筛选和初步鉴定

为筛选具有较强降解亚硝酸盐能力的乳酸菌,本实验经过初筛和复筛从三江镇雪里蕻腌菜中筛选出降解亚硝酸盐能力相对较强的乳酸菌菌株。筛选结果显示菌株对亚硝酸盐最强降解能力达到68h平均降解量32.66μg/mL。采用十六烷基三甲基溴化铵法(CTAB)法提取降解亚硝酸盐能力最强的乳酸菌11号菌株的基因组,测序后进行Blast同源性比较,其与Lactobacillus fermentum strain PL9005的同源性达到98%,并选取同源性较高的菌株构建系统发育进化树,初步鉴定该菌株为Lactobacillus fermentum。

植物乳杆菌SD-7的分离鉴定及其亚硝酸盐降解特性

从江苏南京农家自制的酸豆角中分离到1株具有强降解亚硝酸盐能力的乳酸菌,命名为SD-7,经形态观察、生理生化和16 S r DNA遗传学分析,把该菌株鉴定为植物乳杆菌。对该菌株的生长和降解亚硝酸盐的特性的研究表明,该菌株在30℃条件下18 h即可达到稳定期,产酸能力较强,稳定期的p H值为3.58。在30℃条件下培养24 h和48 h,亚硝酸盐的降解率分别为85.96%和91.64%。SD-7具有较好的耐盐能力,当氯化钠含量低于6%时对该菌的生长和降解亚硝酸盐能力影响不大。SD-7的耐酸能力较强,在p H 4,30℃条件下培养24 h和48 h,菌株的OD600仍达到1.58和1.88,此时亚硝酸盐降解率为58.56%和64.56%。

传统发酵樱菜中降解亚硝酸盐肠膜明串珠菌的分离鉴定及特性分析

从具有民族特色的延边朝鲜族地区采集24份传统发酵樱菜,从中分离筛选具有降解亚硝酸盐功能的菌株,通过形态观察、生理生化试验和16S rRNA序列分析进行鉴定,并对其生长特性、产酸特性、耐盐及耐酸碱特性进行研究。结果表明,从24份传统发酵樱菜中分离鉴定出1株具有降解亚硝酸盐功能的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)JNZB003,菌株JNZB003对150μg/mL亚硝酸盐24 h时的降解率为95.92%,其最适生长温度为30℃,最适生长pH值为6.0,培养14 h生长进入稳定期,培养12 h pH值降至4.60,当NaCl含量为8%和pH值为3.0~10.0时能够生长,具有良好的降解亚硝酸盐能力、生长特性、产酸能力,且耐盐和耐酸碱。

自然发酵蔬菜制品中降解亚硝酸盐乳酸菌的分离与鉴定

以自然发酵蔬菜为原料,采用平板计数和钙溶圈法分离纯化菌株,并分析菌株的亚硝酸盐降解能力。结果表明,钙溶圈法分离的产酸能力较强的9株细菌,经生理生化鉴定均为乳酸菌。乳酸菌在MRS培养基中都具有亚硝酸盐分解能力,其中H12、L7和X1三株乳酸菌亚硝酸盐降解率高于89%,且降解速度较快,其中X1降解亚硝酸活性最强。乳酸菌X1还表现良好的产酸能力和耐盐性,经16S r DNA鉴定为植物乳杆菌(Lactobcillus plantarum)。

两株养殖污泥中亚硝酸盐降解菌的筛选及其降解条件

为了解决水产养殖中亚硝酸盐污染问题,从养殖水体污泥中筛选出优良亚硝酸盐降解菌,并对其降解条件进行初步研究。从水产养殖水体污泥中分离亚硝酸盐降解菌,进一步通过测定比较分离菌株对亚硝酸盐的降解率,筛选优良的亚硝酸盐降解菌,并采用单因子法研究其降解亚硝酸盐的条件。从水产养殖水体污泥中筛选了两株优良的亚硝酸盐降解菌NY-2和NB-8,NY-2对50 mg/L亚硝酸盐的降解率高达92.29%;NB-8对50 mg/L亚硝酸盐的降解率高达89.47%。菌株NY-2和NB-8在初始p H为7~9时,对亚硝酸盐降解的降解率均较大,最佳碳源为丁二酸钠,而且随着亚硝酸盐浓度的不断增大,菌株NY-2和NB-8对亚硝酸盐的降解率都逐渐降低,菌株在混合情况下对亚硝酸盐的降解率可达98.87%。菌株NY-2和NB-8在混合情况下具有明显的降解亚硝酸盐的能力。

