分光光度法测定硫柳汞酊中硫柳汞的含量

本文建立了测定硫柳汞酊中硫柳汞含量的紫外分光光度法，其线性范围确定为２０～１００μｇ／ｍｌ（ｎ＝４），吸收度（ｙ）对浓度（ｘ）的回归方程为ｙ＝０．０１５７＋０．００５８２５ｘ，相关系数ｒ＝０．９９９９，平均回收率为１０１．２２±０．２５％（ｎ＝５）。该法简便，快速。

LC-AFS法对动物源性食品中硫柳汞残留量的测定

建立了动物源性食品中硫柳汞残留量的LC—AFS分析方法。样品经酸、碱提取液提取，液相色谱分离后，先与氧化剂混合，再与空气混合，通过紫外光照射，硫柳汞被氧化成无机汞，最后与还原剂和盐酸发生氢化反应，进入原子化器，进行原子荧光测定。对样品前处理条件、液相色谱条件、氧化剂和原子荧光工作条件进行了考察。在优化实验条件下，疏柳汞在0～20μg/L范围内线性关系良好，相关系数为0．9994，检出限为（S／N=3）0．4μg／L。5种样品在10．0、20．0、40．0μg／kg3个加标水平下的平均回收率为71％～83％，相对标准偏差（RSD）为1．6％～4．5％。该法适用于动物源性食品中疏柳汞残留量的测定。

冷原子吸收法检测硫柳汞含量

目的应用冷原子吸收法检测硫柳汞含量。方法将硫柳汞消化还原成汞蒸汽,经测汞仪检测。结果用该方法制备标准曲线具有很好的相关性,相关系数r(n=10)为0.9997±0.0002。样品重复检测10次,平均变异系数为1.03%,回收率为96.0%。与双硫腙滴定法检测结果进行比较,差异无显著意义。结论此法可作为硫柳汞含量检测的常规方法。

高效液相色谱测定疫苗中硫柳汞

建立了疫苗中硫柳汞含量的反相高效液相色谱测定方法。样品溶液经离心及膜过滤后直接进样分析,以甲-醇0.02 mol.L-1乙酸铵溶液(体积比30∶70)为流动相可有效地改善硫柳汞的峰形对称度,克服强酸性溶液体系下方法重现性差的不足。结果表明,该方法简便快捷、定量结果准确、重现性强,可用于疫苗生产和使用中的质量控制。

儿童剂量不含硫柳汞的流感病毒裂解疫苗的制备及其稳定性研究

目的探讨儿童剂量不添加防腐剂的流感疫苗制备及其稳定性。方法将H1N1、H3N2、B型流感病毒接种于鸡胚尿囊液中制备儿童剂量的3批不含硫柳汞的流感病毒裂解疫苗,进行疫苗的稳定性试验。分别采用单向免疫扩散法（SRID）及酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血凝素及卵清蛋白浓度,并检测疫苗总蛋白浓度、外观、无菌试验、内毒素、游离甲醛及pH值等。结果疫苗pH值为7.2,总蛋白浓度为182～189mg/mL。2～8℃保存3、6、9、12、18个月及（37.0±2.0）℃放置7、14d,H1N1、H3N2及B血凝素浓度有所下降,但最终均保持在6.0μg/0.25mL以上。结论不添加硫柳汞的流感疫苗稳定性符合《中国药典》（2010版）标准,提高了疫苗的安全性。

