外源硝酸还原酶(NR)抑制剂对油菜植株内NR活性的影响及其与硝酸盐含量的关系

为进一步揭示硝酸还原酶(nitrate reductase,NR)活性的调控机制及其与植株体内硝酸盐含量的关系。本试验在正常供氮(15 mmol L^(–1)NO_3~–)和缺氮(7.5 mmol L^(–1)NO_3~–)条件下,以氮高效(H1:742和H2:Xiangyou 15)和氮低效(L1:814和L2:H8)油菜基因型为研究材料,通过NR活性的专性抑制剂处理,研究NR活性和硝酸盐含量的基因型和氮水平差异。结果表明,NR专性抑制剂处理可以显著降低叶片NR活性,正常供氮和缺氮条件下分别降低53.0%和57.6%,但对叶片硝酸盐的含量没有显著影响。正常供氮条件下的NR活性和硝酸盐含量比缺氮条件下分别高46.9%和16.4%。氮高效油菜基因型的硝酸盐含量显著低于氮低效基因型。H2的NR活性(NRA_(act))显著高于氮低效基因型的本质原因是其主效基因(nia2)的相对表达量高于氮低效基因型。本研究充分表明NR活性和硝酸盐含量存在明显的基因型和氮水平差异,一定程度的NR活性变化对植株体内硝酸盐的含量并没有显著的影响。

农杆菌介导法将硝酸还原酶基因转入大白菜的研究

[目的]建立大白菜的硝酸还原酶基因(NR)转化体系。[方法]以大白菜北京小杂60为材料,通过农杆菌LBA4404介导,将硝酸还原酶基因(NR)转入大白菜,对获得的转NR基因苗进行PCR检测、Southern杂交检测以及硝酸盐含量测定。[结果]试验初步建立了一套大白菜的转化体系,即以预培养2d苗龄4d的大白菜不带柄半子叶为外植体,在OD600nm值约为0.6的农杆菌工程菌液中浸染8min,然后在pH值为5.8且不加抗生素的分化培养基中将子叶与菌共培养2d,其后经过诱导、抗生素筛选、生根生长等过程,获得抗性植株,转化频率为6.48%。对抗性植株采用分级筛选,获得8株转NR基因苗。[结论]试验证实,NR基因已整合进大白菜的基因组中并得到表达,植株体内的硝酸盐含量均低于对照。

桃树硝酸还原酶体内测定法的条件选择与稳定性研究

本文研究了桃树硝酸还原酶（ＮＲ）体内测定的最佳条件．试验结果表明。以含１００ｍｍｏｌ／ＬＫＮＯ：的磷酸缓冲液（０．１ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ７. ５，含３％异丙醇）作为反应液（其它条件均同），可明显提高ＮＲ活力。

萝卜硝酸还原酶基因的克隆与表达分析

[目的]为揭示萝卜（Raphanus sativus L.）硝酸还原酶基因（RsNR）的分子特征,降低硝酸盐含量,对萝卜RsNR基因进行分离与表达特性研究。[方法]基于本实验室转录组测序所得unigene序列分离RsNR基因cDNA,利用生物信息学方法进行序列分析,采用RT-qPCR方法对不同浓度KNO3（0、5、20、30和50mmol·L^-1）和不同时间（0、4、8、12和24h）处理的萝卜中RsNR基因表达进行检测,并测定硝酸盐含量和硝酸还原酶活性（NRA）。[结果]获得萝卜RsNR基因cDNA序列（GenBank登录号：KM272859）,开放阅读框为2742bp,编码913个氨基酸,RsNR与油菜NR基因（D38219）氨基酸序列相似性为95%。在30mmol·L^-1NO3^--N诱导下,萝卜叶片和根中RsNR基因表达量最高。在30mmol·L^-1NO3^--N诱导初期,叶片和根中RsNR表达量4h达到最大值,随后呈下降趋势;随着硝酸盐处理浓度升高,NRA、硝酸盐含量和RsNR基因表达量均呈先升后降趋势,0～4h内叶片和根中三者均上升,4～24h内NRA和RsNR基因表达下降,而硝酸盐含量呈上升趋势。[结论]NO3^--N可能在转录水平上调控萝卜RsNR基因表达,进而影响其硝酸盐含量和NRA。

有机无机肥配施及供氮水平对萝卜硝酸盐累积的影响

以萝卜为试材,分别进行了不同有机无机肥料配施及不同供氮水平对萝卜硝酸盐含量和硝酸还原酶活性(NR)的影响研究,试验结果表明,不同有机无机肥料配施下,追肥一周后随萝卜肉质根膨大硝酸盐含量呈上升趋势,而NR活性逐渐下降。与不施肥处理相比,不同有机无机肥料配施下萝卜产品器官中硝酸盐、VC、可溶性糖和可溶性蛋白含量显著提高,其中有机肥、化肥分别作基肥和追肥的处理("有+化")具有较低的硝酸盐含量。不同施氮水平下,追肥后随萝卜肉质根的膨大硝酸盐含量呈上升趋势,而NR活性先上升后下降。与不施肥处理相比,萝卜产品器官中硝酸盐、可溶性蛋白含量随施氮量的增加而显著升高,VC和可溶性总糖含量则在常量氮肥处理下达到最大。