降解亚硝酸盐肠膜明串珠菌的^(60)Co γ射线诱变选育

[目的]选育亚硝酸盐降解能力增强的肠膜明串珠菌并探讨其降解机理。[方法]通过60Coγ射线和出发菌的代谢特性筛选肠膜明串珠菌突变株,分析突变株的生长特性及亚硝酸盐还原酶活力变化,探讨其降解机理。[结果]剂量为800 Gy的60Coγ射线处理后获得1株遗传稳定好的肠膜明串珠菌突变株LM-S-3,它的亚硝酸盐降解率是出发菌的2.93倍;它的强降解亚硝酸盐能力可能与其耐酸性和高活性亚硝酸盐还原酶有关。[结论]60Coγ射线诱变选育的肠膜明串珠菌突变株具有较强的亚硝酸盐降解能力,可作为发酵剂辅助降解泡菜中的亚硝酸盐。

降解亚硝酸盐乳酸菌的筛选及其在菜用枸杞浆水发酵中的应用

该研究从甘肃天水、定西等地农家自制浆水中分离乳酸菌,通过形态观察、生理生化实验及分子生物学技术进行菌种鉴定后,应用盐酸萘乙二铵法测定菌株体外亚硝酸盐降解能力,筛选能高效降解亚硝酸盐的菌株,并将其应用于菜用枸杞浆水的发酵,通过感官指标、总酸、pH、有效成分和亚硝酸盐含量等指标综合评价菜用枸杞浆水的品质。结果表明,分离得到35株乳酸菌,经鉴定,29株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),3株为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei),3株为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)。通过复筛获得亚硝酸盐降解率>90%的5株乳酸菌进行菜用枸杞浆水发酵,菌株天水A14发酵的菜用枸杞浆水感官评分最高,为91.67分,亚硝酸盐含量为1.74 mg/kg,总酸含量为0.28%,p H值为3.69,菜用枸杞浆水中多糖和总黄酮含量分别较鲜样增加1.2 mg/g、0.13 mg/g,说明菌株天水A14既能高效降解亚硝酸盐又适用菜用枸杞浆水发酵,可作为生产低亚硝酸盐浆水的候选菌株。

常见乳酸菌降解亚硝酸盐机理探讨

该实验对Lactobacillus plantarum、Lactobacillus brevis、Lactobacillus rhamnosus的产酸特性、NO_2^-降解能力、16S r DNA序列及其亚硝酸盐还原酶(nitrite reductase,NiR)蛋白序列进行了研究与分析。结果表明,Lactobacillus brevis降解NO_2^-能力最强,可能是该菌有nir基因,在NO_2^-的诱导下产生NiR;该菌产酸量较低,较少的H^+和NiR降解NO_2^-生成的氨类物质,使发酵环境一直处于NiR最适作用p H值(5.0～6.0),从而使NO_2^-大量被NiR分解。Lactobacillus plantarum与Lactobacillus brevis亲缘关系较近,当环境p H值>4.5时,它主要在NiR作用下分解NO_2^-;但Lactobacillus plantarum产酸能力较强,能快速使环境p H值<4.0,从而迅速进入NO_2^-被H^+降解阶段。Lactobacillus rhamnosus与Lactobacillus brevis和Lactobacillus plantarum亲缘关系较远,没有找到nir基因,但Lactobacillus rhamnosus产酸能力较强,其降解NO_2^-机理可能主要是酸降解。

陕西泡菜中降解亚硝酸盐乳酸菌的筛选及其发酵特性与耐受性研究

为从泡菜中筛选出具有较强亚硝酸盐降解能力且能应用于泡菜发酵的乳酸菌,从陕西家庭自制泡菜中筛选出了1株菌PC5。菌株PC5通过生化鉴定和16S rDNA测序鉴定为植物乳杆菌。对菌株PC5的发酵特性进行研究,结果显示菌株PC5发酵24 h后,发酵液pH值为3.73±0.01,滴定总酸为(1.99±0.01)%。菌株PC5在含有150 mg/L NaNO 2的培养基中培养24 h,亚硝酸盐降解率可达到(99.37±0.56)%。对菌株PC5的耐受性进行研究,结果表明菌株PC5对ρ(NaNO_(2))≤200 mg/L和ρ(NaCl)≤60 g/L有较强的耐受性。菌株PC5具有较好的发酵特性和耐受性,可作为泡菜接种发酵菌株。