氯霉素滴眼液中羟苯乙酯和硫柳汞含量的测定

目的建立测定氯霉素滴眼液中常用抑菌剂羟苯乙酯、硫柳汞的HPLC含量测定方法。方法羟苯乙酯采用DiamonsilC18色谱柱;流动相为0.1%庚烷磺酸钠溶液(0.1%庚烷磺酸钠溶液500mL与二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL,混匀)-乙腈(75∶25);流速:1.0mL·min-1;检测波长为272nm;柱温30℃;硫柳汞采用AgilentEclipseXDB-C18色谱柱;流动相:0.02mol·L-1乙酸铵-甲醇(70∶30);流速:1.0mL·min-1;检测波长为240nm,柱温20℃。结果羟苯乙酯在0.60～300μg·mL-1范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率在98.4%～99.9%之间,硫柳汞在0.50～500μg·mL-1范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.99999),平均回收率在97.65%～98.89%之间,RSD<0.5%。结论通过对市售不同生产单位的氯霉素滴眼液中羟苯乙酯、硫柳汞含量测定,证明方法灵敏、准确,专属性好,适用于检测氯霉素滴眼液中两种常用抑菌剂羟苯乙酯、硫柳汞的含量。

一种测定生物制品中硫柳汞含量的新方法

用V2 O5 HNO3 H2 SO4催化消化冷原子吸收测汞仪测定法测定生物制品中硫柳汞含量具有测定结果精确 ,易重复 ,且简便 ,快速。用硫柳汞标准作标准曲线 ,线性回归方程为Y =1.2 796X - 6 .6 0 45ⅹ 10 - 4 ,相关系数r为 0 .9999。用该方法作 30批次样品内标回收率试验 ,平均回收率为 99.8%± 2 .8% ,变异系数CV为 2 .0 %。该方法是目前测定生物制品中硫柳汞含量较理想的方法 ,建议推广使用。

比色法测定硫柳汞含量的试验考察

利用含丙酮-双硫腙-氢氧化钠的硫柳汞溶液在540nm波长处有最大吸收峰这一特征，用比色法测定生物制品中的硫柳汞含量，操作简便、准确、快速，含量在10μg内呈良好线性关系，平均回收率在104．4％（n＝5），样品平均偏差为0．006（A值）。

毛细管电泳法同时测定盐酸萘甲唑林滴鼻液中有机汞抑菌剂硫柳汞及其活性成分

目的:采用毛细管区带电泳法同时分析测定盐酸萘甲唑林滴鼻液中有机汞抑菌剂硫柳汞及其活性成分盐酸萘甲唑林。方法:采用未涂层石英毛细管(50μm i.d.×46 cm,有效长度37 cm)为分离通道,20 mmol.L-1磷酸二氢钠(pH=6.5)为运行缓冲溶液;高度差进样,进样时间10 s;运行电压20 kV;紫外检测波长240 nm。结果:硫柳汞、盐酸萘甲唑林分别在6.15～196μg.mL-1和0.122～3.87 mg.mL-1范围内线性关系良好,回收率大于97.7%,RSD均小于3.2%。结论:本方法操作简便,分析时间短,整个分析过程在5 min内完成,专属性强,为盐酸萘甲唑林滴鼻液中硫柳汞及其活性成分盐酸萘甲唑林的同时检测提供一种新型的分析手段。

硫柳汞酊含量测定方法的探讨

目的：建立测定硫柳汞酊含量的方法。方法：选择盐酸液（０．１ｍｏｌ·Ｌ－１）为稀释剂，用紫外分光光度法测定，测定波长为 ２４８ｎｍ。结果：硫柳汞在 １４～２６μｇ·ｍｌ－１浓度范围内线性良好， ｒ＝ ０．９９９９。平均回收率 ９９．８％， ＲＳＤ为０．４％。结论：该方法准确快速，不污染环境。

不含硫柳汞重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)的免疫原性及稳定性

目的观察不含硫柳汞重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)的免疫原性及其稳定性。方法配制12批不含硫柳汞的重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞),观察其免疫原性及在4、22和37℃保存不同时间的稳定性。结果该疫苗各项检测指标均符合《中国药典》三部(2005版)要求,实验组与对照组的效价测定结果差异无显著意义。10μg/ml疫苗22℃放置6个月和4℃放置12个月效力均未下降;20μg/ml疫苗在37℃放置4周后,效力略有下降。结论为婴幼儿提供了一种更加安全有效的重组乙型肝炎疫苗。