烤烟和白肋烟烟苗氮代谢的差异分析

为明确不同烟草类型、品种的氮素利用特点,并揭示造成氮素利用效率差异的原因,以不同氮效率烤烟品种红花大金元和白肋烟品种TN86为材料,采用苗期漂浮育苗培养法,研究了不同类型品种烟苗叶片的氮代谢关键酶活性、色素含量(质量分数)、氮素积累和生物量。结果显示,烤烟品种红花大金元烟苗的生物量较高,叶片谷氨酰胺合成酶(GS)活性高,氮代谢同化能力强,同时烟苗叶片色素含量高,能够为烟苗的氮代谢提供充足的能量,烟苗氮素积累量大,氮素利用效率高;白肋烟品种TN86烟苗的生物量较低,叶片硝酸还原酶(NR)活性强,但GS活性弱,色素含量低,氮还原能力较强但同化能力弱,叶片总氮含量高而氮素积累量低,氮素利用效率较低。相关分析结果表明,叶片GS活性、NR活性和色素含量与烟苗氮素积累和利用效率关系密切,其中GS活性和叶绿素含量与烟苗氮素积累和利用效率的相关性最强。因此,提高烟草叶片色素含量水平和增强氮素同化能力可作为栽培技术改进和品种遗传改良的方向。

水分胁迫下肥料配比对葡萄光合速率与氮代谢的影响

以无核白鸡心葡萄为试材，设置3个水平的水分处理和3个肥料配比，研究水分胁迫下肥料配比对无核白鸡心葡萄叶片叶面积、叶绿素含量、光合速率及氮代谢相关酶活性的影响。结果表明：萌芽期和坐果期土壤水分含量为田间持水量的55％～60％、施肥配比为N∶P∶K＝2∶5∶3的水肥处理能有效促进叶面积增加，提高光合速率，是较好的水肥处理组合；转色期和采收后需维持正常含水量和适当增施钾肥可提高光合速率；土壤水分含量为田间持水量的55％～60％、施肥配比为N∶P∶K＝2∶5∶3的水肥处理无核白鸡心葡萄硝酸还原酶活性较高，能有效促进氮肥的吸收利用；水分胁迫处理使谷氨酰胺合成酶活性先升高后降低，且使谷丙转氨酶活性升高。在生长期中轻度水分胁迫、适当增施钾肥能明显提高硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶与谷丙转氨酶活性，提高氮肥的转化利用。

氮磷钾施用对附子几种氮代谢酶活性的影响

运用三因素二次回归正交组合设计,试验研究了氮、磷、钾三因素对中药附子(乌头)的过氧化物酶(POD)、硝酸还原酶(NR),谷草转氨酶(ALT/GOT)和谷丙转氨酶(AST/GPT)活性的影响效应。结果表明:N、P施用量对附子NR、GOT、GPT均有显著的影响,除较大施用量条件下对GOT活性的施P效应>施N效应外,其余情况下对三种酶均为N效应>施K效应;施K除对NR活性有明显效应外,对GOT和GPT没有明显影响;N、P、K施用对POD活性无明显效应。单施N对GOT、NR和单施P对NR均为正效应,随施用量增加酶活性升高;单施P对GOT、GPT和单施N对GPT在施用量低于零水平时,随施用量的增加酶活性升高,超过零水平后随施用量的增加酶活性下降;单施K时,对NR活性则是在零水平时最低,低钾和高钾时NR活性均较高。对几种酶的效应中,仅对GOT存在施N与施P之间的互作效应,随着N施用量增加施P对GOT活性的增加效应更明显。

烤烟新品种渠首1号对低氮胁迫的响应

烤烟新品种渠首1号是云烟87的自然变异株,以云烟87为对照,采用霍格兰(Hoagland)营养液培养的方法,设置正常供氮和低氮2种条件处理水平,通过试验分析低氮胁迫对渠首1号和对照品种云烟87的影响。研究发现,低氮胁迫下渠首1号的农艺性状及生物量积累均明显高于对照品种云烟87;光合参数稳定性优于对照品种云烟87,受胁迫较云烟87轻;硝酸还原酶(NR)活性强于对照品种云烟87;根系形态指标优于对照品种云烟87,根系活力受胁迫程度较云烟87弱。即渠首1号比云烟87具有更强的耐低氮、耐瘠薄潜力,在其生产中可以减少氮肥用量,为渠首1号种植栽培技术和推广适宜区域提供一定的理论依据。

大豆氮代谢酶作用机理及锰水平对其影响研究进展

锰是植物生长所必需的微量元素,对作物的生长发育、产量和品质都有明显影响,其在植物氮代谢中所起的关键作用是产生这些影响的生理学原因之一。前人对这一领域的研究有些获得了长足进展,但也存在诸多空白。本文对锰对大豆氮代谢过程中主要相关酶(硝酸还原酶NR、谷氨酰胺合成酶GS、谷氨酸脱氢酶GDH)的作用机理及锰水平对其活性影响的最新研究进展进行了综述。

氮用量对蛟河晒红烟碳氮代谢关键酶活性及品质的影响

为解决蛟河烟区晒红烟氮用量不合理导致的烟叶碳氮代谢失调、烟叶品质下降等问题,以晒红烟品种漂河1号为材料,研究了不同氮用量对蛟河晒红烟碳氮代谢关键酶活性及化学成分的影响。结果表明,增施氮肥能提高烟叶硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)和蔗糖转化酶(INV)活性及叶绿素和类胡萝卜素含量。随施氮量的增加,调制后的烟叶烟碱和总氮含量升高,糖含量下降;烟叶钾含量、香气质、香气量以及感官质量分值以施氮量为75.0~97.5kg/hm^2的处理最高。综合两年田间试验结果,在吉林蛟河较高肥力的暗棕壤上种植晒红烟,适宜的氮用量为75.0~97.5kg/hm^2。