川西高原发酵牦牛乳中降解亚硝酸盐乳酸菌的筛选与耐受性研究

以川西高原发酵牦牛乳中分离出的195株乳酸菌为研究对象,采用比色法测定其亚硝酸盐降解能力,从中筛选出亚硝酸盐降解能力极强的菌株。将这些优势菌株分别在人工胃液、人工肠液、胆盐和高盐4个模拟人工胃肠道消化环境中进行培养,测其耐受力。结果表明:这195株乳酸菌亚硝酸盐降解率范围为35.79%~96.51%,其中降解率在80%~90%的菌株占54.87%,仅有1.54%的菌株亚硝酸盐降解率在50%以下,有3株亚硝酸盐降解能力极强的菌株(降解率大于95%)。这3株菌在人工胃液中的活菌数随培养时间的延长而减少,培养3 h后,菌株5、26、150在pH5.5时的活菌数分别为3.7、3.6、4.1×10^8 CFU/mL;在人工肠液中培养4 h后,菌株5、26、150的活菌数分别为4.3、6.8、5.3×10^8 CFU/mL;在不同胆盐梯度的培养基中培养24 h后,3株菌的活菌数随胆盐浓度增大而减少,且均保持在10^8 CFU/mL以上;在高盐环境中培养24 h后的活菌数随盐质量浓度的增加而降低,活菌数均在108 CFU/mL以上。结论:川西高原发酵牦牛乳中分离出的195株乳酸菌降解亚硝酸盐的能力存在较大差异,其中降解亚硝酸盐能力极强的菌株对体外模拟消化环境具有较好的耐受力,为其在医药,食品和生物领域的应用提供了理论依据。

一株基于高通量测序降解亚硝酸盐芽孢杆菌的筛选

目前对降解亚硝酸盐菌种研究最多的为乳酸菌,造成在亚硝酸盐降解方面菌种的研究力度不高。为挖掘降解亚硝酸盐菌种的物种丰度及利用度,利用高通量测序技术对具有降解亚硝酸盐能力的两个菌群进行分析。结果展现了两个菌群的微生物多样性、KEGG代谢途径及COG功能。在属等级上,菌群FXH1包括10个属,BFXH2包括8个属。在BFXH2中,芽孢杆菌属(Bacillus)所占相对丰度最大,为56.4%,从中选取编号为“8”的菌株进行NCBI比对鉴定,为芽孢杆菌属(Bacillus)。鉴定结果与高通量测序结果一致,同时测定该菌对亚硝酸盐的降解率为99.7%。该种筛选策略不仅可以大大提高对亚硝酸盐降解菌种资源的利用,减少目的菌种的鉴定时间,而且还可进一步了解其应用前景,大大提高了选菌及鉴定的效率。

一种筛选高效降解亚硝酸盐海洋低温细菌的方法

从海洋中筛选高效降解亚硝酸盐的低温细菌,以降低食品及环境中亚硝酸盐存在的潜在危害。利用降解亚硝酸盐菌株的产酸、氧化或还原特性,分别使用含有0.01%亚甲基蓝(蓝板)和1% CaCO_(3)(白板)的两种鉴别培养基,对海洋样品进行筛选分离,共得到30株菌,均具有降解亚硝酸盐能力,降解率在91%~99.7%之间;其中菌株“8”对亚硝酸盐降解率高达99.7%,作用环境pH为3.98,经16S rDNA基因序列比对和系统发育树分析鉴定为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus.)。本实验首次使用含亚甲基蓝成分的培养基作为氧化或还原反应降解亚硝酸盐菌的筛选培养基,筛选效率高;而含CaCO_(3)的培养基可作为以产酸性物质降解亚硝酸盐菌的筛选培养基。试验所采用的策略,降低了筛选成本和时间,大大提高了效率,且筛选得到的细菌对亚硝酸盐具有高降解率,有极大的应用潜力。

一株亚硝酸盐降解真菌Aspergillus parasiticus JFS的筛选及鉴定

【目的】筛选可降解亚硝酸盐的菌株。【方法】利用亚硝酸盐选择培养基从水样、土样、朽木等20多个样品中筛选目的菌株。利用盐酸萘乙二胺法检测目的菌株在亚硝酸盐液体培养基中降解亚硝酸盐的能力,利用镉柱还原法和试纸法鉴定亚硝酸盐被目的菌株代谢后的产物;利用菌落形态、菌丝及分生孢子形态、ITS DNA序列、β-Tubulin gene序列及Calmodulin gene序列分析等鉴定目的菌株。【结果】得到一株可强烈降解亚硝酸盐的真菌菌株JFS,其能在亚硝酸盐浓度高达20.0 g/L的液体培养基中很好的生长,菌株JFS将亚硝酸盐降解为无毒的硝酸盐和铵根离子。结合形态学、对培养基的要求及上述3个基因序列的进化树分析,该菌株属于寄生曲霉菌(Aspergillus parasiticus)。【结论】菌株JFS具有强烈的降解亚硝酸盐的能力。

鼠李糖乳杆菌降解亚硝酸盐影响因素研究

该试验研究鼠李糖乳杆菌降解亚硝酸盐的影响因素。研究发现，鼠李糖乳杆菌降解亚硝酸盐的最适pH值是5．0-6．0，最适温度是40℃；培养基中碳源、氮源、酵母膏、金属离子成分分别为2％葡萄糖、0．5％大豆蛋白胨、0．4％酵母膏；添加Fe^2＋、Fe^3＋、Cu^2＋的亚硝酸盐降解效果明显；最适接种量3％；最适培养方式为动态培养。