电感耦合等离子体原子发射光谱仪(ICP-AES)测定重组酵母乙肝疫苗中硫柳汞的含量

目的 ICP-AES测定重组酵母乙肝疫苗中硫柳汞的含量。方法样品消化后直接用ICP-AES检测。结果线性相关性好,重复性实验变异系数均小于4%,样品回收率超过99%。结论 ICP-AES能够满足重组酵母乙肝疫苗中硫柳汞含量检测的技术要求,是一种快速、有效、准确的分析方法。

含硫柳汞成分生物制品的安全问题

自1930年以来,在许多生物制品和药品中使用硫柳汞作为防腐剂。由于少量有机汞在理论上具有神经毒性,因此,对于含有硫柳汞的疫苗的使用安全问题引起广泛地关注。目前,没有证据表明婴儿、儿童或成人接种含硫柳汞的疫苗后出现汞中毒。因此,改变生物制品中硫柳汞的含量,应考虑其对制品的质量、有效性、安全性和稳定性方面是否有影响。

HPLC法测定细菌溶解物(兰菌净)中的硫柳汞含量

目的建立细菌溶解物(兰菌净)中硫柳汞的检测方法。方法采用HPLC法对兰菌净中的硫柳汞进行含量测定。以Nova-pack ODS(3.6mm×150cm,4μm)色谱柱为固定相;甲醇-0.01molL-1醋酸铵(冰醋酸调节pH4.5)为流动相进行梯度洗脱;流速为1mLmin-1;检测波长为258nm。结果硫柳汞在0.1040～2.079μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9997。样品中硫柳汞的平均回收率为97.68%(n=9,RSD=1.36%)。硫柳汞定量限为0.01μg。用本文建立的方法对5个批次兰菌净中的硫柳汞进行了测定,其含量为0.094～0.095mgmL-1。结论本方法准确可靠,可作为细菌溶解物(兰菌净)中硫柳汞的检测方法。

紫外法测定硫柳汞醇溶液的含量

目的:寻找操作简便、快速准确的测定硫柳汞醇溶液含量的定量方法。方法:采用紫外分光光度法,溶剂为0.1mol／L HCL溶液,检测波长为248nm。结果:标准曲线回归方程为Y=0.02079X-0.0178,r=0.9999,线性范围为20μg／mL-60μg／mL,平均回收率为100.3％,RSD=0.73％,n=9。结论:该方法具有操作简便、测定准确的特点,结果满意。

冷原子吸收法测定肌注免疫球蛋白中硫柳汞含量

本文用5％KMNO_4及浓H_2SO_4在100℃水浴中将肌注免疫球蛋白样品消化30分钟后,用冷原子吸收法来测定其硫柳汞的含量,其线性的平均r(相关系数)为0.9992,平均回收率为100.9％,(97.7～104％),CV值在0.9～3.8％。与传统的双硫腙滴定法比较,实验结果准确可靠,方法简单、迅速,值得推广。

硫柳汞对早产大鼠前额叶5-HT2AR和DRD4表达的研究

目的探讨硫柳汞对早产大鼠前额叶(PFC)皮层5羟色胺受体2A(5-HT2AR)和多巴胺受体D4(DRD4)的研究。方法以人用疫苗中的常用硫柳汞含量(12.5μg/剂)为参照,分别按1、2、3、4倍剂量,根据体表面积转换法得出大鼠肌注计量为32.80μg/kg、65.60μg/kg、98.4μg/kg和131.20μg/kg,在出生第1天,分别一次性臀部注射给孕20天剖腹出生的早产大鼠,同时选注射生理盐水组作为对照,并采用Western blot技术测量出生后第49天PFC中5-HT2AR和DRD4的表达。结果 5组间5-HT2AR和DRD4的表达有显著性差异(F=27.089,P<0.01;F=91.034,P<0.01)。与生理盐水组比较,131.20μg/kg组PFC的5-HT2AR和DRD4的表达减退(q=7.824,P<0.01;q=8.311,P<0.01),余组未发现显著变化。结论 高浓度硫柳汞暴露后PFC的5-HT2AR和DRD4的表达减低,提示注意回避同时或短时间内连续接种以硫柳汞为防腐成分的疫苗。

硫柳汞对白血病细胞株凋亡及自噬调控的研究

目的:探讨不同浓度硫柳汞对人白血病细胞株U937、CEM-C1、BALL-1凋亡及自噬调控的影响。方法:应用CCK-8法检测硫柳汞对U937、CEM-C1、BALL-1细胞增殖抑制作用,Annexin V FITC/PI双染流式细胞术检测其凋亡率,Western blot法检测硫柳汞对细胞自噬信号通路PI3K/Akt/mTOR以及PI3K、Akt、mT OR、p-mT OR、Caspase-3、LC3-II蛋白表达的影响。结果:在24和48 h内,硫柳汞对U937、CEM-C1、BALL-1细胞系具有增殖抑制作用且呈时间、剂量依赖性(r_(24 h)=0.295,r_(24 h)=0.452,r_(24 h)=0.103;r_(48 h)=0.821,r_(48 h)=0.665,r_(48 h)=0.821),而72 h未见明显的时间、剂量依赖性。硫柳汞处理U937、CEM-C1和BALL-1细胞48 h,其凋亡率均呈剂量依赖性升高(r=0.819,r=0.763,r=0.835)。硫柳汞作用U937、CEM-C1、BALL-1细胞48 h,细胞PI3K、AKT、mT OR、r-mT OR蛋白表达呈浓度依赖性下调,其中U937细胞值分别为-0.975、-0.899、-0.925、-0.915,CEM-C1细胞r p值分别为-0.960、-0.920、-0.861、r=-0.927,BALL-1细胞r值分别为-0.939、-0.911、-0.896、-0.926,表明硫柳汞诱导U937、CEM-C1、BALL-1细胞凋亡可能是因为抑制了PI3K/AKT/mTOR通路。硫柳汞通过Caspase-3途径促进U937、CEM-C1、BALL-1细胞凋亡,Caspase-3、LC3-II表达呈剂量依赖性上调(r=0.976,r=0.914;r=0.976,r=0.986;r=0.961,r=0.974)。结论:硫柳汞能够抑制U937、CEM-C1、BALL-1细胞增殖并促进其凋亡,一定浓度的硫柳汞可下调U937、CEM-C1、BALL-1细胞PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白PI3K、AKT、mT OR、p-mT OR的表达,同时通过下调PI3K/Akt/mTOR通路激活U937、CEM-C1、BALL-1细胞自噬、诱导凋亡。

醋酸曲安奈德注射液中硫柳汞的测定方法研究

目的建立醋酸曲安奈德注射液中硫柳汞的HPLC测定方法。方法以C18柱为固定相;甲醇-pH=5.0磷酸盐缓冲溶液(35:65)为流动相;流速:1mL/min;柱温:25℃;检测波长:248nm;进样量:20μL。结果硫柳汞在进样量为0.0505~0.824μg范围内线性关系良好。回归方程为:Y=5.248×105 X+131.2,r=0.999 6。平均回收率为99.32%,RSD=1.3%。结论该法选择性好、灵敏度高、重现性好、准确度高。可用于控制醋酸曲安奈德注射液中硫柳汞的含量。

紫外法测定硫柳汞醇溶液的含量

目的:寻找操作简便、快捷准确的硫柳汞醇溶液的定量方法.方法:紫外分光光度法,溶剂为0.1 mol/L HCL液,波长248nm.结果:标准曲线回归方程为Y=0.02079X-0.0178,r=0.99999,线性范围为20-60μg/ml,回收率为99.28%,RSD=0.925%,n=15.结论:该法具有操作简便、测定准确等特点,结果满意.